用于调节制造技术

本文公开了工程化细胞和

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于调节CAR
‑
T活性的方法和组合物
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请根据美国法典第
35
条第
119(e)
款要求
2020
年
12
月
31
日提交的美国临时申请号
63/133,171
；
2021
年1月
11
日提交的
63/136,172
；
2021
年4月
14
日提交的
63/175,003
；
2021
年
10
月
14
日提交的
63/255,795
；和
2021
年
12
月
10
日提交的
63/288,477
的优先权，所述申请的公开内容通过引用整体并入本文
。

技术实现思路

[0003]现成的
CAR
‑
T
细胞和其他治疗细胞可以提供优于基于自体细胞的策略的优势，包括易于制造
、
质量控制以及避免恶性污染和
T
细胞功能障碍
。
然而，针对组织不相容性
T
细胞的强烈宿主抗移植物免疫反应阻止同种异体
CAR
‑
T
细胞的扩增和持续存在，并降低这种途径的功效
。
[0004]在动物模型和人类患者中都有大量证据表明，低免疫原性细胞移植是一种科学可行并且临床上有前途的治疗多种病症
、
病状和疾病的途径
。
[0005]仍然需要用于产生避免被受体免疫系统检测的基于细胞的疗法的新途径
、
组合物和方法
。
[0006]在一些实施方案中，本文提供了一种工程化细胞，其相对于野生型细胞或对照细胞包含降低的
HLA
‑
A、HLA
‑
B、HLA
‑
C、HLA
‑
DP、HLA
‑
DQ、HLA
‑
DR、B2M、CIITA、TCR
‑
α
和
/
或
TCR
‑
β
的表达，所述工程化细胞还包含一组外源多核苷酸，所述一组外源多核苷酸包含编码
CD47
的第一外源多核苷酸和编码嵌合抗原受体
(CAR)
的第二外源多核苷酸，其中第一和
/
或第二外源多核苷酸插入到细胞的至少一个等位基因的特定基因座中
。
在一些实施方案中，使用病毒转导
(
例如使用载体
)
将外源多核苷酸插入到细胞的至少一个等位基因中
。
在一些实施方案中，载体是携带外源多核苷酸的假型化
、
自灭活慢病毒载体
。
在一些实施方案中，载体是用水疱性口炎病毒糖蛋白
(VSV
‑
G)
包膜假型化的自灭活慢病毒载体，并携带外源多核苷酸
。
在一些实施方案中，使用病毒转导将外源多核苷酸插入到细胞的至少一个等位基因中
。
在一些实施方案中，使用基于慢病毒的病毒载体将外源多核苷酸插入到细胞的至少一个等位基因中
。
[0007]在一些实施方案中，特定基因座选自由以下组成的组：安全港或靶标基因座
、B2M
基因座
、CIITA
基因座
、TRAC
基因座和
TRB
基因座
。
在许多实施方案中，将编码
CD47
的第一外源多核苷酸插入到选自由以下组成的组的特定基因座中：安全港或靶标基因座
、B2M
基因座
、CIITA
基因座
、TRAC
基因座和
TRB
基因座
。
在一些实施方案中，将编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到选自由以下组成的组的特定基因座中：安全港或靶标基因座
、B2M
基因座
、CIITA
基因座
、TRAC
基因座和
TRB
基因座
。
在一些实施方案中，使用病毒转导
(
例如使用载体
)
将外源多核苷酸插入到细胞的至少一个等位基因中
。
在一些实施方案中，载体是携带外源多核苷酸的假型化
、
自灭活慢病毒载体
。
在一些实施方案中，载体是用水疱性口炎
VSV
‑
G
包膜假型化的自灭活慢病毒载体，并携带外源多核苷酸
。
在一些实施方案中，使用病毒转导将外源多核苷酸插入到细胞的至少一个等位基因中
。
在一些实施方案中，使用基于慢病毒的病毒
载体将外源多核苷酸插入到细胞的至少一个等位基因中
。
[0008]在一些实施方案中，将编码
CD47
的第一外源多核苷酸和编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到不同的基因座中
。
在许多实施方案中，将编码
CD47
的第一外源多核苷酸和编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到相同的基因座中
。
在若干实施方案中，将编码
CD47
的第一外源多核苷酸和编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到
B2M
基因座中
。
在一些实施方案中，将编码
CD47
的第一外源多核苷酸和编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到
CIITA
基因座中
。
在许多实施方案中，将编码
CD47
的第一外源多核苷酸和编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到
TRAC
