抗ASGR1单克隆抗体及其应用制造技术

本发明专利技术公开抗ASGR1单克隆抗体及其用途。本发明专利技术进一步公开了包括抗ASGR1单克隆抗体在内的ASGR1抑制剂与第二降脂药的组合在降低血液和/肝脏中总胆固醇和/或甘油三酯的水平或治疗和/或预防心血管病中的应用。本发明专利技术证实ASGR1抑制剂与第二降脂药的组合具有协同的降低血清和肝脏中的总胆固醇和甘油三酯的作用。低血清和肝脏中的总胆固醇和甘油三酯的作用。

【技术实现步骤摘要】
抗ASGR1单克隆抗体及其应用


[0001]本专利技术涉及抗ASGR1单克隆抗体。本专利技术还涉及ASGR1抑制剂（例如抗ASGR1单克隆抗体）与另一降脂药的联合使用。

技术介绍

[0002]他汀类药物，通常用于减少低密度脂蛋白胆固醇（LDL
‑
c），是用来降低胆固醇的一线药物。目前由FDA批准上市的他汀类药物主要包括洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、瑞舒伐他汀和匹伐他汀，而其中又以阿托伐他汀和瑞舒伐他汀使用最为广泛。然而，也有相关研究发现，长期使用他汀类药物会使患者出现他汀抵抗，产生肝脏毒害作用。一部分患者他汀不耐受，产生副作用：如肌无力、横纹肌溶解、糖尿病等。中等强度他汀并不能满足强化降脂的临床需求；而大剂量他汀剂量加倍后疗效仅增加6%，不良反应却增加了一倍，临床应用有着很大的局限性。
[0003]依折麦布（EZ）是第一个胆固醇吸收抑制剂，其主要功能是抑制NPC1L1介导的小肠刷状缘从饮食和胆汁中吸收胆固醇，但不影响其他脂溶性营养物质的吸收，主要用于高胆固醇血症。EZ处理后减少肝脏中脂质的堆积，减少血液中胆固醇、甘油三酯和LDL
‑
c，同时增加高密度脂蛋白胆固醇（HDL
‑
c），对于脂溶性的维生素如维生素A、维生素D和维生素E无显著影响。但是，单独应用依折麦布时，LDL
‑
c血浆浓度降低程度较弱（约20%），因此临床上多将其与他汀类联合应用。在4项多中心、双盲、安慰剂对照、为期12周的研究中，1187名原发性高胆固醇血症患者接受了每天单独应用依折麦布10 mg治疗或联合应用阿托伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、洛伐他汀的治疗。联合用药的患者LDL
‑
c降低程度与他汀类药物的种类和剂量无关。依折麦布与最小剂量他汀类药物联合应用降低LDL
‑
c的作用优于大剂量单独应用他汀类药物。依折麦布辛伐他汀片（葆至能
®
）是目前国内唯一一款降脂药物复方制剂，片剂中含有临床应用广泛的两种降脂药物——辛伐他汀和依折麦布，适用于高胆固醇血症患者。依折麦布辛伐他汀片具有双重作用机制，在抑制胆固醇在肝脏合成的同时，抑制胆固醇在小肠的吸收，可强效降低LDL
‑
c达50%以上。
[0004]虽然依折麦布与他汀类降脂药物联合给药一定程度上降低了他汀类药物的用量，从而降低其毒副作用，但联合给药仍具有常见的副作用，例如肝功能检查异常，如谷丙转氨酶（ALT）和/或谷草转氨酶（AST）升高；血液肌酸激酶（CK）升高，以及不常见的血液胆红素升高；血液尿酸升高；γ
‑
谷氨酰转肽酶升高；国际标准化比值升高；出现蛋白尿；体重下降等。
[0005]WO 2017058944 A1、WO 2022006327 A1以及US 20210163601 A1公开了通过施用ASGR
‑
1抗原结合蛋白来治疗和预防心血管疾病的方法，其中揭示了抗ASGR1抗体能够降低低密度脂蛋白胆固醇（LDL
‑
c）和/或非高密度脂蛋白胆固醇（Non
‑
HDL
‑
C）的水平。然而，目前没有ASGR1抗体批准上市用于治疗单纯高胆固醇血症或其他心血管疾病。

