抗SARS-CoV-2奥密克戎突变株XBB及其亚型感染的蛋白及疫苗制造技术

本发明专利技术涉及抗SARS

【技术实现步骤摘要】
抗SARS
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CoV
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2奥密克戎突变株XBB及其亚型感染的蛋白及疫苗


[0001]本专利技术涉及抗SARS
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CoV
‑
2奥密克戎突变株XBB及其亚型感染的蛋白及疫苗，属于医药领域。

技术介绍

[0002]新型冠状病毒(SARS
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Cov
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2)是由世界卫生组织命名的一种新型的β属的冠状病毒。该病毒有包膜，颗粒呈圆形或椭圆形，常为多形性，直径60
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140nm。其基因特征与SARS
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CoV和MERS
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CoV有明显区别，是一种以前尚未在人类中发现的新冠状病毒分支。目前，变异新冠病毒主要有五大种类：Alpha、Beta、Gamma、Delta、Omicron，Omicron变异株又分为BA.1、BA.2、BA.2.12.1、BA.4、BA.5、BQ.1.1、XBB.1.5等几种亚系。
[0003]SARS
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CoV
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2的主要结构蛋白包括刺突蛋白(Spike，S)、信使蛋白(Envelop，E)、膜蛋白(Membrane，M)和核衣壳蛋白(Nucleocapsid，N)，其中，S蛋白在病毒的感染和毒力中起着关键作用，常被用来作为疫苗的抗原。由于SARS
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CoV
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2变异株XBB含有多个突变位点，病毒的S蛋白也含有多个突变位点，导致变异株XBB及其亚型在一定程度上能够逃逸新冠病毒突变株(Alpha、Beta、Gamma、Delta、Omicron)疫苗激发的抗体，导致新冠疫苗失效或保护力降低。因此，开发针对SARS
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CoV
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2病毒突变株XBB及其亚型的疫苗，特别对各变异的SARS
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CoV
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2病毒的广谱疫苗，对于新型冠状病毒感染的防治非常重要。