基因座中
。
在一些实施方案中，将编码
CD47
的第一外源多核苷酸和编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到
TRB
基因座中
。
在一些实施方案中，将编码
CD47
的第一外源多核苷酸和编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到安全港或靶标基因座中
。
在一些实施方案中，安全港或靶标基因座选自由以下组成的组：
CCR5
基因座
、CXCR4
基因座
、PPP1R12C(
也称为
AAVS1)
基因座
、
白蛋白基因座
、SHS231...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种工程化细胞，其相对于野生型细胞或对照细胞包含降低的
HLA
‑
A、HLA
‑
B、HLA
‑
C、HLA
‑
DP、HLA
‑
DQ、HLA
‑
DR、B2M、CIITA、TCR
‑
α
和
/
或
TCR
‑
β
的表达，所述工程化细胞还包含一组外源多核苷酸，所述一组外源多核苷酸包含编码
CD47
的第一外源多核苷酸和编码嵌合抗原受体
(CAR)
的第二外源多核苷酸，其中所述第一和
/
或第二外源多核苷酸插入到所述细胞的至少一个等位基因的特定基因座中
。2.
如权利要求1所述的工程化细胞，其中所述特定基因座选自由以下组成的组：安全港或靶标基因座
、B2M
基因座
、CIITA
基因座
、TRAC
基因座和
TRB
基因座
。3.
如权利要求2所述的工程化细胞，其中将所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸插入到选自由以下组成的组的特定基因座中：安全港或靶标基因座
、B2M
基因座
、CIITA
基因座
、TRAC
基因座和
TRB
基因座
。4.
如权利要求2或3所述的工程化细胞，其中将所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到选自由以下组成的组的特定基因座中：安全港或靶标基因座
、B2M
基因座
、CIITA
基因座
、TRAC
基因座和
TRB
基因座
。5.
如权利要求2‑4中任一项所述的工程化细胞，其中将所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到不同的基因座中
。6.
如权利要求2‑4中任一项所述的工程化细胞，其中将所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到相同的基因座中
。7.
如权利要求2‑4或6中任一项所述的工程化细胞，其中将所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到所述
B2M
基因座中
。8.
如权利要求2‑4或6中任一项所述的工程化细胞，其中将所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到所述
CIITA
基因座中
。9.
如权利要求2‑4或6中任一项所述的工程化细胞，其中将所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到所述
TRAC
基因座中
。10.
如权利要求2‑4或6中任一项所述的工程化细胞，其中将所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到所述
TRB
基因座中
。11.
如权利要求2‑4或6中任一项所述的工程化细胞，其中将所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸插入到所述安全港或靶标基因座中
。12.
如权利要求2‑6或
11
中任一项所述的工程化细胞，其中所述安全港基因座选自由以下组成的组：
CCR5
基因座
、PPP1R12C
基因座
、CLYBL
基因座和
Rosa
基因座，并且所述靶标基因座选自由以下组成的组：
CXCR4
基因座
、
白蛋白基因座
、SHS231
基因座
、F3(CD142)
基因座
、MICA
基因座
、MICB
基因座
、LRP1(CD91)
基因座
、HMGB1
基因座
、ABO
基因座
、RHD
基因座
、FUT1
基因座和
KDM5D
基因座
。13.
如权利要求1‑
12
中任一项所述的工程化细胞，其中所述
CAR
选自由
CD19
特异性
CAR
和
CD22
特异性
CAR
组成的组
。14.
如权利要求
13
所述的工程化细胞，其中所述
CD19
特异性
CAR
基本上等同于选自由以下组成的组的基于
CAR
‑
T
细胞的疗法中的任一种的
CD19
特异性
CAR
：
axicabtagene ciloleucel、lisocabtagene maraleucel、brexucabtagene autoleucel
和
tisagenlecleucel。15.