技术实现思路

[0006]在第一方面，本专利技术提供结合至ASGR1的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述单克
隆抗体抑制或阻断ASGR1与其天然配体的结合和/或ASGR1的内吞，所述单克隆抗体包含轻链可变区和重链可变区并且选自以下任一抗体：（a）所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2、LCDR3，分别包含SEQ ID NO: 4
‑
6所示的序列或其每一个的等效物，所述重链可变区包含HCDR1、HCDR2、HCDR3，分别包含SEQ ID NO: 7
‑
9所示的序列或其每一个的等效物；（b）所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2、LCDR3，分别包含SEQ ID NO:10
‑
12所示的序列或其每一个的等效物，所述重链可变区包含HCDR1、HCDR2、HCDR3，分别包含SEQ ID NO: 13
‑
15所示的序列或其每一个的等效物；（c）所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2、LCDR3，分别包含SEQ ID NO:16
‑
18所示的序列或其每一个的等效物，所述重链可变区包含HCDR1、HCDR2、HCDR3，分别包含SEQ ID NO: 19
‑
21所示的序列或其每一个的等效物；（d）所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2、LCDR3，分别包含SEQ ID NO:22
‑
24所示的序列或其每一个的等效物，所述重链可变区包含HCDR1、HCDR2、HCDR3，分别包含SEQ ID NO: 25
‑
27所示的序列或其每一个的等效物；（e）所述轻链可变区包含SEQ ID NO:28所示的序列或其等效物，所述重链可变区包含SEQ ID NO: 29所示的序列或其等效物；（f）所述轻链可变区包含SEQ ID NO:30所示的序列或其等效物，所述重链可变区包含SEQ ID NO: 31所示的序列或其等效物；（g）所述轻链可变区包含SEQ ID NO:32所示的序列或其等效物，所述重链可变区包含SEQ ID NO: 33所示的序列或其等效物；以及（h）所述轻链可变区包含SEQ ID NO:34所示的序列或其等效物，所述重链可变区包含SEQ ID NO: 35所示的序列或其等效物。
[0007]在第二方面，本专利技术提供一种药物组合物，其包含上述单克隆抗体或其抗原结合片段中的任一种，以及药学上可接受的载体。
[0008]在第三方面，本专利技术提供一种降低血液中胆固醇和/或甘油三酯的水平或治疗和/或预防心血管病的方法，所述方法包括向对象施用治疗有效量的上述单克隆抗体或其抗原结合片段中的任一种，或包含上述单克隆抗体或其抗原结合片段中的任一种的药物组合物。
[0009]在第四方面，本专利技术提供上述单克隆抗体或其抗原结合片段或上述药物组合物在制备用于降低血液中胆固醇和/或甘油三酯的水平或用于治疗和/或预防心血管病的药物中的应用。
[0010]在第五方面，本专利技术提供用于降低血液中胆固醇和/或甘油三酯的水平或用于治疗和/或预防心血管病用途的上述单克隆抗体或其抗原结合片段或上述药物组合物。
[0011]在第六方面，本专利技术提供一种编码本专利技术所述的单克隆抗体或其抗原结合片段的核苷酸序列。另一方面，本专利技术还提供一种包含前述核苷酸序列的载体。另一方面，本专利技术还提供一种包含前述载体的宿主细胞。此外，本专利技术还提供生成本专利技术的单克隆抗体或其抗原结合片段的细胞系，包含本专利技术的核苷酸的重组表达载体，以及通过培养抗体生产细胞系来制备抗体的方法。
[0012]在上述任一方面，所述单克隆抗体优选是人源化抗体或嵌合抗体。
[0013]专利技术人还发现，ASGR1抑本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.结合至ASGR1的单克隆抗体或其抗原结合片段，所述单克隆抗体抑制或阻断ASGR1与其天然配体的结合和/或ASGR1的内吞，所述单克隆抗体包含轻链可变区和重链可变区并且选自以下任一抗体：（a）所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2、LCDR3，分别包含SEQ ID NO: 4
‑
6所示的序列，所述重链可变区包含HCDR1、HCDR2、HCDR3，分别包含SEQ ID NO: 7
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9所示的序列；（b）所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2、LCDR3，分别包含SEQ ID NO:10
‑
12所示的序列，所述重链可变区包含HCDR1、HCDR2、HCDR3，分别包含SEQ ID NO: 13
‑
15所示的序列；（c） 所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2、LCDR3，分别包含SEQ ID NO:16
‑
18所示的序列，所述重链可变区包含HCDR1、HCDR2、HCDR3，分别包含SEQ ID NO: 19
‑
21所示的序列；（d）所述轻链可变区包含LCDR1、LCDR2、LCDR3，分别包含SEQ ID NO:22
‑
24所示的序列，所述重链可变区包含HCDR1、HCDR2、HCDR3，分别包含SEQ ID NO: 25
‑
27所示的序列；（e）所述轻链可变区包含SEQ ID NO:28所示的序列，所述重链可变区包含SEQ ID NO: 29所示的序列；（f）所述轻链可变区包含SEQ ID NO:30所示的序列，所述重链可变区包含SEQ ID NO: 31所示的序列；（g）所述轻链可变区包含SEQ ID NO:32所示的序列，所述重链可变区包含SEQ ID NO: 33所示的序列；以及（h）所述轻链可变区包含SEQ ID NO:34所示的序列，所述重链可变区包含SEQ ID NO: 35所示的序列。2.根据权利要求1所述的单克隆抗体或其抗原结合片段，其中所述单克隆抗体是人源化抗体或嵌合抗...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋保亮，王菊琼，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：