技术实现思路

[0004]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术的目的在于提供抗SARS
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CoV
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2奥密克戎突变株XBB及其亚型感染的蛋白。本专利技术还提供用于预防和/或治疗SARS
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CoV
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2奥密克戎突变株XBB及其亚型感染的疫苗，包括含有所述蛋白的重组蛋白疫苗和腺病毒载体疫苗，还提供了含有两种疫苗的组合物或联合用药物。
[0005]本专利技术首先提供抗SARS
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CoV
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2奥密克戎突变株XBB及其亚型感染的蛋白，其含有选自SEQ ID No.1～SEQ ID No.7中任意一项所示的氨基酸序列。优选地，所述蛋白选自如SEQ IDNo.3或SEQ ID No.5所示。
[0006]本专利技术还提供了所述蛋白的前体，其是在所述蛋白上连接了信号肽和/或蛋白标签。
[0007]优选地，所述的蛋白标签选自如下至少一种：组氨酸标签(6His标签)、硫氧还蛋白标签(Trx标签)、谷胱甘肽转移酶标签、泛素样修饰蛋白标签、麦芽糖结合蛋白标签、c
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Myc蛋白标签、Avi tag蛋白标签、氮源利用物质A蛋白标签。
[0008]进一步地，在所述抗SARS
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CoV
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2奥密克戎突变株XBB及其亚型感染的蛋白上还连接了切除蛋白标签的蛋白酶识别区。
[0009]优选地，所述的蛋白酶选自如下至少一种：肠激酶(EK酶)、TEV蛋白酶、凝血酶、凝血因子Xa、羧肽酶A、鼻病毒3c蛋白酶。
[0010]进一步地，所述前体的氨基酸序列选自SEQ ID No.8、SEQ ID No.10、SEQ ID No.12、SEQ ID No.14、SEQ ID No.16、SEQ ID No.18、SEQ ID No.20中至少一种。优选地，所述蛋白序列选自如SEQ ID No.12或SEQ ID No.16所示。
[0011]本专利技术还提供了多核苷酸，其编码所述的蛋白或所述的前体。
[0012]进一步地，所述核苷酸序列选自SEQ ID No.9、SEQ ID No.11、SEQ ID No.13、SEQ IDNo.15、SEQ ID No.17、SEQ ID No.19、SEQ ID No.21中至少一种。优选地，所述多核苷酸序列选自如SEQ ID No.13或SEQ ID No.17所示。
[0013]本专利技术还提供了重组载体，其含有所述的多核苷酸。
[0014]进一步地，所述重组载体采用昆虫杆状病毒表达载体、哺乳动物细胞表达载体、大肠杆菌表达载体、酵母表达载体中至少一种。
[0015]优选地，所述的昆虫杆状病毒表达载体为pFastBac1。
[0016]优选地，所述的大肠杆菌表达载体为pET32a。
[0017]优选地，所述的酵母表达载体为pPICZaA。
[0018]优选地，所述的哺乳动物细胞表达载体为CHO细胞表达载体。
[0019]进一步优选地，所述的CHO细胞表达载体为pTT5或FTP
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002。
[0020]本专利技术还提供了宿主细胞，其含有所述的重组载体。
[0021]进一步地，所述的宿主细胞采用昆虫细胞、哺乳动物细胞、大肠杆菌、酵母中至少一种。
[0022]优选地，所述的昆虫细胞选自sf9细胞、sf21细胞、Hi5细胞中至少一种。
[0023]优选地，所述的哺乳动物细胞为CHO细胞。
[0024]本专利技术还提供了所述的蛋白或所述的前体的制备方法，其特征是：包括如下步骤：培养所述的宿主细胞，使其表达所述的蛋白或前体，然后回收所述的蛋白，即得。
[0025]本专利技术还提供了抗SARS
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CoV
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2奥密克戎突变株及其亚型感染的蛋白组合物，其包括BA.5序列
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1、BA.5序列
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2、XBB.1.5序列
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1、XBB.1.5序列
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2、XBB.1.5序列
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3、XBB.1.5序列
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4、S
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XBB.1.5蛋白中任意两种及以上的组合。
[0026]优选地，所述蛋白组合物包括BA.5序列
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1、BA.5序列
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2中的一种、XBB.1.5序列
‑
1、XBB.1.5序列
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2、XBB.1.5序列
‑
3、XBB.1.5序列
‑
4中的任意一种、S
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XBB.1.5蛋白至少两种组合。
[0027]更优选地，所述蛋白组合物包括BA.5序列
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1、BA.5序列
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2中的一种、XBB.1.5序列
‑
3、XBB.1.5序列...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗SARS
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CoV
