一种新型的制造技术

本发明专利技术公开了一种新型的

【技术实现步骤摘要】
一种新型的mRNA疫苗表达体系


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种新型的
mRNA
疫苗表达体系
。

技术介绍

[0002]信使
RNA(mRNA)
疫苗在
SARS
‑
COV
‑2大流行中取得了巨大的成功，引起了人们对这一领域的越来越多的关注
。mRNA
是一种生物大分子，当传递到细胞中时，可以在细胞质中翻译以产生靶蛋白
。
与另一种能够在细胞中产生编码蛋白的核酸
DNA
相比，
mRNA
具有更高的翻译效率，可以诱导瞬时蛋白表达
。
然而，在
mRNA
的治疗应用之前，必须克服几个障碍
。
首先，
mRNA
带负电，因此很难通过同样带有负电的细胞膜，需要策略来保护
mRNA
并将其递送到靶细胞中
。
为此，已经开发了各种类型的生物材料，包括脂质纳米颗粒
(LNP)、
脂质体
、
阳离子聚合物和无机纳米颗粒，作为
mRNA
递送材料
。
其次，
mRNA
为单链，不稳定，易被体内的核酸酶进行降解，因此需要其进行各种修饰，来使其在体内进行稳定的翻译，以及发挥其功能
。
目前，
mRNA
疫苗的成功也取决于这两个障碍的克服
(1)LNP
成功作为
mRNA
递送材料
(2)mRNA
的化学以及序列修饰避免了不必要的免疫反应，增强了
mRNA
的稳定性和翻译能力
。mRNA
疫苗主要有5部分组成，包括
5'
帽子，
3'Ploy(A)
尾巴，两个
UTR
序列，以及
CDS
编码区
。
在
mRNA
疫苗的研发过程中，人们会对
mRNA
疫苗的这五个部分进行化学修饰以及序列修饰，来增强
mRNA
的稳定性，以及促进编码区的翻译
。

技术实现思路

[0003]本专利技术旨在提供一种新型的
mRNA
疫苗表达体系，来增强
mRNA
的稳定性和增加其翻译目的蛋白的能力
。
[0004]具体的，所述的新型的
mRNA
疫苗表达体系，包括以下元件：
5'
帽子结构
、
含修饰
Kozak
序列和
eIF4G
适配体序列的
5'UTR、
目的基因编码序列
、3
′
UTR
和
PolyA
尾巴；所述的
5'
帽子结构为3‑
OME
‑
GAG
帽子类似物；所述的修饰
Kozak
序列是将
Kozak
序列
GCCACC
替换为
GTGCCAAC
；所述的3′
UTR
为人类血红蛋白亚基
β
序列
。
[0005]优选的，所述3‑
OME
‑
GAG
帽子类似物为
m7(3'OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA)pG。
[0006]优选的，所述修饰
Kozak
序列具体为：
GTGCCAAC。
[0007]优选的，所述
eIF4G
适配体序列如
SEQ ID NO.1
所示，具体为：
AGGACTCACTATTTGTTTTCGCGCCCAGTTGCAAAAAGTGTC。
[0008]优选的，所述人类血红蛋白亚基
β
序列如
SEQ ID NO.2
所示，具体为：
GCTCGCTTTCTTGCTGTCCAATTTCTATTAAAGGTTCCTTTGTTCCCTAAGTCCAACTACTAAACTGGGGGATATTATGAAGGGCCTTGAGCATCTGGATTCTGCCTAATAAAAAACATTTATTTTCATTGCAA。
[0009]优选的，所述的
PolyA
尾巴的长度为
120bp
，序列如
SEQ ID NO.3
所示，具体为：
AAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAAA。
[0010]优选的，所述的
mRNA
疫苗表达体系构建过程中采用共转录的方法进行加帽，并引
入了伪尿核苷酸的修饰
。
[0011]本专利技术的另一目的是提供一种与上述新型
mRNA
疫苗表达体系相关的生物材料，其包括如下中的至少一项：
[0012]1)
编码上述新型
mRNA
疫苗表达体系的
DNA
分子；
[0013]2)
含有
1)
所述
DNA
分子的重组表达载体
。
[0014]本专利技术的另一目的是提供上述新型
mRNA
疫苗表达体系或生物材料在制备
mRNA
疫苗中的应用
。
[0015]本专利技术的另一目的是提供一种
mRNA
疫苗，其含有上述新型的
mRNA
疫苗表达体系
。
[0016]优选的，所述
mRNA
疫苗还含有疫苗递送材料
。
[0017]本专利技术构建了一种稳定且高效表达
mRNA
疫苗表达体系
。
具体的，将修饰的
Kozak
序列和
eIF4G
适配体序列构建到
5'UTR
区域，3′
UTR
区域为较为稳定的人类血红蛋白亚基
β
序列，
5'
端的帽子结构采用3‑
OME
‑
GAG
帽子类似物，并且在
3'
端加上
120bp
的
Ploy(A)
尾巴
。
采用共转录的方法进行加帽，并引入了伪尿核苷酸的修饰
。
在该
mRNA
表达体系中将
5'UTR
中的
Kozak
序列进行了修饰，结果发现
Kozak
序本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种新型的
mRNA
疫苗表达体系，其特征在于，包括以下元件：
5'
帽子结构
、
含修饰
Kozak
序列和
eIF4G
适配体序列的
5'UTR、
目的基因编码序列
、3
′
UTR
和
PolyA
尾巴；所述的
5'
帽子结构为3‑
OME
‑
GAG
帽子类似物；所述的修饰
Kozak
序列是将
Kozak
序列
GCCACC
替换为
GTGCCAAC
；所述的3′
UTR
为人类血红蛋白亚基
β
序列
。2.
根据权利要求1所述的新型的
mRNA
疫苗表达体系，其特征在于，所述3‑
OME
‑
GAG
帽子类似物为
m7(3'OMeG)(5')ppp(5')(2'OMeA)pG。3.
根据权利要求1所述的新型的
mRNA
疫苗表达体系，其特征在于，所述
eIF4G
适配体序列如
SEQ ID NO.1
所示
。4.
根据权利要求1所述的新型的
mRNA
疫苗表达体系，其特征在于，所述人类血...

【专利技术属性】
技术研发人员：蒙国宇，王俊飞，
申请(专利权)人：王俊飞，
类型：发明
国别省市：