伊贝母中5种物质的分离方法技术

本发明专利技术公开了一种伊贝母中5种物质的分离方法

【技术实现步骤摘要】
伊贝母中5种物质的分离方法、特征图谱及构建方法


[0001]本专利技术具体涉及一种伊贝母中5种物质的分离方法
、
特征图谱及构建方法
。

技术介绍

[0002]伊贝母作为新疆名贵道地药材之一，主要分布在伊犁河流域，是百合科贝母属新疆贝母
Fritillaria walujewii Regel
或伊犁贝母
Fritillaria pallidiflora Schrenk
的干燥鳞茎
。
伊贝母性微寒
、
味苦
、
归肺
、
心经
。
在临床当中，常被用来治疗咳痰带血
、
肺热燥咳等病症，是中医药生产以及中药处方当中常用的药材
。
伊贝母含有生物碱类
、
皂苷类
、
多糖类
、
香豆素类
、
淀粉类
、
黄酮类等多种成分
。
其中对药用活性成分异甾体生物碱类的研究较为深入，具有清热润肺
、
化痰止咳
、
平喘
、
解痉
、
抑菌
、
抗氧化等药理作用
。
[0003]中药饮片标准汤剂作为提升中药配方颗粒的重要桥梁，能确保临床用药准确，剂量一致
。
中药标准汤剂质量标准将定量和定性两个方面结合在一起，定量主要由指标成分的含量和转移率，出膏率，
pH
和相对密度等参数组成；定性则是从最能反映总体成分情况的
HPLC
‑
ELSD
特征图谱和薄层色谱鉴别入手
。
现有的文献对伊贝母的研究主要集中在药材以及人工培育等方面，对其标准汤剂研究未见相关报道，因此形成标准汤剂质量评价体系不仅有助于保障用药安全与疗效，还有助于中药饮片，配方颗粒与经典名方等的继承与研究
。
[0004]特征图谱作为整体上对某药物进行质量控制比起单一组分甚至多组分定性定量方法更加明显
。
然而目前文献中尚未见到关于伊贝母特征图谱的研究报道
。
因此，为了更好的监控伊贝母中各成分含量，本领域迫切需要建立简单
、
方便的伊贝母的特征图谱
。
同时对更有效地控制伊贝母的质量，全面客观评价伊贝母具有重大的意义
。

