一种同时测定海参中105种兽药及农药残留的方法技术

本发明专利技术公开了一种同时测定海参中105种兽药及农药残留的方法，包括：步骤1：制备海参样品；步骤2：配制农药混标储备溶液和兽药混标储备溶液；步骤3：配制标准中间溶液；步骤4：制备海参样品上机试样；步骤5：配制空白基质溶液；步骤6：配制基质匹配标准工作液；步骤7：对基质匹配标准工作溶液和海参样品上机试样分别进行测定，收集测定信息，绘制基质匹配标准工作曲线；步骤8：对海参样品上机试样进行定性分析；步骤9：通过外标法对存在化合物的海参样品进行定量。本发明专利技术可同时检测海参中兽药和农药残留，改进了通过式净化柱的净化流程，短时间内完成海参中兽药和农药的同时检测，提高了海参中药物残留检测的效率。参中药物残留检测的效率。参中药物残留检测的效率。

【技术实现步骤摘要】
一种同时测定海参中105种兽药及农药残留的方法


[0001]本专利技术涉及分析检测
，更具体地说，涉及一种同时测定海参中105种兽药及农药残留的方法。

技术介绍

[0002]2023年国家产地水产品兽药残留监控计划中，对海参的监测设置了专项检测项目，检测项目包括：氯霉素、硝基呋喃类代谢物、洛美沙星、培氟沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、环丙沙星、甲氰菊酯、扑草净、地西泮。完成整套参数需涉及多个检验方法，包括但不限于GB 31656.13
‑
2021《食品安全国家标准水产品中硝基呋喃类代谢物多残留的测定液相色谱
‑
串联质谱法》、GB/T 19857
‑
2005《水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定液相色谱
‑
串联质谱法》、GB 31658.2
‑
2021《食品安全国家标准动物源食品中氯霉素残留量的测定液相色谱
‑
串联质谱法》、农业农村部公告1077号
‑1‑
2008《水产品中17种磺胺类及15种喹诺酮类药物残留量的测定液相色谱
‑
串联质谱法》、SN/T 1968
‑
2007《进出口食品中扑草净残留量检测方法气相色谱
‑
质谱法》、GB/T 5009.162
‑
2008《动物性食品中有机氯农药和拟除虫菊酯农药多组分残留量的测定》、SN/T3235
‑
2012《出口动物源食品中多类禁用药物残留量检测方法液相色谱
‑
质谱/质谱法》。完成整个监测任务需要多名化验员使用多个检测方法，效率较低。
[0003][0004][0005]对于动物源食品包括水产品中的兽药残留的检测多是同时检测一个类型的兽药，兽药跨类别检测的标准方法较少，农药残留在动物源食品中的检测标准非常少，而目前没有可以同时检测海参中的兽药残留和农药残留的标准方法。开发一项可以同时检测海参中兽药和农药残留的方法不仅可以大大提高海参中药物残留检测的工作效率，同时，扩大了药物残留的监测范围，尽可能多的排查海参中的药物残留风险，对未来可能出现的新风险有较好的防范作用，并为相关部门调整监测方案提供有力的技术支撑。