如权利要求1‑
12
中任一项所述的工程化细胞，其中所述
CAR
是双特异性
CAR。
16.
如权利要求
14
所述的工程化细胞，其中所述
CAR
是
CD 19/CD22
双特异性
CAR。17.
如权利要求1‑
16
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞不表达
HLA
‑
A、HLA
‑
B
和
/
或
HLA
‑
C
抗原
。18.
如权利要求1‑
17
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞不表达
B2M。19.
如权利要求1‑
18
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞不表达
HLA
‑
DP、HLA
‑
DQ
和
/
或
HLA
‑
DR
抗原
。20.
如权利要求1‑
19
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞不表达
CIITA。21.
如权利要求1‑
20
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞不表达
TCR
‑
α
和
/
或
TCR
‑
β
。22.
如权利要求1‑
21
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞是多能干细胞
。23.
如权利要求1‑
21
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞是诱导性多能干细胞
。24.
如权利要求1‑
21
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞是来源于诱导性多能干细胞的分化细胞
。25.
如权利要求
24
所述的工程化细胞，其中所述分化细胞选自由
NK
细胞和
T
细胞组成的组
。26.
如权利要求1‑
21
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞是来源于原代
T
细胞的细胞
。27.
如权利要求
26
所述的工程化细胞，其中所述来源于原代
T
细胞的细胞来源于
T
细胞库，所述
T
细胞库包含来自不同于受体受试者的一个或多个供体受试者的原代
T
细胞
。28.
如权利要求1‑
23
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞保留多能性且
/
或保留分化潜能
。29.
如权利要求1‑
28
中任一项所述的工程化细胞，其中在转移到第一受试者体内后，所述工程化细胞表现出选自由以下组成的组的一种或多种反应：
(a)T
细胞反应，
(b)NK
细胞反应，和
(c)
巨噬细胞反应，所述反应与转移到第二受试者体内后的野生型细胞相比有所降低
。30.
如权利要求1‑
29
中任一项所述的工程化细胞，其中所述第一受试者和所述第二受试者是不同的受试者
。31.
如权利要求
29
或
30
所述的工程化细胞，其中所述巨噬细胞反应是吞噬
。32.
如权利要求1‑
31
中任一项所述的工程化细胞，其中与转移到受试者体内后的野生型细胞相比，所述工程化细胞在转移到所述受试者体内后表现出选自由以下组成的组的一项或多项：
(a)
所述受试者的
TH1
活化减少，
(b)
所述受试者的
NK
细胞杀伤减少，和
(c)
所述受试者的完整
PBMC
的杀伤减少
。33.
如权利要求1‑
32
中任一项所述的工程化细胞，其中与转移到受试者体内后的野生型细胞相比，所述工程化细胞在转移到所述受试者体内后引发选自由以下组成的组的一项或多项：
(a)
所述受试者的供体特异性抗体减少，
(b)
所述受试者的
IgM
或
IgG
抗体减少，和
(c)
所述受试者的补体依赖性细胞毒性
(CDC)
减少
。34.
如权利要求1‑
33
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组
成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞是包含插入到所述
TRAC
基因座中的所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和
/
或所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸的
B2M
插入缺失
/
插入缺失
、CIITA
插入缺失
/
插入缺失
、TRAC
插入缺失
/
插入缺失
细胞
。35.
如权利要求1‑
34
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞是包含插入到所述
TRAC
基因座中的所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸的
B2M
插入缺失
/
插入缺失
、CIITA
插入缺失
/
插入缺失
、TRAC
插入缺失
/
插入缺失
细胞
。36.
如权利要求1‑
33
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞是包含插入到所述
TRB
基因座中的所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和
/
或所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸的
B2M
插入缺失
/
插入缺失
、CIITA
插入缺失
/
插入缺失
、TRAC
插入缺失
/
插入缺失
细胞
。37.
如权利要求1‑
33
或
36
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞是包含插入到所述
TRB
基因座中的所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸的
B2M
插入缺失
/
插入缺失
、CIITA
插入缺失
/
插入缺失
、TRAC
插入缺失
/
插入缺失
细胞
。38.
