一种基质金属蛋白酶8突变体MMP8-P326V及其编码基因和应用制造技术

本发明专利技术公开一种基质金属蛋白酶8突变体MMP8

【技术实现步骤摘要】
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‑
267.

技术实现思路

[0018]本专利技术的目的在于提供促进皮肤伤口愈合关键蛋白，基质金属蛋白酶8的突变体MMP8
‑
P326V及其编码基因和应用。
[0019]为达到上述目的，本专利技术采用下述技术方案：
[0020]本专利技术首先提供了一种基质金属蛋白酶8突变体MMP8
‑
P326V，所述基质金属蛋白酶8突变体MMP8
‑
P326V是将NCBI数据库转录本中NM_002424号所示的野生型基质金属蛋白酶8MMP8(序列如SEQ ID NO.1所示)第326位的Pro突变为Val。
[0021]进一步地，所述基质金属蛋白酶8突变体MMP8
‑
P326V氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示的蛋白质。
[0022]本专利技术进一步提供了上述基质金属蛋白酶8的突变体MMP8
‑
P326V的编码基因。所述基质金属蛋白酶8的突变体MMP8
‑
P326V的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。需要说明的是，由于同一氨基酸可能有多种不同的密码子来决定，所以上述基质金属蛋白酶8
的突变体MMP8
‑
P326V的编码基因也可以是由SEQ ID NO.4所示的野生型基质金属蛋白酶8的编码基因突变一个或多个核苷酸形成同义突变得到同样可编码本专利技术所述基质金属蛋白酶8突变体MMP8
‑
P326V的基因核苷酸序列。
[0023]本专利技术保护包含上述基质金属蛋白酶8突变体MMP8
‑
P326V的编码基因的重组载体。
[0024]进一步地，所述重组载体是将上述基质金属蛋白酶8的编码基因第326的Pro突变为Val，且保持pLenti
‑
C
‑
mGFP
‑
P2A
‑
Puro的其他序列不变得到的重组载体pLenti
‑
C
‑
mGFP
‑
P2A
‑
Puro
‑
MMP8
‑
P326V。
[0025]本专利技术进一步提供了上述基质金属蛋白酶8突变体MMP8
‑
P326V的制备方法，包括以下步骤：
[0026](1)针对基质金属蛋白酶8突变体MMP8
‑
P326V的突变位点设计携带突变位点的引物，以含有野生型基质金属蛋白酶8的编码基因的质粒为模板，进行定点突变PCR，获得含有基质金属蛋白酶8突变体MMP8
‑
P326V的编码基因的重组载体；
[0027](2)重组载体转化宿主细胞，得到重组菌；
[0028](3)培养重组菌，诱导表达蛋白；
[0029](4)回收并纯化，即得基质金属蛋白酶8突变体MMP8
‑
P326V。
[0030]进一步本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组蛋白基质金属蛋白酶8突变体MMP8
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P326V，其特征在于，所述基质金属蛋白酶8突变体MMP8
‑
P326V是将SEQ ID NO.1所示的基质金属蛋白酶8MMP8第326位的Pro突变为Val。2.根据权利要求1所述的基质金属蛋白酶8突变体MMP8
‑
P326V，其特征在于，所述基质金属蛋白酶8突变体MMP8
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P326V氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示的蛋白质。3.如权利要求1或2所述的基质金属蛋白酶8突变体MMP8
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P326V的编码基因，其特征在于，所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。4.包含权利要求3所述的编码基因的重组载体，其特征在于，所述重组载体为将权利要求3所述的编码基因连接到pLenti
‑
C
‑
mGFP
‑
P2A
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Puro的SgfI和MluI酶切位点之间，且保持pLenti
‑
C
‑
mGFP
‑
P2A
‑
Puro的其他序列不变得到的重组载体pLenti
‑
C
‑
mGFP
‑
P2A<...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹雪，晏姗，张丽欢，于明，游顶云，张会香，石岚兰，王利梅，
申请(专利权)人：昆明医科大学，
类型：发明
国别省市：