一种酒糟小分子抗氧化肽及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种酒糟小分子抗氧化肽及其制备方法与应用

【技术实现步骤摘要】
一种酒糟小分子抗氧化肽及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及抗氧化剂领域，特别涉及一种酒糟小分子抗氧化肽及其制备方法与应用
。

技术介绍

[0002]酒糟是酿酒过程中经过发酵蒸馏得到的主要副产物，其中含有较高的粗纤维
、
粗蛋白等
。
丢糟若处理不当易导致腐败发酵和霉变，产生多种游离酸
、
杂醇油和醛等有毒物质
。
有关研究表明，作饲料和肥料是目前酒
、
醋糟综合利用主要的途径，但其附加值极低且营养成分未被分析利用，所以有必要寻找新的且有高附加值的利用方式
。
生物体的过度氧化应激会导致癌症
、
糖尿病
、
高血压和动脉粥样硬化等很多病变的发生，越来越多的抗氧化剂被用于抵御氧化应激及清除过度氧自由基，合成抗氧化剂虽然具有较强的抗氧化效果，然而其安全性和毒理性非常令人担忧，因此天然抗氧化剂作为替代品被快速应用于食品
、
营养及保健品领域
。

技术实现思路

[0003]本专利技术的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供一种酒糟小分子抗氧化肽
。
[0004]本专利技术的另一目的在于提供所述酒糟小分子抗氧化肽的制备方法
。
[0005]本专利技术的再一目的在于提供所述酒糟小分子抗氧化肽的应用
。
[0006]本专利技术的目的通过下述技术方案实现：
[0007]一种酒糟小分子抗氧化肽，选自如下任意一种或两种：
(1)VVGG
；
(2)VVR。
[0008]所述的酒糟小分子抗氧化肽的制备方法，包括如下步骤：
[0009](a)
酶解：将料酒糟原料加水稀释后加热至
45
～
55℃
，并调节
pH
值至
6.0
～
7.0
，然后加入复合蛋白酶进行酶解，待酶解结束后水浴加热至
80
±
5℃
灭酶，得到酶解液；再将酶解液经膜过滤分离后，经冻干得到酶解上清冻干粉；其中，复合蛋白酶为木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶；
[0010](b)
醇沉：将步骤
(a)
中得到的酶解上清冻干粉加入到无水乙醇中，使体系中乙醇的终浓度为体积百分比
60
％～
80
％，放入
‑
20℃
静置，离心，取上清冻干，得到醇沉上清冻干粉；
[0011](c)
色谱分离纯化：将步骤
(b)
中得到的醇沉上清冻干粉加水复溶后，采用制备液相色谱进行分离，其中流动相为体积百分比
0.1
％的三氟乙酸水溶液和体积百分比
0.1
％的三氟乙酸乙腈溶液，然后根据色谱图中的出峰顺序将样品依次分为5段
(L1
～
L5)
，取第3段
(L3)
，得到酒糟抗氧化肽；
[0012](d)HPLC
分析：将步骤
(c)
中得到的酒糟抗氧化肽使用
HPLC(
高效液相色谱
)
对其成分进行分析，根据分析图中的两个峰分别接样，分别得到酒糟小分子抗氧化肽
VVGG
和
VVR。
[0013]步骤
(a)
中所述的加热的温度
(
即酶解温度
)
优选为
50℃。
[0014]步骤
(a)
中，料酒糟原料加水稀释为稀释至终浓度为质量百分比5～
15
％；优选为稀释至终浓度为质量百分比
10
％
。
[0015]步骤
(a)
中所述的调节
pH
值为采用
NaOH
溶液和
/
或
HCl
溶液进行调节；优选为采用浓度为质量百分比
10
％的
NaOH
溶液或浓度为质量百分比
10
％的
HCl
溶液进行调节
。
[0016]步骤
(a)
中所述的调节
pH
值优选为调节
pH
值至
6.3。
[0017]步骤
(a)
中所述的木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的质量比为1：2～4；优选为
1:3。
[0018]步骤
(a)
中所述的复合蛋白酶的加入量为按其在反应体系的终浓度为质量百分比
0.4
～
0.6
％添加计算；优选为按其在反应体系的终浓度为质量百分比
0.5
％添加计算
。
[0019]步骤
(a)
中所述的酶解的时间为1～
3h
；优选为
2h。