如权利要求1‑
33
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞是包含插入到所述
B2M
基因座中的所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和
/
或所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸的
B2M
插入缺失
/
插入缺失
、CIITA
插入缺失
/
插入缺失
、TRAC
插入缺失
/
插入缺失
细胞
。39.
如权利要求1‑
33
或
38
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞是包含插入到
B2M
基因座中的所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸的
B2M
插入缺失
/
插入缺失
、CIITA
插入缺失
/
插入缺失
、TRAC
插入缺失
/
插入缺失
细胞
。40.
如权利要求1‑
33
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞是包含插入到所述
CIITA
基因座中的所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和
/
或所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸的
B2M
插入缺失
/
插入缺失
、CIITA
插入缺失
/
插入缺失
、TRAC
插入缺失
/
插入缺失
细胞
。41.
如权利要求1‑
33
或
40
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞是包含插入到
CIITA
基因座中的所述编码
CD47
的第一外源多核苷酸和所述编码
CAR
的第二外源多核苷酸的
B2M
插入缺失
/
插入缺失
、CIITA
插入缺失
/
插入缺失
、TRAC
插入缺失
/
插入缺失
细胞
。
42.
一种工程化细胞，其相对于野生型细胞或对照细胞包含降低的
HLA
‑
A、HLA
‑
B、HLA
‑
C、HLA
‑
DP、HLA
‑
DQ、HLA
‑
DR、B2M、CIITA、TCR
‑
α
和
/
或
TCR
‑
β
的表达
。43.
如权利要求
42
所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞不表达
HLA
‑
A、HLA
‑
B
和
/
或
HLA
‑
C
抗原
。44.
如权利要求
42
或
43
所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞不表达
CIITA。45.
如权利要求
42
‑
44
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞不表达
HLA
‑
DP、HLA
‑
DQ
和
/
或
HLA
‑
DR
抗原
。46.
如权利要求
42
‑
45
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞不表达
B2M。47.
如权利要求
42
‑
46
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞不表达
TCR
‑
α
。48.
如权利要求
42
‑
47
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞不表达
TCR
‑
β
。49.
如权利要求
42
‑
48
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞相对于野生型细胞或对照细胞过表达
CD47。50.
如权利要求
42
‑
49
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞是多能干细胞
。51.
如权利要求
42
‑
50
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞是诱导性多能干细胞
。52.
如权利要求
42
‑
49
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞是来源于诱导性多能干细胞的分化细胞
。53.
如权利要求
52
所述的工程化细胞，其中所述分化细胞选自由
NK
细胞和
T
细胞组成的组
。54.
如权利要求
42
‑
51
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞是来源于原代
T
细胞的细胞
。55.
如权利要求
54
所述的工程化细胞，其中所述来源于原代
T
细胞的细胞来源于
T
细胞库，所述
T
细胞库包含来自不同于受体受试者的一个或多个供体受试者的原代
T
细胞
。56.
如权利要求
42
‑
51
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞保留多能性且
/
或保留分化潜能
。57.
如权利要求
42
‑
56
中任一项所述的工程化细胞，其中在转移到第一受试者体内后，所述工程化细胞表现出选自由以下组成的组的一种或多种反应：
(a)T
细胞反应，
(b)NK
细胞反应，和
(c)
巨噬细胞反应，所述反应与转移到第二受试者体内后的野生型细胞相比有所降低
。58.
如权利要求
57
所述的工程化细胞，其中所述第一受试者和所述第二受试者是不同的受试者
。59.
如权利要求
57
或
58
所述的工程化细胞，其中所述巨噬细胞反应是吞噬
。60.
如权利要求
42
‑
59
中任一项所述的工程化细胞，其中与转移到受试者体内后的野生型细胞相比，所述工程化细胞在转移到所述受试者体内后表现出选自由以下组成的组的一
项或多项：
(a)
所述受试者的
TH1
活化减少，
(b)
所述受试者的
NK
细胞杀伤减少，和
(c)
所述受试者的完整
PBMC
的杀伤减少
。61.
