一种高效液相色谱方法技术

本发明专利技术公开了一种高效液相色谱方法。具体地，本发明专利技术公开一种用于检测或分离物质X的HPLC方法；所述的物质X包含如式I

【技术实现步骤摘要】
一种高效液相色谱方法


[0001]本专利技术涉及一种高效液相色谱方法。

技术介绍

[0002]多西他赛(Docetaxel)，商品名为泰索帝(Taxotere)，是法国Rhone
‑
Poulenc Rorer公司开发的半合成抗肿瘤药物，抗瘤谱比紫杉醇更强，是目前抗肿瘤药物中应用得最多、抗肿瘤活性及治疗效果最可靠的药物之一。
[0003]多西他赛侧链(Docetaxel Side Chain)是多西他赛的关键原料，目前常用的多西他赛侧链结构中含有两个手性中心,合成过程中会产生一对非对映异构体，即中间体((3R，4S)
‑3‑
羟基
‑4‑
苯基
‑1‑
((S)
‑1‑
苯乙基)氮杂环丁烷
‑2‑
酮)和光学异构体((3S，4R)
‑3‑
羟基
‑4‑
苯基
‑1‑
((S)
‑1‑
苯乙基)氮杂环丁烷
‑2‑
酮)。对多西他赛侧链中间体中光学异构体的控制一直是多西他赛侧链质量研究的关键。
[0004][0005]在手性药物的研究中，对手性异构体的分离与测定一直是HPLC分析的热点(刘建明,徐媛媛,陈剑萍.HPLC法在手性药物分离中的应用[J].实用临床医学,2009,2(10):145
‑
146.)。谭丽媛等人采用高效液相色谱法分析阿西马朵林在中间体及其光学异构体的含量，采用IA色谱柱，流动相采用正己烷：低级醇体系(CN104133010A)；张明等人采用Phenomenex Hyperclone色谱柱，流动相采用正己烷：四氢呋喃体系对氟丙菊酯异构体进行分析。(张明,季红进,戚晶晶.氟丙菊酯异构体的高效液相色谱分析[J].农药,2017,56(8):3.)。中国药典(2020版)对多西他赛及其侧链的质量标准未有收载，美国药典(USP43
‑
NF38)、欧洲药典(EP 10.4)及日本药典(JP17)收载有多西他赛及其制剂中有关物质的HPLC检测方法及质量标准，对多西他赛侧链的相关检测方法未有收载。现有文献大多局限于用HPLC法测定多西他赛注射液中药物含量和人血浆中多西他赛的浓度，也有学者用HPLC法检测其制剂中的有关物质，如杨俊等人采用HPLC
‑
ELSD法检测了多西他赛注射用浓溶液中溶血磷脂酰乙醇胺和溶血磷脂酰胆碱的含量(杨俊,谢俊.HPLC
‑
ELSD测定多西他赛注射用浓溶液中溶血磷脂酰乙醇胺,溶血磷脂酰胆碱的含量[J].中国现代应用药学,2013,30(11):1210
‑
1214.),而对于多西他赛侧链合成过程中有关物质的检测方法却未有报道。
[0006]因此，为适应工业生产的需要，寻找一种多西他赛侧链中间体及其光学异构体测定方法，有效、及时地反馈中间体的光学纯度，除去异构体；获得收率高，光学纯度合格的多西他赛侧链具有重要意义。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的在于克服现有技术中缺少多西他赛侧链的分离检测技术，而提供一种测定多西他赛侧链中间体及其光学异构体高效液相色谱方法，该方法能够分离异构体，并能够准确测定异构体的纯度。
[0008]本专利技术提供了一种用于检测或分离物质X的HPLC方法；所述的物质X包含如式I
‑
A和/或I
‑
B所示化合物；
[0009][0010]所述的HPLC方法的固定相为多糖衍生物，所述的HPLC方法的流动相为三氟乙酸水溶液:醇类溶剂。
[0011]在本专利技术某些实施方案中，所述HPLC分析方法中的色谱柱可为Lux Cellulose
‑
2或IG
‑
3，例如Lux Cellulose
‑
2(250
×
4.6mm，5μm)或IG
‑
3(150
×
2.1mm，3μm)。
[0012]在本专利技术某些实施方案中，所述的流动相由下述组分组成；按体积份数计，所述醇类溶剂可为70～90份，例如85份，所述的三氟乙酸水溶液可为20～10份，例如15份。
