一种防病促生的复合微生物菌剂及其制备方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种防病促生的复合微生物菌剂及其制备方法与应用。该复合微生物菌剂包括保藏编号为GDMCC 61592的特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)XK29与保藏编号为GDMCC 60273的绿针假单胞菌致金色亚种(Pseudomonas chlororaphis sub sp.Aureofaciens)SPS

【技术实现步骤摘要】
一种防病促生的复合微生物菌剂及其制备方法与应用


[0001]本专利技术涉及微生物菌剂领域，具体涉及一种防病促生的复合微生物菌剂及其制备方法与应用。

技术介绍

[0002]化肥、农药在现代蔬菜与水果种植生产中发挥着巨大作用，但是化肥、农药的过量使用不仅会造成生产成本增加，也导致水源污染、土壤板结以及农产品质量安全和生态环境安全等问题。化肥、农药减施增效技术的研发、推广应用已经成为提升农业绿色发展的有效途径。
[0003]当前，设施蔬菜和水果种植中化肥农药减量增效关键措施包括推广轮作模式、选择适宜品种、高温闷棚等土壤消毒、增施有机肥和平衡施用化肥等方法。而随着绿色农业的不断推广，利用微生物菌剂进行果树种植和生物防治成为研究和应用的热点。微生物菌剂种含有大量的有益活菌物质及多种天然发酵活性物质，施入土壤后，在根际繁殖形成优势种群，发挥其降解酚类等有害物质、产活性物质抑制土传病原菌及杀虫、活化土壤提高土壤肥力等作用，功能微生物本身还可以产生各类植物生长激素，刺激植物生长。因此，微生物菌剂具有促生、抗病、杀虫、解毒、抗逆、活化土壤、提高果蔬品质等功效，日益受到农业产业的关注。而单一微生物菌剂存在功能单一、适应能力差等问题。将不同功能菌株组合得到比单一微生物菌剂促生能力更强、更稳定的微生物复合菌剂，是微生物菌剂发展的趋势。
[0004]复合微生物菌剂是一种绿色环保、生态友好的肥料，具有增加土壤肥力、减少化肥和农药使用、净化和修复土壤、降低植物病害、提质增产、提高食品安全等特点，是实现农业可持续化发展的重要途径。因此，利用微生物技术生产高效优质的多功能复合微生物菌剂是发展生态农业、有机农业的需要，符合农业可持续发展战略的要求。
[0005]经检索，现有技术中尚未发现有关于特基拉芽孢杆菌和绿针假单胞菌致金色亚种复配制成复合菌剂，以及该复合菌剂在番茄枯萎病防控、扦插菊花苗生根、大蒜生长与产量提升，以及田间草莓生长中的应用的报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的第一个目的是提供一种防病促生的复合微生物菌剂。
[0007]本专利技术的第二个目的是提供上述复合微生物菌剂的制备方法。
[0008]本专利技术的第三个目的是提供上述复合微生物菌剂在果蔬生长中的应用。
[0009]为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：
[0010]第一，本专利技术提供一种防病促生的复合微生物菌剂，包括保藏编号为GDMCC 61592的特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)XK29与保藏编号为GDMCC 60273的绿针假单胞菌致金色亚种(Pseudomonas chlororaphis sub sp.Aureofaciens)SPS
‑
41；所述复合微生物菌剂的活菌数大于等于1.0
×
107cfu/mL。
[0011]优选的，所述复合微生物菌剂为液体制剂。
[0012]第二，本专利技术提供上述复合微生物菌剂的制备方法，具体步骤为：
[0013](1)菌株活化：采用四区划线的方法，(Bacillus tequilensis)XK29和(Pseudomonas chlororaphis sub sp.Aureofaciens)SPS
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41接种在LB固体平板上，于30℃恒温培养3d；
[0014](2)复合微生物菌剂种子液的制备：从LB固体平板用接种环分别挑取1
‑
2环新鲜XK29和SPS
‑
41菌体分别接入到NA液体培养基中，震荡培养，获得XK29和SPS
‑
41菌体的种子液；
[0015](3)复合微生物菌剂的制备：将培养到对数期的种子培养液接入到LB液体培养基中，XK29摇菌振荡培养24h，SPS
‑
41摇菌振荡培养36h，然后将摇好的菌液离心1次，用无菌水冲洗1次，再次离心，得到菌体，菌体用无菌水重悬并稀释至浓度为1
×
107cfu/mL的菌悬液；然后两菌的菌液以1：1等体积混合，即制成复合微生物菌剂。