如权利要求
42
‑
60
中任一项所述的工程化细胞，其中与转移到受试者体内后的野生型细胞相比，所述工程化细胞在转移到所述受试者体内后引发选自由以下组成的组的一项或多项：
(a)
所述受试者的供体特异性抗体减少，
(b)
所述受试者的
IgM
或
IgG
抗体减少，和
(c)
所述受试者的补体依赖性细胞毒性
(CDC)
减少
。62.
如权利要求
42
‑
61
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞选自由以下组成的组：多能干细胞
、
诱导性多能干细胞
、
从诱导性多能干细胞分化的
T
细胞
、
原代
T
细胞和来源于原代
T
细胞的细胞，并且所述工程化细胞是
B2M
插入缺失
/
插入缺失
、CIITA
插入缺失
/
插入缺失
、TRAC
插入缺失
/
插入缺失
和
/
或
TRB
插入缺失
/
插入缺失
细胞
。63.
如权利要求1‑
62
中任一项所述的工程化细胞，其中所述工程化细胞是低免疫原性细胞
。64.
如权利要求1‑
63
中任一项所述的工程化细胞，其中所述野生型细胞或对照细胞是起始材料
。65.
如权利要求1‑
64
中任一项所述的工程化细胞，其中使用病毒转导将所述第一和
/
或第二外源多核苷酸插入到所述细胞的至少一个等位基因中
。66.
如权利要求
65
所述的工程化细胞，其中所述病毒转导经由基于慢病毒的病毒载体进行
。67.
如权利要求
66
所述的工程化细胞，其中所述基于慢病毒的病毒载体是携带所述第一和
/
或第二外源多核苷酸的假型化
、
自灭活慢病毒载体
。68.
如权利要求
66
或
67
所述的工程化细胞，其中所述基于慢病毒的病毒载体是用水疱性口炎
VSV
‑
G
包膜假型化的自灭活慢病毒载体，并且携带所述第一和
/
或第二外源多核苷酸
。69.
一种药物组合物，其包含如权利要求1‑
68
中任一项所述的工程化细胞群和药学上可接受的添加剂
、
载剂
、
稀释剂或赋形剂
。70.
如权利要求
69
所述的药物组合物，其中所述药学上可接受的添加剂
、
载剂
、
稀释剂或赋形剂包括选自由以下组成的组的一种或多种：
Plasma
‑
Lyte
右旋糖
、
葡聚糖
、
氯化钠
、
人血清白蛋白
(HSA)、
二甲基亚砜
(DMSO)
及其组合
。71.
如权利要求
69
或
70
所述的药物组合物，其还包含药学上可接受的缓冲剂
。72.
如权利要求
71
所述的药物组合物，其中所述药学上可接受的缓冲剂是中性缓冲盐水或磷酸盐缓冲盐水
。73.
一种药物组合物，其包含如权利要求1‑
68
中任一项所述的工程化细胞群
、
浓度为约
70
‑
80
％重量
/
重量的
CSB
的基础溶液，以及以下中的一种或多种：约
20
‑
30
％重量
/
重量的
PlasmaLyte
‑
A
TM
、
约
0.3
‑
5.3
％重量
/
体积的人血清白蛋白
(HSA)、
约0‑
20
％体积
/
体积的二甲亚砜
(DMSO)
和约
100
‑
400mM
海藻糖
。74.
一种药物组合物，其包含如权利要求1‑
68
中任一项所述的工程化细胞群
、
浓度为约
20
‑
30
％重量
/
重量的
PlasmaLyte
‑
A
TM
的基础溶液，以及以下中的一种或多种：约
70
‑
80
％重量
/
重量的
CSB、
约
0.3
‑
5.3
％重量
/
体积的人血清白蛋白
(HSA)、
约0‑
20
％体积
/
体积的二甲亚砜
(DMSO)
和约
100
‑
400mM
海藻糖
。
75.
一种药物组合物，其包含如权利要求1‑
68
中任一项所述的工程化细胞群
、
约
0.3
‑
5.3
％重量
/
体积的人血清白蛋白
(HSA)
，以及以下中的一种或多种：约
70
‑
80
％重量
/
重量的
CSB、
约
20
‑
30
％重量
/
重量的
PlasmaLyte
‑
A
TM
、
约0‑
20
％体积
/
体积的二甲亚砜
(DMSO)
和约
100
‑
400mM
海藻糖
。76.