[0013]在本专利技术某些实施方案中，所述的醇类溶剂可为本领域常规的醇类溶剂，例如C1‑
C5醇类溶剂，例如甲醇。
[0014]在本专利技术某些实施方案中，所述HPLC分析方法中的固定相为直链淀粉
‑
三(3
‑
氯
‑5‑
甲基苯基氨基甲酸酯)或纤维素
‑
三(3
‑
氯
‑4‑
甲基苯基氨基甲酸酯)。
[0015]在本专利技术某些实施方案中，所述HPLC分析方法的检测波长可为本领域常规的检测波长，例如200
‑
300nm，又例如210nm。
[0016]在本专利技术某些实施方案中，所述的HPLC方法的柱温可为本领域该类方法的常规温度，例如20
‑
35℃，又例如25℃。
[0017]在本专利技术某些实施方案中，所述的HPLC方法的洗脱的流速可为本领域该类方法的常规流速，例如0.1
‑
1ml/min，又例如0.4ml/min。
[0018]在本专利技术某些实施方案中，所述的HPLC方法的中溶液的进样体积可为本领域常规的进样体积，例如1
‑
30μL，又例如5μL。
[0019]在本专利技术某些实施方案中，所述的HPLC方法的分离对象可以以溶液的形式添加到的色谱柱上。所述的HPLC方法的分离对象的溶液的制备方法可为方法一或方法二：
[0020]方法一：将分离对象溶于溶剂，即可；
[0021]方法二：提取分离对象的制剂，即可；
[0022]所述分离对象包含有或不包含有物质X。
[0023]所述的提取可通过本领域常规的手段进行提取。
[0024]在本专利技术某些实施方案中，所述的三氟乙酸水溶液中的三氟乙酸占所述溶液的质量比可为本领域该类反应常规质量比，例如0.01～0.05％，又例如0.02％。
[0025]在符合本领域常识的基础上，上述各优选条件，可任意组合，即得本专利技术各较佳实例。
[0026]本专利技术所用试剂和原料均市售可得。
[0027]本专利技术的积极进步效果在于：本专利技术所提供的物质X的HPLC方法具有使用可靠，稳定性较好，数据重现性强的优点，可以很好地将异构体分离，并能够准确测定异构体的纯度。
具体实施方式
[0028]下面通过实施例的方式进一步说明本专利技术，但并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。
[0029]实施例1方法验证
[0030]仪器与试药
[0031]1260型高效液相色谱仪(美国Agilent公司，配有DAD检测器)；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于检测或分离物质X的HPLC方法；所述的物质X包含如式I
‑
A和/或I
‑
B所示化合物；所述的HPLC方法的固定相为多糖衍生物，所述的HPLC方法的流动相为三氟乙酸水溶液:醇类溶剂。2.如权利要求1所述的HPLC方法，其特征在于，所述HPLC分析方法中的色谱柱为Lux Cellulose
‑
2或IG
‑
3。3.如权利要求1所述的HPLC方法，其特征在于，其满足下述条件的一种或多种：(1)所述的醇类溶剂为70～90份；(2)所述的三氟乙酸水溶液为20～10份。4.如权利要求3所述的HPLC方法，其特征在于，其满足下述条件的一种或多种：(1)所述的醇类溶剂为85份；(2)所述的三氟乙酸水溶液为15份。5.如权利要求1所述的HPLC方法，其特征在于，所述HPLC分析方法中的固定相为直链淀粉
‑
三(3
‑
氯
‑5‑
甲基苯基氨基甲酸酯)或纤维素
‑
三(3
‑
氯
‑4‑
甲基苯基氨基甲酸酯)。6.如权利要求1所述的HPLC方法，其特征在于，其满足下述条件的一种或多种：(1)所述的醇类溶剂为C1‑
C5醇类溶剂；(2)所述的三氟乙酸...

【专利技术属性】
技术研发人员：李雪，汪绪龙，王海峰，王宏博，
申请(专利权)人：中国医药工业研究总院有限公司，
类型：发明
国别省市：