技术实现思路

[0006]本专利技术针对上述问题，提供一种同时测定海参中105种兽药及农药残留的方法，通过一次前处理，经过高效液相色谱
‑
串联质谱分析，在短时间内完成对海参中105种兽药和农药的同时检测。
[0007]为了达到上述目的，本专利技术提供了一种同时测定海参中105种兽药及农药残留的方法，包括以下步骤：
[0008]步骤1：制备海参样品，将待测定的海参切成碎块，放入均质机制成糊状，制成待测试的海参样品。
[0009]步骤2：配制农药混标储备溶液和兽药混标储备溶液，所述农药混标储备溶液中含有53种农药化合物，所述兽药混标储备溶液含有6种头孢类兽药化合物和46种非头孢类兽
药化合物。
[0010]所述农药混标储备溶液内53种农药化合物的质量浓度均为1mg/L，所述兽药混标储备溶液内6种头孢类兽药化合物的质量浓度均为5mg/L，所述兽药混标储备溶液内46种非头孢类兽药化合物的质量浓度均为1mg/L。
[0011]步骤3：取所述农药混标储备溶液和所述兽药混标储备溶液配制成混合标准中间溶液，所述混合标准中间溶液中6种头孢类兽药化合物的质量浓度均为0.5mg/L，46种非头孢类兽药化合物的质量浓度均为0.1mg/L，53种农药化合物的质量浓度均为0.1mg/L。
[0012]步骤4：制备海参样品上机试样，制备海参样品上机试样包括以下步骤：
[0013]步骤41、称取2g步骤1中的均质后的海参样品于50mL塑料离心管中。
[0014]步骤42、加入1颗规格为2cm
×
1cm的陶瓷均质子，加入1mL水，1mL甲醇，3mL含0.5％甲酸的乙腈，涡旋振荡2min，9500r/min离心5min后，收集其上清液。
[0015]步骤43、定量吸取500μL上清液通过容量为60mg，3cc的固相萃取柱后，再定量吸取500μL含0.5％甲酸的乙腈淋洗小柱，正压吹干小柱，收集以上所有流出液。
[0016]步骤44、把步骤43中的流出液涡旋混匀1min后，通过0.22μm微孔滤膜，得到待测定的海参样品上机试样供高效液相色谱
‑
串联质谱仪测定。
[0017]步骤5：配制空白基质溶液，选择不含目标化合物的空白海参样品按照步骤4的方法进行处理，得到空白基质溶液。
[0018]步骤6：配制基质匹配标准工作液，吸取步骤3中的混合标准中间液，用步骤5中的空白基质溶液逐级稀释成53种农药化合物质量浓度和46种非头孢类兽药化合物质量浓度均为0.2μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L、4.0μg/L和10.0μg/L的基质匹配标准工作溶液，其中6种头孢类兽药化合物在基质匹配标准工作溶液中的质量浓度为1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L和50.0μg/L，配制后的基质匹配标准工作溶液供高效液相色谱
‑
串联质谱仪测定。
[0019]步骤7：利用高效液相色谱
‑
串联质谱仪对步骤6中配制的基质匹配标准工作溶液和步骤4中制作的海参样品上机试样分别进行测定，收集测定信息，测定信息包括化合物的定量离子质量色谱图的峰面积和离子丰度比；以基质匹配标准工作溶液中化合物的定量离子质量色谱图的峰面积为纵坐标，以基质匹配标准工作溶液中化合物的对应质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线，确定各化合物定量测定质量浓度的线性范围。
[0020]判断步骤4中制作的海参样品上机试样中的目标化合物的质量浓度是否在线性范围之内，如果在线性范围之内，则继续执行步骤8，如果不在线性范围之内，则对海参样品上机试样进行稀释，使海参样品上机试样中的目标化合物的质量浓度在所述线性范围之内。
[0021]步骤8：对步骤4中的海参样品上机试样进行定性分析，如果步骤4中的海参样品上机试样和步骤6的基质匹配标准工作溶液检出的色谱峰的保留时间相一致，并且在扣除背景后的海参样品质谱图中，目标化合物选择的定量和定性离子均出现，而且同一检测批次，对于同一化合物，海参样品上机试样中目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质匹配标准工作溶液相比，当基质匹配标准工作溶液中的化合物离子丰度比大于50％时，相对偏差在
±
20％以内，则判定海参样品中存在目标化合物；当离子丰度比大于20％且小于等于50％时，相对偏差在
±
25％以内，则判定海参样品中存在目标化合物；当离子丰度比大于10％且小于等于20％时，相对偏差在
±
30％以内，则判定海参样品中存在目标化合物，当离子丰度比小于等于10％时，相对偏差在
±
