CD20制造技术

本公开提供了与

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CD20结合分子及其用途
[0001]交叉引用
[0002]本申请要求
2020
年7月
16
日提交的国际专利申请号
PCT/CN2020/102463
的优先权权益，该国际专利申请的内容以全文引用的方式并入本文
。
[0003]序列表
[0004]本申请以引用的方式并入随同本申请一起提交的序列表，该序列表为文本文件，标题为
14651
‑
026
‑
228_SEQ_LISTING.txt
，创建于
2021
年7月9日，且大小为
236,191
字节
。
1.

[0005]本公开涉及抗
CD20
单结构域抗体
、
嵌合抗原受体
、
工程化免疫效应细胞及其使用方法
。
本公开进一步涉及用于治疗用途的细胞的激活和扩增，特别涉及基于嵌合抗原受体的
T
细胞免疫疗法
。
2.
技术介绍

[0006]CD20
是在
B
细胞分化的某些阶段表达的表面抗原
。
用治疗性单克隆抗体
(mAb)
靶向
CD20
阳性
B
细胞一直是治疗血液系统恶性肿瘤如非霍奇金淋巴瘤
(NHL)
和慢性淋巴细胞白血病
(CLL)
的有效策略
。
采用利妥昔单抗
(RTX)
的初步成功促进了更有效的基于
CD20
的治疗剂的创造和开发
。
然而，使用常规
mAb
的治疗不足以克服诸如难治性
/
复发性疾病的问题
(Shanehbandi
等人，
Current Cancer Drug Targets,17(5):423
‑
444(2007))。
[0007]嵌合抗原受体
T(CAR
‑
T)
细胞疗法是一种新兴且有效的癌症免疫疗法
。
特别是在血液恶性肿瘤中，
CAR
‑
T
细胞已经取得了令人振奋的结果
。
已经进行了
CD20 CAR
‑
T
细胞的早期临床研究，其表明
CD20CAR
‑
T
细胞在
B
细胞
NHL
中具有令人鼓舞的治疗潜力
(Brudno
和
Kochenderfer
，
Nature Reviews Clinical Oncology,15:31
‑
46(2018))。
然而，
CAR
‑
T
细胞的应用明显受到诸如细胞因子释放综合征和结合非肿瘤组织里的靶标而产生的毒性
(on
‑
target off
‑
tumor toxicity)
的副作用的阻碍
(Yu
等人，
Molecular Cancer 18(1):125(2019))。
[0008]因此，需要改进的
CD20
结合分子和工程化的
CD20
靶向细胞
。
例如，需要开发稳定且小尺寸的
CD20
结合分子以用于更有效或高效的
CAR
‑
T
疗法
。
3.
技术实现思路

