一种同时检测３２个单核苷酸多态性位点基因型的方法技术

本发明专利技术涉及一种同时检测３２个标签单核苷酸多态性位点的方法。选择国际单倍型图工程数据库上公布的内收蛋白１，血小板内皮细胞黏附分子－１，Ｃ－反应蛋白，内皮固有型一氧化氮合酶，浆细胞膜糖蛋白１，Ｌ－选择素，Ｇ蛋白β３亚单位，血管紧张素Ｉ转换酶，血管紧张素ＩＩ?１型受体，血管紧张素原，亚甲基四氢叶酸还原酶和肝脂肪酶基因中国汉族人群的３２个标签单核苷酸多态性，每个单核苷酸多态性设计３条引物（２条ＰＣＲ扩增引物和１条延伸引物），通过ＰＣＲ扩增、延伸及杂交，应用ＳＮＰ?Ｓｔｒｅａｍ基因分型系统对单核苷酸多态性位点进行基因分型。本检测方法具有快速、准确、高通量、操作简单、微量化等优点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种同时检测３２个单核苷酸多态性位点的方法，这些基因及３２个标签单核苷酸多态性位点是内收蛋白１基因：ｒｓ３７７５０６７、ｒｓ１２６３３５９，血小板内皮细胞黏附分子－１基因：ｒｓ５０３５５０，Ｃ－反应蛋白基因：ｒｓ１２０５，内皮固有型一氧化氮合酶基因：ｒｓ７８３０、ｒｓ３９１８１８８，浆细胞膜糖蛋白１基因：ｒｓ１２５２８０７６、ｒｓ８５８３４１、ｒｓ０２１９６６、ｒｓ８５８３４５、ｒｓ９３０８９９５，Ｌ－选择素基因：ｒｓ９６４５５５、ｒｓ２２０５８４８、ｒｓ４９８７３１８、ｒｓ２２９８９００，Ｇ蛋白β３亚单位基因：ｒｓ５４４５，血管紧张素Ⅰ转换酶基因：ｒｓ４３３３、ｒｓ４３０５、ｒｓ４３５３，血管紧张素Ⅱ　１型受体基因：ｒｓ６８０１８３６、ｒｓ２６７５５１１、ｒｓ５１８２，血管紧张素原基因：ｒｓ１９２６７２２、ｒｓ７５３９０２０、ｒｓ３８８９７２８、ｒｓ４９３１３２、ｒｓ４７８５２３，亚甲基四氢叶酸还原酶基因：ｒｓ１８０１１３３、ｒｓ９６５１１１８、ｒｓ６５４１００３和肝脂肪酶基因：ｒｓ１２４６２６６８、ｒｓ１０４２６９７１，其特征在于检测方法包括下述步骤：　　（１）设计并合成用于扩增３２个单核苷酸多态性位点的序列１至序列９６引物，每个单核苷酸多态性设计３个引物，其中２个为ＰＣＲ扩增引物，用于扩增出含有目的单核苷酸多态性位点的片断；１个为延伸引物，用于单核苷酸多态性位点的测序及与玻璃芯片上的寡核苷酸链杂交；　　（２）稀释并混合ＰＣＲ引物，对目标ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增；　　（３）对扩增产物进行纯化；　　（４）稀释并混合延伸引物，进行延伸反应；　　（５）杂交；　　（６）对杂交板进行荧光扫描，根据荧光信号判断单核苷酸多态性位点的基因型。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：田亚平，张阳东，
申请(专利权)人：中国人民解放军总医院，
类型：发明
国别省市：11[中国|北京]