一种组织单细胞悬液的消化酶及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种组织单细胞悬液的消化酶及其应用，本发明专利技术提供的制备组织单细胞悬液的方法制备得到的单细胞悬液具有较高的细胞活率，单细胞悬液质量高，具有很高的实际应用价值，可以比较方便、快捷、高效应用于单细胞测序检测。序检测。

【技术实现步骤摘要】
一种组织单细胞悬液的消化酶及其应用


[0001]本专利技术属于生物医药领域，具体涉及一种组织单细胞悬液的消化酶及其应用。

技术介绍

[0002]制备组织单细胞悬液是细胞生物学研究的前提，实体组织单细胞悬液的制备较为困难，获得产率高活性高功能强的单细胞对于进一步的实验研究十分必要，而细胞数量不足细胞碎片过多细胞粘连成团等均可导致整个实验的失败，近年来，尽管小鼠作为模式动物在生物医学研究中的优势越来越明显，但目前有关肺单细胞悬液制备的报道较少，尤其是动物实验中小鼠肺组织量极少，如何应用少量小鼠肺组织制备足量的肺单细胞悬液以进一步进行实验研究是本领域亟待解决的问题。

技术实现思路

[0003]为弥补现有技术的不足，本专利技术提供了一种组织单细胞悬液的消化酶及其应用。
[0004]为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：
[0005]本专利技术的第一方面提供了一种用于制备组织单细胞悬液的消化酶Mix，所述消化酶Mix包括胶原酶、DNA消化酶I、弹性蛋白酶、中性蛋白酶II。
[0006]进一步，所述胶原酶包括胶本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于制备组织单细胞悬液的消化酶Mix，其特征在于，所述消化酶Mix包括胶原酶、DNA消化酶I、弹性蛋白酶、中性蛋白酶II；优选的，所述胶原酶包括胶原酶I、胶原酶II、胶原酶III、胶原酶IV、胶原酶V、胶原酶D、胶原酶P；优选的，所述胶原酶包括胶原酶I、胶原酶IV、胶原酶D、胶原酶P；优选的，所述胶原酶选自胶原酶I、胶原酶P；优选的，所述组织包括肺组织、肝组织、肾上腺组织；优选的，所述组织选自肺组织。2.根据权利要求1所述的消化酶Mix，其特征在于，所述胶原酶I或胶原酶P的浓度为0.5
‑
3mg/ml；优选的，所述胶原酶I或胶原酶P的浓度为1.5mg/ml；优选的，所述DNA消化酶I的浓度为20
‑
50μg/ml；优选的，所述DNA消化酶I的浓度为30μg/ml；优选的，所述弹性蛋白酶的浓度为0.05
‑
0.3mg/ml；优选的，所述弹性蛋白酶的浓度为0.1mg/ml；优选的，所述中性蛋白酶II的浓度为0.1
‑
0.5mg/ml；优选的，所述中性蛋白酶II的浓度为0.2mg/ml；优选的，胶原酶I或胶原酶P、DNA消化酶I、弹性蛋白酶、中性蛋白酶II的质量体积比为2
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4：15
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25：15
‑
25：15
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25；优选的，胶原酶I或胶原酶P、DNA消化酶I、弹性蛋白酶、中性蛋白酶II的质量体积比为3：20：20：20。3.一种制备组织单细胞悬液的方法，其特征在于，所述方法包括使用权利要求1或2所述的消化酶Mix消化组织；优选的，消化组织的温度为33
‑
39℃；优选的，消化组织的温度为37℃；优选的，消化组织的时间为10
‑
40min；优选的，消化组织的时间为30min；优选的，消化组织的方法还包括在消化过程中不断添加消化酶Mix；优选的，吸出消化好的细胞悬液后添加消化酶Mix。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述方法还包括将消化后的组织过滤...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨子涵，文礼，卢婉怡，张秀丽，郭笑宇，刘如娟，潘嘉纯，赵雄，韩梓莹，孔凡一，庞可，吴东，
申请(专利权)人：中国医学科学院北京协和医院，
类型：发明
国别省市：