技术实现思路

[0005]本专利技术所要解决的技术问题是克服了现有技术中缺乏对伊贝母片标准汤剂研究的缺陷，提供了一种伊贝母中5种物质的分离方法
、
特征图谱及构建方法
。
[0006]本专利技术通过以下技术方案解决上述技术问题
。
[0007]本专利技术提供了一种伊贝母中5种物质的分离方法，其包括下述步骤：将供试品溶液进行高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器检测，分离待测组分，即可；
[0008]其中，所述待测组分包括：贝母辛
、
西贝母碱苷
、
伊贝碱苷
A、
西贝母碱和梭砂贝母碱；
[0009]所述供试品溶液的制备方法包括下述步骤：
S1
采用氨水溶液对伊贝母标准汤剂或伊贝母饮片进行生物碱的提取，得混合液；
S2
将所述混合液和混合溶剂加热回流制得所述供试品溶液；
[0010]流动相
A
为浓度
0.1
‑
0.5
％的三乙胺水溶液，流动相
B
为乙腈和三乙胺的混合溶液；所述流动相
B
中，乙腈和三乙胺的体积比为
(99.50
‑
99.90)
：
(0.10
‑
0.50)
；
[0011]所述流动相
A
和所述流动相
B
的梯度洗脱条件为：0‑
20min
，
35
％
→
42
％流动相
B
；
20
‑
40min
，
42
％
→
64
％流动相
B
；
40
‑
50min
，
64
→
90
％流动相
B
；
50
‑
55min
，
90
％
→
35
％流动相
B。
[0012]本专利技术中，所述流动相
A
优选为浓度
0.2
‑
0.3
％三乙胺水溶液，例如
0.25
％三乙胺水溶液
。
[0013]本专利技术中，所述流动相
B
中，乙腈和三乙胺的体积比优选为
99.75
：
(0.20
‑
0.30)
，例如
99.75
：
0.25。
[0014]本专利技术中，“0
‑
20min
，
35
％
→
42
％流动相
B”一般是指在0‑
20min
范围内，流动相的体积比例由
35
％逐渐变化为
42
％
。
[0015]本专利技术中，色谱柱优选为
Zafex Supfex AQ
‑
C18
色谱柱
。
[0016]其中，所述
Zafex Supfex AQ
‑
C18
色谱柱的规格可为
4.6mm
×
150mm
，5μ
m。
[0017]本专利技术中，柱温优选为
25
‑
40℃
，例如
30℃
或
35℃。
[0018]本专利技术中，所述供试品溶液的流速优选为
0.6
‑
1.5mL/min
，更优选为
1mL/min。
[0019]本专利技术中，进样体积优选为
15
‑
25
μ
L
，更优选为
20
μ
L。
[0020]本专利技术中，所述蒸发光散射检测器参数优选为：漂移管温度
102℃
，气体流速
3.0L/min
，增益值
2。
[0021]本专利技术一优选实施例中，所述高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器检测条件可为：色谱柱为
Zafex Supfex AQ
‑
C18
色谱柱
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种伊贝母中5种物质的分离方法，其特征在于，其包括下述步骤：将供试品溶液进行高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器检测，分离待测组分；其中，所述待测组分包括：贝母辛
、
西贝母碱苷
、
伊贝碱苷
A、
西贝母碱和梭砂贝母碱；所述供试品溶液的制备方法包括下述步骤：
S1
采用氨水溶液对伊贝母标准汤剂或伊贝母饮片进行生物碱的提取，得混合液；
S2
将所述混合液和混合溶剂加热回流制得所述供试品溶液；流动相
A
为浓度
0.1
‑
0.5
％三乙胺水溶液，流动相
B
为乙腈和三乙胺的混合溶液；所述流动相
B
中，乙腈和三乙胺的体积比为
(99.50
‑
99.90)
：
(0.10
‑
0.50)
；所述流动相
A
和所述流动相
B
的梯度洗脱条件为：0‑
20min
，
35
％
→
42
％流动相
B
；
20
‑
40min
，
42
％
→
64
％流动相
B
；
40
‑
50min
，
64
→
90
％流动相
B
；
50
‑
55min
，
90
％
→
35
％流动相
B。2.
如权利要求1所述的伊贝母中5种物质的分离方法，其特征在于，所述分离方法满足以下条件
(1)
‑
(7)
中的一种或多种：
(1)
所述流动相
A
为浓度
0.2
‑
0.3
％三乙胺水溶液，例如
0.25
％三乙胺水溶液；
(2)
所述流动相
B
中，乙腈和三乙胺的体积比为
99.75
：
(0.20
‑
0.30)
，例如
99.75
：
0.25
；
(3)
色谱柱为
Zafex Supfex AQ
‑
C18
色谱柱；
(4)
柱温为
25
‑
40℃
，例如
30℃
或
35℃
；
(5)
所述供试品溶液的流速为
0.6
‑
1.5mL/min
，优选为
1mL/min
；
(6)
进样体积为
15
‑
25
μ
L
，优选为
20
μ
L
；
(7)
所述蒸发光散射检测器参数为：漂移管温度
102℃
，气体流速
3.0L/min
，增益值
2。3.
如权利要求1所述的伊贝母中5种物质的分离方法，其特征在于，所述高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器检测条件为：色谱柱为
Zafex Supfex AQ
‑
C18
色谱柱，规格
4.6mm
×
150mm
，5μ
m
；流动相
A
为浓度
0.25
％三乙胺水溶液，流动相
B
为乙腈：三乙胺的体积比为
99.75:0.25
的混合溶液；梯度洗脱条件为：0‑
20min
，
35
％
→
42
％
B
；
20
‑
40min
，
42
％
→
64
％
B
；
40
‑
50min
，
64
→
90
％
B
；
50
‑
55min
，
90
％
→
35
％
B
；柱温
30℃
；流速
1mL/min
；
ELSD
检测器：漂移管温度
102℃
，气体流速
3.0L/min
，增益值2；进样量
20
μ
L。4.
如权利要求1所述的伊贝母中5种物质的分离方法，其特征在于，所述的高效液相色谱
‑
蒸发光散射检测器检测方法包括下述步骤：
S11
分别配置混合对照品溶液和所述供试品溶液，采用所述检测方法对所述混合对照品溶液和所述供试品溶液进行分析检测，分别获得所述混合对照品溶液和所述供试品溶液的高效液相色谱图；其中，所述混合对照品溶液的浓度优选为
30
‑
500
μ
g/mL
，例如
200
μ
g/mL
；
S12
根据所述混合对照品溶液的高效液相色谱图，确定所述供试品溶液的高效液相色谱图中的各峰对应的化合物，获得测得所述混合对照品溶液和所述供试品溶液中对应化合物的峰面积
。5.
如权利要求1所述的伊贝母中5种物质的分离方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法中，满足以下条件
(1)
‑
(8)
中的一种或多种：
(1)S1

【专利技术属性】
技术研发人员：尹强，尹海龙，穆丹丹，康汶铉，董雨微，田芳，周琴，杜梦鸽，李超杰，宋菲，
申请(专利权)人：新疆维吾尔药业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：