一测多评法测定金藤清痹颗粒中7种成分的含量及其应用制造技术

本发明专利技术属于中药制剂分析领域，具体公开了一测多评法测定金藤清痹颗粒中7种成分的含量及其应用。以青藤碱为内标物进行一测多评，建立青藤碱与金藤清痹中没食子酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C之间的相对校正因子，并通过校正因子计算金藤清痹中没食子酸、新绿原酸、青藤碱、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C的含量。本发明专利技术方法实用性强、操作简单、节约成本，检测结果准确可靠，弥补了金藤清痹颗粒质量检测方法的不足，为金藤清痹颗粒质量控制与药品内在质量评价提供了新途径。新途径。

【技术实现步骤摘要】
一测多评法测定金藤清痹颗粒中7种成分的含量及其应用


[0001]本专利技术属于中药制剂分析领域，具体涉及金藤清痹颗粒的质量检测方法，特别是一测多评法测定金藤清痹颗粒中7种成分的含量及其应用。

技术介绍

[0002]金藤清痹颗粒由金银花、青风藤、白花蛇舌草、玄参、地黄、山慈菇、鹿衔草、甘草、当归、白芍、蜈蚣11味中药制备而成，为鲁南厚普制药有限公司的独家中成药品种(国药准字Z20123065)，其主要功效为清热解毒，活血消肿，通痹止痛。用于类风湿性关节炎活动期，属于毒热内蕴，湿热阻络证。症见关节肿胀，疼痛拒按，晨僵，触之发热，或皮肤发红，身热，汗多，口渴，便干溲黄，舌质红，苔黄腻，脉滑数。
[0003]金藤清痹颗粒全方以金银花、青风藤为君药；白花蛇舌草、山慈菇、鹿衔草、当归、白芍为臣药；玄参、地黄、甘草为佐药；蜈蚣为使药。诸药相配，具有清热解毒、活血消肿、通痹止痛之功效。金银花富含挥发油，还含有黄酮类及有机酸等，实验研究结果发现，其水煎液、口服液和注射液均具有解热、抗炎、调节机体的免疫功能等作用。青风藤主要含有青藤碱、木兰花碱等药效成分，具有抗炎镇痛、抗风湿及免疫抑制等作用，为治疗类风湿关节炎的常用中药。当归、白芍、白花蛇舌草、鹿衔草补血活血、缓急止痛、强筋健骨；玄参、干地黄、甘草、山慈菇滋阴凉血、泻火解毒；蜈蚣活血消瘀、攻毒散结、通络止痛，药理学研究表明蜈蚣能改善微循环，并有较强镇痛、抗炎的作用。诸药同用，共奏清热解毒、活血消瘀散肿、通络通痹止痛之功。
[0004]目前，尚未有金藤清痹颗粒含量测定相关报道，制剂缺乏有效的质量检测评价方法。金藤清痹颗粒为中药复方制剂，化学成分复杂，需要进行全面的质量控制，才能保证临床用药的安全和有效。采用传统外标法进行多成分定量，存在对照品众多、价格昂贵等问题。一测多评(QAMS)法以样品中一个内参物建立其他成分的相对校正因子，进而计算其他成分含量，能够克服中药制剂多成分含量测定时对照品缺乏的问题，节约检测时间及成本。因此，一测多评法在金藤清痹颗粒中的应用，可在消耗使用更少对照品的情况下，达到有效准确定量更多金藤清痹颗粒中的有效成分的目的，具有广阔的推广应用前景。