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2奥密克戎突变株XBB及其亚型感染的蛋白，其特征是：其含有选自SEQ ID No.1～SEQ ID No.7中任意一项所示的氨基酸序列。2.权利要求1所述蛋白的前体，其特征是：其是在所述蛋白上连接了信号肽和/或蛋白标签。3.根据权利要求2所述的蛋白前体，其特征是：所述的蛋白标签选自如下至少一种：组氨酸标签、硫氧还蛋白标签、谷胱甘肽转移酶标签、泛素样修饰蛋白标签、麦芽糖结合蛋白标签、c
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Myc蛋白标签、Avi tag蛋白标签、氮源利用物质A蛋白标签。4.根据权利要求3所述的蛋白前体，其特征是：在所述抗SARS
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CoV
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2奥密克戎突变株XBB及其亚型感染的蛋白上还连接了切除蛋白标签的蛋白酶识别区；优选地，所述的蛋白酶选自如下至少一种：肠激酶、TEV蛋白酶、凝血酶、凝血因子Xa、羧肽酶A、鼻病毒3c蛋白酶。5.根据权利要求2
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4任一项所述的蛋白前体，其特征是：所述前体的氨基酸序列选自SEQ ID No.8、SEQ ID No.10、SEQ ID No.12、SEQ ID No.14、SEQ ID No.16、SEQ ID No.18、SEQ ID No.20中至少一种。6.多核苷酸，其特征是：其编码权利要求1所述的蛋白或权利要求2
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5任一项所述的前体。7.根据权利要求6所述的多核苷酸，其特征是：所述核苷酸序列选自SEQ ID No.9、SEQ ID No.11、SEQ ID No.13、SEQ ID No.15、SEQ ID No.17、SEQ ID No.19、SEQ ID No.21中至少一种。8.重组载体，其特征是：其含有权利要求6或7所述的多核苷酸。9.根据权利要求8所述的重组载体，其特征是：所述重组载体采用昆虫杆状病毒表达载体、哺乳动物细胞表达载体、大肠杆菌表达载体、酵母表达载体中至少一种；所述的昆虫杆状病毒表达载体为pFastBac1；所述的大肠杆菌表达载体为pET32a；所述的酵母表达载体为pPICZaA；所述的哺乳动物细胞表达载体为CHO细胞表达载体；进一步优选地，所述的CHO细胞表达载体为pTT5或FTP
‑
002。10.宿主细胞，其特征是：其含有权利要求8或9所述的重组载体。11.根据权利要求10所述的宿主细胞，其特征是：所述的宿主细胞采用昆虫细胞、哺乳动物细胞、大肠杆菌、酵母中至少一种；优选地，所述的昆虫细胞选自sf9细胞、sf21细胞、Hi5细胞中至少一种；所述的哺乳动物细胞为CHO细胞。12.权利要求1所述的蛋白或权利要求2
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5任一项所述的前体的制备方法，其特征是：包括如下步骤：培养权利要求10或11所述的宿主细胞，使其表达所述的蛋白或前体，然后回收所述的蛋白，即得。13.抗SARS
‑
CoV
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2奥密克戎突变株及其亚型感染的蛋白组合物，其特征是：其包括BA.5序列
‑
1、BA.5序列
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2、XBB.1.5序列
‑
1、XBB.1.5序列
‑
2、XBB.1.5序列
‑
3、XBB.1.5序列
‑
4、S
‑
XBB.1.5蛋白中任意两种及以上的组合。14.根据权利要求13所述的蛋白组合物，其特征是：所述蛋白组合物包括BA.5序列
‑
1、BA.5序列
‑
2中的一种、XBB.1.5序列
‑
1、XBB.1.5序列
‑
2、XBB.1.5序列
‑
3、XBB.1.5序列
‑
4中的任意一种、S
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XBB.1.5蛋白至少两种组合；优选地，所述蛋白组合物包括BA.5序列
‑
1、BA.5序列
‑
2中的一种、XBB.1.5序列
‑
3、XBB.1.5序列
‑
4中的任意一种与S
‑
XBB.1.5蛋白进行的组合。
15.预防和/或治疗SARS
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CoV
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2奥密克戎突变株及其亚型感染的重组蛋白疫苗，其特征是：其含有权利要求1所述的蛋白、权利要求2
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5任一项所述的前体和/或权利要求13
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14任一项所述的蛋白组合物，以及药学上可接受的辅料或者辅助性成分。16.根据权利要求15所述的重组蛋白疫苗，其特征是：所述的辅助性成分为免疫佐剂；优选地，所述的免疫佐剂选自如下至少一种：鲨烯水包油乳剂、铝盐、钙盐、植物皂苷、植物多糖、单磷酸脂质A、胞壁酰二肽、胞壁酰三肽、细菌毒素、GM
‑
CSF细胞因子、脂质、阳离子脂质体材料。17.根据权利要求15或16所述的重组蛋白疫苗，其特征是：满足以下至少一项：所述的鲨烯水包油乳剂为MF59；所述的铝盐选自氢氧化铝、明矾中至少一种；所述的钙盐为磷酸三钙；所述的植物皂苷为QS
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21或ISCOM；所述的植物多糖为黄芪多糖；所述的细菌毒素选自重组霍乱毒素、白喉毒素中至少一种；所述的脂质选自如下至少一种：磷脂酰乙醇胺、磷脂酰胆碱、胆固醇、二油酰基磷脂酰乙醇胺；所述的阳离子脂质体材料选自如下至少一种：(2,3
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二油氧基丙基)三甲基氯化铵、N
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[1
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(2,3
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二油酰氯)丙基]
‑
N,N,N
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氯化三甲胺、阳离子胆固醇、三氟乙酸二甲基
‑
2,3
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二油烯氧基丙基
‑2‑
(2
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精...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏霞蔚，逯光文，程平，杨莉，李炯，王玮，杨静云，魏于全，王震玲，沈国波，杨金亮，赵志伟，
申请(专利权)人：成都威斯克生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：