一种药物组合物，其包含如权利要求1‑
68
中任一项所述的工程化细胞群
、
约0‑
20
％体积
/
体积的二甲亚砜
(DMSO)
，以及以下中的一种或多种：约
70
‑
80
％重量
/
重量的
CSB、
约
20
‑
30
％重量
/
重量的
PlasmaLyte
‑
A
TM
、
约
0.3
‑
5.3
％重量
/
体积的人血清白蛋白
(HSA)
和约
100
‑
400mM
海藻糖
。77.
一种药物组合物，其包含如权利要求1‑
68
中任一项所述的工程化细胞群
、
约
100
‑
400mM
海藻糖，以及以下中的一种或多种：约
70
‑
80
％重量
/
重量的
CSB、
约
20
‑
30
％重量
/
重量的
PlasmaLyte
‑
A
TM
、
约
0.3
‑
5.3
％重量
/
体积的人血清白蛋白
(HSA)
和约0‑
20
％体积
/
体积的二甲亚砜
(DMSO)。78.
如权利要求
69
‑
77
中任一项所述的药物组合物，其包含约
75
％重量
/
重量的
CSB。79.
如权利要求
69
‑
78
中任一项所述的药物组合物，其包含约
25
％重量
/
重量的
PlasmaLyte
‑
A
TM
。80.
如权利要求
69
‑
79
中任一项所述的药物组合物，其包含约
0.3
％重量
/
体积的
HSA。81.
如权利要求
69
‑
81
中任一项所述的药物组合物，其包含约
7.5
％体积
/
体积的
DMSO。82.
一种药物组合物，其包含如权利要求1‑
68
中任一项所述的工程化细胞群
、
浓度为约
75
％重量
/
重量的
CSB
的基础溶液
、
约
25
％重量
/
重量的
PlasmaLyte
‑
A
TM
、
约
0.3
％重量
/
体积的人血清白蛋白
(HSA)
和约
7.5
％体积
/
体积的二甲亚砜
(DMSO)。83.
如权利要求
69
‑
82
中任一项所述的药物组合物，其中所述工程化细胞群为至多约
8.0x108个细胞
。84.
如权利要求
69
‑
83
中任一项所述的药物组合物，其中所述工程化细胞群为至多约
6.0x108个细胞
。85.
如权利要求
69
‑
84
中任一项所述的药物组合物，其中所述工程化细胞群为约
1.0x106至约
2.5x108个细胞
。86.
如权利要求
69
‑
85
中任一项所述的药物组合物，其中所述工程化细胞群为约
2.0x106至约
2.0x108个细胞
。87.
如权利要求
69
‑
86
中任一项所述的药物组合物，其中所述工程化细胞群的范围为约
5ml
至约
80ml。88.
如权利要求
69
‑
87
中任一项所述的药物组合物，其中所述工程化细胞群的范围为约
10ml
至约
70ml。89.
如权利要求
69
‑
88
中任一项所述的药物组合物，其中所述工程化细胞群的范围为约
10m1
至约
50ml。90.
如权利要求
69
‑
89
中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物被配制用于以单剂量施用
。91.
如权利要求
69
‑
89
中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物被配制用于以至多三个剂量施用
。
92.
如权利要求
69
‑
91
中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物被配制用于向受试者施用单剂量，所述施用需要约
60
分钟或更短的持续时间
。93.
如权利要求
69
‑
91
中任一项所述的药物组合物，其中所述组合物被配制用于向受试者施用单剂量，所述施用需要约
30
分钟或更短的持续时间
。94.
如权利要求
69
‑
93
中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物的工程化细胞群或其后代在施用后
10
天后在受试者中表现出至少
40
％的存活率
。95.
如权利要求
69
‑
94
中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物的工程化细胞群或其后代在施用后约2周后在受试者中表现出至少
80
％的存活率
。96.
如权利要求
69
‑
95
中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物的工程化细胞群或其后代在施用后约3周后在受试者中表现出至少
100
％的存活率
。97.
如权利要求
69
‑
96
中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物的工程化细胞群或其后代在施用后约4周后在受试者中表现出至少
150
％的存活率
。98.
