【技术实现步骤摘要】
构建重组腺病毒载体的方法与以其构建的重组腺病毒载体及应用
[0001]本专利技术涉及一种构建重组腺病毒载体的方法与以其构建的重组腺病毒载体及应用。
技术介绍
[0002]癌症是引起人类死亡的主要病因，2020年全球预计出现1930万癌症新发病例和1000万癌症死亡病例。由于肿瘤的多样性、耐药性、浸润性和复杂的肿瘤微环境使传统的治疗方法不能有效的治愈肿瘤，溶瘤病毒的出现为肿瘤的治疗提供了一种新的治疗策略。溶瘤病毒是一类能够选择性感染肿瘤细胞，并裂解肿瘤细胞而不影响正常细胞的一类病毒。
[0003]常用的溶瘤病毒有痘苗病毒、腺病毒、疱疹病毒、新城疫病毒、脊髓灰质炎病毒，基于这些病毒的早期临床试验正在进行中。其中，腺病毒由于自身独特的优势成为了溶瘤病毒研究的热点之一。腺病毒作为溶瘤病毒的优势十分明显：对腺病毒研究比较透彻，其基因的结构、功能以及与宿主相互作用的研究已经非常深入；腺病毒基因组约为36KB，易于基因的改造；腺病毒不会整合到宿主基因组中，不会产生插入突变，安全性好；腺病毒可以感染多种哺乳动物的细胞，因此许多策略被...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.构建重组腺病毒载体的方法，其特征在于：所述方法是对黑猩猩腺病毒AdC6进行改造得到重组腺病毒载体，所述改造包括：完全或部分删除AdC6的E1基因序列，部分删除AdC6的E3基因序列，并且用C亚型人腺病毒基因组的E4基因序列改造AdC6的E4基因序列。2.根据权利要求1所述的构建重组腺病毒载体的方法，其特征在于：所述部分删除AdC6的E3基因序列为A1或A2：A1、保留AdC6 E3基因的ORF1序列，部分或全部删除AdC6 E3基因的其它序列；A2、保留AdC6 E3基因的ORF1序列和ORF9序列，部分或全部删除AdC6 E3基因的其它序列；所述用C亚型人腺病毒基因组的E4基因序列改造AdC6的E4基因序列为B1
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B3的任一种：B1、用C亚型人腺病毒基因组的对应序列替换AdC6 E4基因的ORF6序列和/或ORF6/7序列；B2、在B1的基础上用C亚型人腺病毒基因组的对应序列替换AdC6 E4基因的ORF4序列；B3、在B1或B2的基础上删除AdC6 E4基因的ORF1序列和/或ORF2序列。3.根据权利要求1或2所述的构建重组腺病毒载体的方法，其特征在于：所述重组腺病毒载体为非复制型腺病毒载体，所述完全或部分删除AdC6的E1基因序列为完全删除AdC6E1基因序列。4.根据权利要求3所述的构建重组腺病毒载体的方法，其特征在于：所述重组腺病毒载体为如下1)
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5)中的任一种：1)名为pAdC6XY2的重组腺病毒载体，所述pAdC6XY2的核苷酸序列为将序列表序列1删除第563
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3413位，删除序列表序列1第27441
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31864位，并用序列表序列2第280
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1164位替换序列表序列1第33841
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34746位得到的核苷酸序列；2)名为pAdC6XY3的重组腺病毒载体，所述pAdC6XY3的核苷酸序列为将序列表序列1删除第563
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3413位，删除序列表序列1第27441
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31864位，并用序列表序列2第1
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1440位替换序列表序列1第33593
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35026位得到的核苷酸序列；3)名为pAdC6XY4的重组腺病毒载体，所述pAdC6XY4的核苷酸序列为将序列表序列1删除第563
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3413位，删除序列表序列1第27441
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31864位，用序列表序列2第1
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1440位替换序列表序列1第33593
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35026位，且删除序列表序列1第35381
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36190位，得到的核苷酸序列；4)名为pAdC6XY5的重组腺病毒载体，所述pAdC6XY5的核苷酸序列为将序列表序列1删除第563
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3413位，删除序列表序列1第27441
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31456位，用序列表序列2第1
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1440位替换序列表序列1第33593
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35026位，得到的核苷酸序列；5)名为pAdC6XY6的重组腺病毒载体，所述pAdC6XY6的核苷酸序列为将序列表序列1删除第563
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3413位，删除序列表序列1第27441
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31456位，用序列表序列2第1
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1440位替换序列表序列1第33593
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35026位，且删除序列表序列1第35381
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36190位...
【专利技术属性】
技术研发人员：周东明，邢嫚，
申请(专利权)人：苏州相奕生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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