技术实现思路

[0005]本专利技术提供了一测多评法测定金藤清痹颗粒中7种有效成分含量的方法及其应用。本专利技术的技术方案如下：
[0006]一测多评法测定金藤清痹颗粒7种成分含量的方法，采用青藤碱作为内标物，建立青藤碱与金藤清痹颗粒中没食子酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B和异绿原酸C之间的相对校正因子，通过校正因子计算金藤清痹颗粒中没食子酸、新绿原酸、青藤碱、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C的含量；
[0007]采用高效液相色谱法进行测定，具体方法如下：
[0008]A对照品溶液的制备精密称取没食子酸、新绿原酸、青藤碱、绿原酸、隐绿原酸、异
绿原酸B、异绿原酸C对照品，加入甲醇使其完全溶解，配制成混合对照品溶液，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液备用。
[0009]B、供试品溶液的制备精密称取金藤清痹颗粒，精密加入乙醇溶液，超声使其溶解，过0.22μm微孔滤膜，取续滤液即得供试品溶液。
[0010]C、色谱条件色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇
‑
磷酸水溶液；
[0011]按照以下梯度洗脱程序洗脱：
[0012][0013]所述的色谱柱选自Agilent ZORBAX SB
‑
C18、Agilent Eclipse XDB
‑
C18、Thermo Secientific BDS HYPERSIL C18中的一种。所述色谱柱的规格为4.6mm
×
250mm，5μm。
[0014]所述的流动相中磷酸水溶液的浓度为0.1％
‑
1.0％；优选为0.3％
‑
0.5％。
[0015]色谱柱温度为25
‑
35℃，优选为30℃。
[0016]优选地，没食子酸和青藤碱检测波长为260
‑
270nm，新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B和异绿原酸C检测波长为320
‑
340nm。
[0017]优选地，没食子酸和青藤碱检测波长为262nm，新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B和异绿原酸C检测波长为330nm。
[0018]流动相流速为0.7
‑
1.1ml/min；优选为1.0mL/min。
[0019]进样量为5
‑
20μL；优选为10μL。
[0020]所述供试品溶液配制所用的溶剂为70％乙醇溶液。所述供试品溶液配制超声处理功率为250W，频率50kHz；超声处理时间为30min。
[0021]上述一测多评法测定金藤清痹颗粒7中成分含量的方法在金藤清痹颗粒质量控制和评价中的应用。
[0022]本专利技术对金藤清痹颗粒进行多指标含量测定，建立了以其中1个成分作为内参物，从而实现多成分同时测定的QAMS法，并取得了以下有益的技术效果：
[0023]首先，选用价廉易购、性质稳定的青藤碱作为内参物，建立了青藤碱与金藤清痹颗粒中6个主要有效成分间的相对校正因子。
[0024]其次，通过对不同批次金藤清痹颗粒的成分定量分析，验证了QAMS法的准确性，并在不同品牌仪器、不同色谱柱，以及不同柱温、不同流速等条件下考察该方法的重现性。结果表明，QAMS法与外标法所测结果间的RAD值均小于2％，可以在缺少没食子酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C对照品的情况下，通过相对校正因子计算含量，该方法能够有效降低成本，准确可靠，为提高金藤清痹颗粒的质控标准以及全面评价其质量提供了依据。
[0025]最后，本专利技术的方法实用性强、操作简单、节约成本，试验结果准确可靠，弥补了金藤清痹颗粒质量控制方法的不足，从而为金藤清痹颗粒的质量控制与内在质量评价提供新选择。
附图说明
[0026]图1是实施例1混合对照品在262nm下的色谱图；
[0027]图2是实施例1混合对照品在330nm下的色谱图；
[0028]图3是实施例1供试品在262nm下的色谱图；
[0029]图4是实施例1供试品在330nm下的色谱图；
[0030]图5是实施例2供试品在262nm下的色谱图；
[0031]图6是实施例2供试品在330nm下的色谱图；
[0032]图7是实施例3供试品在262nm下的色谱图；
[0033]图8是实施例3供试品在330nm下的色谱图；
[0034]图9是对比实施例1供试品在262nm下的色谱图；
[0035]图10是对比实施例1供试品在330nm下的色谱图；
[0036]图11是对比实施例2供试品在262nm下的色谱图；
[0037]图12是对比实施例2供试品在330nm下的色谱图。<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一测多评法测定金藤清痹颗粒中7种成分含量的方法，其特征在于，采用青藤碱作为内标物，建立青藤碱与金藤清痹颗粒中没食子酸、新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B和异绿原酸C之间的相对校正因子，通过校正因子计算金藤清痹颗粒中没食子酸、新绿原酸、青藤碱、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C的含量；采用高效液相色谱法进行测定，具体方法如下：A、对照品溶液的制备精密称取没食子酸、新绿原酸、青藤碱、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸C对照品，加入甲醇使其完全溶解，配制成混合对照品溶液，过微孔滤膜，取续滤液备用。B、供试品溶液的制备精密称取金藤清痹颗粒，精密加入乙醇溶液，超声使其溶解，过微孔滤膜，取续滤液，即得供试品溶液。C、色谱条件色谱柱：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇
‑
磷酸水溶液；按照以下梯度洗脱程序洗脱：2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的色谱柱选自Agilent ZORBAX SB
‑
C18、Agilent Eclipse XDB
‑
C18、Thermo Secientific BDS HYPERSIL C18中的一种。3.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：张贵民，关永霞，郭威，蒋金星，
申请(专利权)人：鲁南厚普制药有限公司，
类型：发明
国别省市：