一种用于治疗受试者的疾病或病症的剂量方案，其包括施用药物组合物，所述药物组合物包含如权利要求1‑
68
中任一项所述的工程化细胞群和药学上可接受的添加剂
、
载剂
、
稀释剂或赋形剂，其中所述药物组合物以约1‑3个剂量施用
。99.
如权利要求
98
所述的剂量方案，其中以约1‑3个剂量施用的所述药物组合物为至多约
6.0x108个细胞
。100.
如权利要求
98
或
99
所述的剂量方案，其中以约1‑3个剂量施用的所述药物组合物为约
0.6x106至约
6.0x108个细胞
。101.
如权利要求
98
或
99
所述的剂量方案，其中如果所述受试者的体重为
50kg
或更小，则以约1‑3个剂量施用的所述药物组合物为约
0.2x106至约
5.0x106细胞
/kg
所述受试者体重
。102.
如权利要求
98
或
99
所述的剂量方案，其中如果所述受试者的体重大于
50kg
，则以约1‑3个剂量施用的所述药物组合物为约
0.1x108至约
2.5x108个细胞
。103.
如权利要求
98
或
99
所述的剂量方案，其中以约1‑3个剂量施用的所述药物组合物为约
2.0x106细胞
/kg
所述受试者体重且至多约
2.x108个细胞
。104.
如权利要求
98
‑
103
中任一项所述的剂量方案，其中向所述受试者施用单剂量需要约
60
分钟或更短的持续时间
。105.
如权利要求
98
‑
104
中任一项所述的剂量方案，其中向所述受试者施用单剂量需要约
30
分钟或更短的持续时间
。106.
如权利要求
98
‑
105
中任一项所述的剂量方案，其中所述药学上可接受的添加剂
、
载剂
、
稀释剂或赋形剂包括选自由以下组成的组的一种或多种：
Plasma
‑
Lyte
右旋糖
、
葡聚糖
、
氯化钠
、
人血清白蛋白
(HSA)、
二甲基亚砜
(DMSO)
及其组合
。107.
如权利要求
98
‑
106
中任一项所述的剂量方案，其中所述药物组合物还包含药学上可接受的缓冲剂
。108.
如权利要求
107
所述的剂量方案，其中所述药学上可接受的缓冲剂是中性缓冲盐水或磷酸盐缓冲盐水
。109.
如权利要求
98
‑
108
中任一项所述的剂量方案，其中在施用所述药物组合物后，所述细胞群或其后代在所述受试者中存在至多9个月
。
110.
如权利要求
98
‑
109
中任一项所述的剂量方案，其中在施用所述药物组合物后，所述细胞群或其后代在所述受试者中存在至少2年或更久
。111.
如权利要求
98
‑
110
中任一项所述的剂量方案，其中在施用所述药物组合物后，所述工程化细胞群或其后代在施用后约
10
天后在受试者中表现出至少
40
％的存活率
。112.
如权利要求
98
‑
111
中任一项所述的剂量方案，其中在施用所述药物组合物后，所述工程化细胞群或其后代在施用后约2周后在受试者中表现出至少
80
％的存活率
。113.
如权利要求
98
‑
112
中任一项所述的剂量方案，其中在施用所述药物组合物后，所述工程化细胞群或其后代在施用后约3周后在受试者中表现出至少
100
％的存活率
。114.
如权利要求
98
‑
113
中任一项所述的剂量方案，其中在施用所述药物组合物后，所述工程化细胞群或其后代在施用后约4周后在受试者中表现出至少
150
％的存活率
。115.
如权利要求
98
‑
114
中任一项所述的剂量方案，其中向所述受试者施用2‑3个剂量，使得每个剂量的施用间隔的范围为1至
24
小时
。116.
如权利要求
98
‑
114
中任一项所述的剂量方案，其中向所述受试者施用2‑3个剂量，使得每个剂量的施用间隔的范围为1至
28
天
。117.
如权利要求
98
‑
114
中任一项所述的剂量方案，其中向所述受试者施用2‑3个剂量，使得每个剂量的施用间隔的范围为1至6周
。118.