50％，则判定海参样品中存在目标化合物。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种同时测定海参中105种兽药及农药残留的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：制备海参样品，将待测定的海参切成碎块，放入均质机制成糊状，制成待测试的海参样品；步骤2：配制农药混标储备溶液和兽药混标储备溶液，所述农药混标储备溶液中含有53种农药化合物，所述兽药混标储备溶液含有6种头孢类兽药化合物和46种非头孢类兽药化合物；所述农药混标储备溶液内53种农药化合物的质量浓度均为1mg/L，所述兽药混标储备溶液内6种头孢类兽药化合物的质量浓度均为5mg/L，所述兽药混标储备溶液内46种非头孢类兽药化合物的质量浓度均为1mg/L；步骤3：取所述农药混标储备溶液和所述兽药混标储备溶液配制成混合标准中间溶液，所述混合标准中间溶液中6种头孢类兽药化合物的质量浓度均为0.5mg/L，46种非头孢类兽药化合物的质量浓度均为0.1mg/L，53种农药化合物的质量浓度均为0.1mg/L；步骤4：制备海参样品上机试样，制备海参样品上机试样包括以下步骤：步骤41、称取2g所述步骤1中的均质后的海参样品于50mL塑料离心管中；步骤42、加入1颗规格为2cm
×
1cm的陶瓷均质子，加入1mL水，1mL甲醇，3mL含0.5％甲酸的乙腈，涡旋振荡2min，9500r/min离心5min后，收集其上清液；步骤43、定量吸取500μL上清液通过容量为60mg，3cc的固相萃取柱后，再定量吸取500μL含0.5％甲酸的乙腈淋洗小柱，正压吹干小柱，收集以上所有流出液；步骤44、把步骤43中的流出液涡旋混匀1min后，通过0.22μm微孔滤膜，得到待测定的海参样品上机试样供高效液相色谱
‑
串联质谱仪测定；步骤5：配制空白基质溶液，选择不含目标化合物的空白海参样品按照所述步骤4的方法进行处理，得到空白基质溶液；步骤6：配制基质匹配标准工作液，吸取所述步骤3中的混合标准中间液，用所述步骤5中的空白基质溶液逐级稀释成53种农药化合物质量浓度和46种非头孢类兽药化合物质量浓度均为0.2μg/L、1.0μg/L、2.0μg/L、4.0μg/L和10.0μg/L的基质匹配标准工作溶液，其中6种头孢类兽药化合物在所述基质匹配标准工作溶液中的质量浓度为1.0μg/L、5.0μg/L、10.0μg/L、20.0μg/L和50.0μg/L，配制后的所述基质匹配标准工作溶液供高效液相色谱
‑
串联质谱仪测定；步骤7：利用高效液相色谱
‑
串联质谱仪对所述步骤6中配制的基质匹配标准工作溶液和所述步骤4中制作的海参样品上机试样分别进行测定，收集测定信息，所述测定信息包括化合物的定量离子质量色谱图的峰面积和离子丰度比；以基质匹配标准工作溶液中化合物的定量离子质量色谱图的峰面积为纵坐标，以基质匹配标准工作溶液中化合物的对应质量浓度为横坐标，绘制基质匹配标准工作曲线，确定各化合物定量测定质量浓度的线性范围；判断所述步骤4中制作的海参样品上机试样中的目标化合物的质量浓度是否在所述线性范围之内，如果在线性范围之内，则继续执行步骤8，如果不在所述线性范围之内，则对海参样品上机试样进行稀释，使海参样品上机试样中的目标化合物的质量浓度在所述线性范围之内；步骤8：对所述步骤4中的海参样品上机试样进行定性分析，如果所述步骤4中的海参样品上机试样和所述步骤6的基质匹配标准工作溶液检出的色谱峰的保留时间相一致，并且
在扣除背景后的海参样品质谱图中，目标化合物选择的定量和定性离子均出现，而且同一检测批次，对于同一化合物，海参样品上机试样中目标化合物的离子丰度比与质量浓度相当的基质匹配标准工作溶液相比，当基质匹配标准工作溶液中的化合物离子丰度比大于50％时，相对偏差在
±
20％以内，则判定海参样品中存在目标化合物；当离子丰度比大于20％且小于等于50％时，相对偏差在
±
25％以内，则判定海参样品中存在目标化合物；当离子丰度比大于10％且小于等于20％时，相对偏差小于
±
30％，则判定海参样品中存在目标化合物；当离子丰度比小于等于10％时，相对偏差在
±
50％以内，则判定海参样品中存在目标化合物；步骤9：通过外标法对存在化合物的海参样品进行定量，海参样品中的目标化合物的含量以质量分数ω计，单位为微克每千克，通过与其浓度相当的基质标准溶液来确定，按照“公式(1)”进行计算；式中：ω为海参试样中被测物残留量的数值，单位为微克每千克；ρ为基质匹配标准工作溶液中被测物质量浓度的数值，单位为微克每升；A为海参样品上机试样溶液中被测物质量色谱图的峰面积；A
s
为基质匹配标准工作溶液中被测物质量色谱图的峰面积；V1为步骤42中收集的上清液体积的数值，单位为毫升；f为步骤43中定量吸取的上清液体积与淋洗溶液体积之和/定量吸取的上清液体积；m为海参试样质量的数值，单位为克。2.根据权利要求1所述同时测定海参中105种兽药及农药残留的方法，其特征在于，所述步骤1中所述海参样...

【专利技术属性】
技术研发人员：许炳雯，葛祥武，孙程鹏，刘雪红，王姣娟，桂英爱，李军，赵月然，
申请(专利权)人：大连市检验检测认证技术服务中心，
类型：发明
国别省市：