[0020]步骤
(a)
中所述的灭酶的时间为
30
～
60min
；优选为
30min。
[0021]步骤
(a)
中所述的膜过滤的孔径优选为
0.25
μ
m。
[0022]步骤
(b)
中所述的酶解上清冻干粉和无水乙醇的料液比为1：3～
5(g/ml)。
[0023]步骤
(b)
中所述的静置的时间为5～
8h。
[0024]步骤
(b)
中所述的离心的条件为：
4000rpm/min
离心
10
～
30
分钟；优选为：
4000rpm/min
离心
10
分钟
。
[0025]步骤
(c)
中，醇沉上清冻干粉加水复溶后的浓度
40
～
60mg/ml
；优选为
50mg/ml。
[0026]步骤
(d)
中所述的
HPLC
分析的条件如下：流动相
A
：
0.1
％
(v/v)
的三氟乙酸水溶液，流动相
B
：
0.1
％
(v/v)
的三氟乙酸乙腈溶液；0～
30min
，
B
相浓度为5％～
30
％；
30
～
50min
，
B
相浓度为
45
％～
70
％；
50
～
60min
，
B
相浓度为
90
％
。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.
一种酒糟小分子抗氧化肽，其特征在于，选自如下任意一种或两种：
(1)VVGG
；
(2)VVR。2.
根据权利要求1所述的酒糟小分子抗氧化肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(a)
酶解：将料酒糟原料加水稀释后加热至
45
～
55℃
，并调节
pH
值至
6.0
～
7.0
，然后加入复合蛋白酶进行酶解，待酶解结束后水浴加热至
80
±
5℃
灭酶，得到酶解液；再将酶解液经膜过滤分离后，经冻干得到酶解上清冻干粉；其中，复合蛋白酶为木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶；
(b)
醇沉：将步骤
(a)
中得到的酶解上清冻干粉加入到无水乙醇中，使体系中乙醇的终浓度为体积百分比
60
％～
80
％，放入
‑
20℃
静置，离心，取上清冻干，得到醇沉上清冻干粉；
(c)
色谱分离纯化：将步骤
(b)
中得到的醇沉上清冻干粉加水复溶后，采用制备液相色谱进行分离，其中流动相为体积百分比
0.1
％的三氟乙酸水溶液和体积百分比
0.1
％的三氟乙酸乙腈溶液，然后根据色谱图中的出峰顺序将样品依次分为5段，取第3段，得到酒糟抗氧化肽；
(d)HPLC
分析：将步骤
(c)
中得到的酒糟抗氧化肽使用
HPLC
对其成分进行分析，根据分析图中的两个峰分别接样，分别得到酒糟小分子抗氧化肽
VVGG
和
VVR。3.
根据权利要求2所述的酒糟小分子抗氧化肽的制备方法，其特征在于：步骤
(d)
中所述的
HPLC
分析的条件如下：流动相
A
：体积百分比
0.1
％的三氟乙酸水溶液，流动相
B
：体积百分比
0.1
％的三氟乙酸乙腈溶液；0～
30min
，
B
相浓度为5％～
30
％，
30
～
50min
，
B
相浓度为
45
％～
70
％；
50
～
60min
，
B
相浓度为
90
％
。4.
根据权利要求2所述的酒糟小分子抗氧化肽的制备方法，其特征在于：步骤
(a)
中所述的木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的质量比为1：2～4；步骤
(a)
中所述的复合蛋白酶的加入量为按其在反应体系的终浓度为质量百分比
0.4
～
0.6
％添加计算
。5.
根据权利要求4所述的酒糟小分子抗氧化肽的制备方法，其特征在于：步骤
(a)
中所述的木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的质量比为1：3；步骤
(a)
中所述的复合蛋白酶的加入量为按其在反应体系的终浓度为质量百分比
0.5
％添加计算
。6.
根据权利要求2所述的酒糟小分子抗氧化肽的制备方法，其特征在于：步...

【专利技术属性】
技术研发人员：符姜燕，崔鹏举，曹庸，何泽琪，代晋，周华林，陈大坤，翁哲希，袁铭，李涛，戴伟杰，王妮，王华成，劳浩晶，李伟健，
申请(专利权)人：阳西美味鲜食品有限公司，
类型：发明
国别省市：