如权利要求
98
‑
114
中任一项所述的剂量方案，其中向所述受试者施用2‑3个剂量，使得每个剂量的施用间隔的范围为1至
12
个月或更久
。119.
一种用于治疗受试者的疾病或病症的剂量方案，其包括施用药物组合物，所述药物组合物包含
(i)
工程化细胞，其包含降低的
HLA
‑
A、HLA
‑
B、HLA
‑
C、HLA
‑
DP、HLA
‑
DQ、HLA
‑
DR、B2M、CIITA、TCR
‑
α
和
/
或
TCR
‑
β
的表达，所述工程化细胞还包含一组编码
CD47
和嵌合抗原受体
(CAR)
的外源多核苷酸，其中所述外源多核苷酸组插入到所述细胞的至少一个等位基因的安全港或靶标基因座中；和
(ii)
药学上可接受的添加剂
、
载剂
、
稀释剂或赋形剂，其中所述药物组合物包含至多约
6.0x108个细胞
。120.
一种用于治疗受试者的疾病或病症的剂量方案，其包括施用药物组合物，所述药物组合物包含
(i)
工程化细胞，其包含降低的
HLA
‑
A、HLA
‑
B、HLA
‑
C、HLA
‑
DP、HLA
‑
DQ、HLA
‑
DR、B2M、CIITA、TCR
‑
α
和
/
或
TCR
‑
β
的表达，所述工程化细胞还包含一组编码
CD47
和嵌合抗原受体
(CAR)
的外源多核苷酸，其中所述外源多核苷酸组插入到所述细胞的至少一个等位基因的安全港或靶标基因座中；和
(ii)
药学上可接受的添加剂
、
载剂
、
稀释剂或赋形剂，其中所述药物组合物以1‑3个剂量施用
。121.
一种用于治疗受试者的疾病或病症的剂量方案，其包括施用药物组合物，所述药物组合物包含
(i)
工程化细胞，其包含降低的
HLA
‑
A、HLA
‑
B、HLA
‑
C、HLA
‑
DP、HLA
‑
DQ、HLA
‑
DR、B2M、CIITA、TCR
‑
α
和
/
或
TCR
‑
β
的表达，所述工程化细胞还包含一组编码
CD47
和嵌合抗原受体
(CAR)
的外源多核苷酸，其中所述外源多核苷酸组插入到所述细胞的至少一个等位基因的
安全港或靶标基因座中；和
(ii)
药学上可接受的添加剂
、
载剂
、
稀释剂或赋形剂，其中一剂所述药物组合物施用约
60
分钟或更短的持续时间
。122.
一种用于治疗受试者的疾病或病症的剂量方案，其包括施用药物组合物，所述药物组合物包含
(i)
工程化细胞，其包含降低的
HLA
‑
A、HLA
‑
B、HLA
‑
C、HLA
‑
DP、HLA
‑
DQ、HLA
‑
DR、B2M、CIITA、TCR
‑
α
和
/
或
TCR
‑
β
的表达；和
(ii)
药学上可接受的添加剂
、
载剂
、
稀释剂或赋形剂，其中所述药物组合物包含至多约
6.0x108个细胞
。123.
一种用于治疗受试者的疾病或病症的剂量方案，其包括施用药物组合物，所述药物组合物包含
(i)
工程化细胞，其包含降低的
HLA
‑
A、HLA
‑
B、HLA
‑
C、HLA
‑
DP、HLA
‑
DQ、HLA
‑
DR、B2M、CIITA、TCR
‑
α
和
/
或
TCR
‑
β
的表达；和
(ii)
药学上可接受的添加剂
、
载剂
、
稀释剂或赋形剂，其中所述药物组合物以1‑3个剂量施用
。124.
一种用于治疗受试者的疾病或病症的剂量方案，其包括施用药物组合物，所述药物组合物包含
(i)
工程化细胞，其包含降低的
HLA
‑
A、HLA
‑
B、HLA
‑
C、HLA
‑
DP、HLA
‑
DQ、HLA
‑
DR、B2M、CIITA、TCR
‑
α
和
/
或

【专利技术属性】
技术研发人员：S，
申请(专利权)人：萨那生物技术股份有限公司，
类型：发明
国别省市：