[0009]一方面，本文提供了抗
CD20
单结构域抗体
(sdAb)
，其包含
(i)
包含
SEQ ID NO:1
或
195
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:2
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:3
的氨基酸序列的
CDR3
；
(ii)
包含
SEQ ID NO:4
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:5
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:6
的氨基酸序列的
CDR3
；
(iii)
包含
SEQ ID NO:1
或
195
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:7
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:8
的氨基酸序列的
CDR3
；
(iv)
包含
SEQ ID NO:4
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:9
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:10
的氨基酸序列的
CDR3
；
(v)
包含
SEQ ID NO:11
或
196
的氨基酸序
NO:54、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:183、SEQ ID NO:184
或
SEQ ID NO:185
的氨基酸序列
。
[0014]在其它实施方案中，本文提供的抗
CD20 sdAb
包含与
SEQ ID NO:41、SEQ ID NO:42、SEQ ID NO:43、SEQ ID NO:44、SEQ ID NO:45、SEQ ID NO:46、SEQ ID NO:47、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、SEQ ID NO:52、SEQ ID NO:53、SEQ ID NO:54、SEQ ID NO:55、SEQ ID NO:56、SEQ ID NO:57、SEQ ID NO:58、SEQ ID NO:59、SEQ ID NO:60、SEQ ID NO:61、SEQ ID NO:62、SEQ ID NO:63、SEQ ID NO:183、SEQ ID NO:184
或
SEQ ID NO:185
的序列具有至少
75
％
、80
％
、85本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.
一种抗
CD20
单结构域抗体
(sdAb)
，其包含：
(i)
包含
SEQ ID NO:1
或
195
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:2
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:3
的氨基酸序列的
CDR3
；
(ii)
包含
SEQ ID NO:4
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:5
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:6
的氨基酸序列的
CDR3
；
(iii)
包含
SEQ ID NO:1
或
195
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:7
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:8
的氨基酸序列的
CDR3
；
(iv)
包含
SEQ ID NO:4
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:9
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:10
的氨基酸序列的
CDR3
；
(v)
包含
SEQ ID NO:11
或
196
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:12
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:8
的氨基酸序列的
CDR3
；
(vi)
包含
SEQ ID NO:13
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ IDNO:9
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:10
的氨基酸序列的
CDR3
；
(vii)
包含
SEQ ID NO:14
或
197
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:15
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:16
的氨基酸序列的
CDR3
；
(viii)
包含
SEQ ID NO:17
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ IDNO:18
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:19
的氨基酸序列的
CDR3
；
(ix)
包含
SEQ ID NO:20
或
197
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:21
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:16
的氨基酸序列的
CDR3
；
(x)
包含
SEQ ID NO:22
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:23
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:19
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xi)
包含
SEQ ID NO:24
或
198
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:25
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:26
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xii)
包含
SEQ ID NO:27
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ IDNO:28
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:29
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xiii)
包含
SEQ ID NO:14
或
197
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:30
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:16
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xiv)
包含
SEQ ID NO:17
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ IDNO:31
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:19
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xv)
包含
SEQ ID NO:1
或
195
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:32
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:3
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xvi)
包含
SEQ ID NO:4
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ IDNO:33
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:6
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xvii)
包含
SEQ ID NO:20
或
197
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:34
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:16
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xviii)
包含
SEQ ID NO:22
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ IDNO:35
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:19
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xix)
包含
SEQ ID NO:20
或
197
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:36
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:16
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xx)
包含
SEQ ID NO:20
或
197
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:37
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:16
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xxi)
包含
SEQ ID NO:20
或
197
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:38
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:16
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xxii)
包含
SEQ ID NO:4
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ IDNO:33
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:39
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xxiii)
包含
SEQ ID NO:4
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ IDNO:33
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:40
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xxiv)
包含
SEQ ID NO:165
或
199
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:166
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:167
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xxv)
包含
SEQ ID NO:168
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ IDNO:169
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:170
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xxvi)
包含
SEQ ID NO:171
或
200
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:172
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:173
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xxvii)
包含
SEQ ID NO:174
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:175
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:176
的氨基酸序列的
CDR3
；
(xxviii)
包含
SEQ ID NO:177
或
197
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ ID NO:178
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:179
的氨基酸序列的
CDR3
；或
(xxix)
包含
SEQ ID NO:180
的氨基酸序列的
CDR1
；包含
SEQ IDNO:181
的氨基酸序列的
CDR2
；和包含
SEQ ID NO:182
的氨基酸序列的
CDR3。2.
一种抗
CD20
单结构域抗体
(sdAb)
，其包含：
(i)
分别具有如
SEQ ID NO:41
中所示的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
；
(ii)
分别具有如
SEQ ID NO:42
中所示的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
；
(iii)
分别具有如
SEQ ID NO:43
中所示的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
；
(iv)
分别具有如
SEQ ID NO:44
中所示的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
；
(v)
分别具有如
SEQ ID NO:45
中所示的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
；
(vi)
分别具有如
SEQ ID NO:46
中所示的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
；
(vii)
分别具有如
SEQ ID NO:47
中所示的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
；
(viii)
分别具有如
SEQ ID NO:48
中所示的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
；
(ix)
分别具有如
SEQ ID NO:49
中所示的
CDR1、CDR2
和
CDR3
的氨基酸序列的
CDR1、CDR2
和
CDR3
；
NO:47、SEQ ID NO:48、SEQ ID NO:49、SEQ ID NO:50、SEQ ID NO:51、...

【专利技术属性】
技术研发人员：范晓虎，周喆，庄秋传，方旭，潘红波，魏敏，朱建蕊，
申请(专利权)人：南京传奇生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：