[0016]优选的，步骤(2)中所述震荡培养的具体步骤是：于30℃，160rpm转速在摇床上18
‑
24小时。
[0017]第三，本专利技术提供上述复合微生物菌剂在促进番茄生长和枯萎病防控中的应用。
[0018]第四，本专利技术提供上述复合微生物菌剂在扦插菊花苗生根中的应用。
[0019]第五，本专利技术提供上述复合微生物菌剂在田间草莓生长上的应用。
[0020]第六，本专利技术提供上述复合微生物菌剂在田间大蒜生长和化肥减施增效上的应用。
[0021]与现有技术相比，本专利技术具有如下有益效果：
[0022](1)本专利技术的复合微生物菌剂具有多种活性功能，具有很好的抑菌性、降解植物根际自毒物质的能力，良好的促生长能力，能够有效促进植物的生根发育和生长。
[0023](2)本专利技术的复合微生物菌剂应用范围广：不仅包括番茄、大蒜等蔬菜的生长发育上的应用，还可以防治病害，同时可以应用于草莓等水果植株的种植，以及难生根的花卉作物，例如菊花等种植上。既能促生长、防病害，也能有效增产量、减肥减药，在果蔬病害防治、生长促进，以及连作障碍的缓解方面都能发挥功效。
[0024]该专利技术技术有利于减少化学的施用，降低农业种植成本，是一种果蔬种植以及化肥减施增效的新技术方法，应用前景好。同时，菌株生物安全性好、易于发酵，生产成本低、绿色无污染，易于推广应用。
附图说明
[0025]图1是菌株XK29和SPS
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41对番茄枯萎病菌的抑菌活性检测照片；
[0026]图2是菌株XK29和SPS
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41对根际自毒物对羟基苯甲酸的降解能力检测；
[0027]图3是复合微生物菌剂对盆栽番茄的促生长和枯萎病的防治效果；
[0028]图4是复合微生物菌剂对盆栽番茄的促生长和枯萎病的防治效果表型数据比较(A.须根数；B.根长；C植株高度.；D.鲜根重)；
[0029]图5是复合微生物菌剂对盆栽菊花苗的促生效果和表型数据比较(须根数、根长和鲜重)；
[0030]图6是复合微生物菌剂对田间草莓的促生效果和表型数据比较(株高、分枝数和最大叶片直径)；
[0031]图7是复合微生物菌剂对田间大蒜植株生长的促生效果；
[0032]图8是复合微生物菌剂对田间大蒜蒜头重量的提升效果。
具体实施方式
[0033]下面结合附图和具体实施例对本专利技术作进一步详细说明。
[0034]本专利技术实施例使用的(Bacillus tequilensis)XK29菌株首次公开于中国专利技术专利申请CN 113151094A，(Pseudomonas chlororaphis sub sp.Aureofaciens)SPS
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41菌株首次公开于中国专利技术专利申请CN 108148782A。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种防病促生的复合微生物菌剂，其特征在于，包括保藏编号为GDMCC 61592的特基拉芽孢杆菌(Bacillus tequilensis)XK29与保藏编号为GDMCC 60273的绿针假单胞菌致金色亚种(Pseudomonas chlororaphis sub sp.Aureofaciens)SPS
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41；所述复合微生物菌剂的活菌数大于等于1.0
×
107cfu/mL。2.根据权利要求1所述的一种防病促生的复合微生物菌剂，其特征在于，所述复合微生物菌剂为液体制剂。3.一种权利要求1或2所述的防病促生的复合微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)菌株活化：采用四区划线的方法，(Bacillus tequilensis)XK29和(Pseudomonas chlororaphis sub sp.Aureofaciens)SPS
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41接种在LB固体平板上，于30℃恒温培养3d；(2)复合微生物菌剂种子液的制备：从LB固体平板用接种环分别挑取1
‑
2环新鲜XK29和S...

【专利技术属性】
技术研发人员：秦盛，彭浩，朱逸晨，李成果，周瑞岭，时潇琼，覃月映，张春媚，邢珂，
申请(专利权)人：徐州快邦生物科技开发有限公司，
类型：发明
国别省市：