一种枇杷蜂蜜的检测鉴别方法技术

本发明专利技术涉及一种枇杷蜂蜜的检测鉴别方法，采用高效液相色谱结合指纹图谱方法以及高效液相色谱定量分析方法，检测鉴别枇杷蜂蜜，其中，高效液相色谱法结合指纹图谱指认出枇杷蜂蜜中同时含有茴香酸，绿原酸、异绿原酸、3

【技术实现步骤摘要】
一种枇杷蜂蜜的检测鉴别方法


[0001]本专利技术涉及食品检测
，具体涉及一种枇杷蜂蜜的检测鉴别方法。

技术介绍

[0002]枇杷，是蔷薇科苹果亚科枇杷属的常绿乔木植物，枇杷原产于中国四川、湖北一带，现分布于长江流域以南，多在低山丘陵及平原地区栽培，花期10
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12月，最适泌蜜温度为15～22℃，一个花期可产蜜10～20斤，丰产时每群蜂可产蜜30斤以上。枇杷蜜颜色为浅琥珀色，易结晶，结晶后多呈白色油脂状，并有独特的花香，蜜质细腻、甘甜上口。枇杷蜂蜜具有较高的营养价值，主要成分是葡萄糖和果糖，尚含少量蔗糖、蛋白质、维生素、有机酸、矿物质及酶类等活性物质，最具代表性的营养物质是单糖和活性物质，单糖能为人体补充大量的能量，而活性物质则是人体内多种生化反应的催化剂。同其它蜂蜜一样，枇杷蜜也具有润肠通便，润肺止咳，解毒、医疮、止痛，补中益气，调和诸药的作用。
[0003]因此，受经济利益驱使，枇杷蜜也存在掺假现象，严重扰乱了蜂蜜市场的正常秩序，制约了枇杷蜂蜜产业特色经济的发展。因此，建立一套鉴别枇杷蜂蜜真假的方法是亟待解决的技术问题。

技术实现思路

[0004]针对现有技术的问题，本专利技术的目的在于提供一种枇杷蜂蜜的检测鉴别方法。
[0005]为了实现该目的，本专利技术的技术方案如下：
[0006]本专利技术的第一方面，提供了一种枇杷蜂蜜的检测鉴别方法，采用高效液相色谱结合指纹图谱方法以及高效液相色谱定量分析方法，检测鉴别枇杷蜂蜜，
[0007]其中，所述高效液相色谱法结合指纹图谱指认出枇杷蜂蜜中含有茴香酸，其具有式(Ⅰ)所示的结构：
[0008][0009]进一步的，所述茴香酸的保留时间为51.94min；
[0010]进一步的，所述高效液相色谱法中，流动相A为浓度为0.18～0.22v/v％的乙酸水溶液，流动相B为浓度为0.18～0.22v/v％的乙酸甲醇溶液；更进一步优选的，所述高效液相色谱法中，流动相A为浓度为0.2v/v％的乙酸水溶液，流动相B为浓度为0.2v/v％的乙酸甲醇溶液；
[0011]进一步的，所述高效液相色谱法中，梯度洗脱程序为：
[0012]0～11min，流动相B由5v/v％上升至11v/v％；11～14min，流动相B由11v/v％上升至14v/v％；14～17min，流动相B由14v/v％上升至15v/v％；17～24min，流动相B由15v/v％
上升至16v/v％；24～28min，流动相B由16％上升至17％；28～30min，流动相B由17v/v％上升至22v/v％；30～38min，流动相B由22v/v％上升至25v/v％；38～41min，流动相B由25v/v％上升至30v/v％；41～46min，流动相B由30v/v％上升至33v/v％；46～55min，流动相B保持33％不变；55～60min，流动相B由33v/v％上升至34v/v％；60～70min，流动相B由34v/v％上升至36v/v％；70～80min，流动相B由36％上升至40％；80～90min，流动相B由40v/v％上升至45v/v％；90～100min，流动相B由45v/v％上升至52v/v％；100～110min，流动相B由52v/v％上升至57v/v％；110～120min，流动相B由57％上升至65％；120～130min，流动相B由65v/v％上升至70v/v％；130～135min，流动相B由70v/v％上升至80v/v％；流动相A随流动相B的体积变化而变化，两者体积加和为100％；流动相A随流动相B的体积变化而变化，两者体积加和为100％；
[0013]进一步的，所述高效液相色谱法中，包括以下色谱条件：
[0014]色谱柱为Phenomenex Gemini C
18
色谱柱，流速为0.6～0.8mL/min，进样量为10～30μL，柱温为34～36℃，检测波长为280nm；进一步优选的，所述进样量为20μL，所述流速为0.7mL/min，所述柱温为35℃；
[0015]进一步的，所述高效液相色谱法中，还包括前处理步骤：
[0016]S1:将待测蜂蜜与适量水混合后，使蜂蜜充分溶解获得蜂蜜水溶液液，调节所述蜂蜜水混合液pH值为6.5～7，然后以8800
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9200rpm的转速将其离心18～22min后，取上清液备用；
[0017]S2：采用Strata
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X
‑
A固相萃取柱提取S1获得的上清液，以甲醇活化固相萃取柱，然后采用超纯水平衡萃取柱，然后将所述上清液上样后，再以去离子水淋洗，之后采用含9～11v/v％甲酸的甲醇溶液洗脱，提取所述上清液中的活性成分获得洗脱液，然后将获得的洗脱液吹干，以适量甲醇复溶后，过滤获得，其中，所述甲醇、超纯水、去离子水以及含9～11v/v％甲酸的甲醇溶液的用量均为2～4倍量的柱体积；
[0018]进一步的，S1中，调节pH值为6.8，所述离心转速为9000rpm，所述离心时间为20min；
[0019]进一步的，S2中，所述过滤滤膜的孔径为0.22μm；
[0020]进一步的，S2中，所述洗脱剂含浓度为10v/v％甲酸的甲醇溶液；
[0021]进一步的，S2中，所述甲醇、超纯水、去离子水以及含9～11v/v％甲酸的甲醇溶液的用量均为3倍量的柱体积；
[0022]进一步的，所述高效液相色谱法结合指纹图谱指认出绿原酸、异绿原酸、3
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O
‑
对香豆酰基奎宁酸、5
‑
O
‑
阿魏酰奎宁酸、金丝桃苷(即槲皮素
‑3‑
O
‑
葡萄糖苷)、顺,顺,顺
‑
三
‑
对
‑
香豆酰亚精胺、顺,顺,反
‑
三
‑
对
‑
香豆酰亚精胺、顺,反,顺
‑
三
‑
对
‑
香豆酰亚精胺、反,反,反
‑
三
‑
对
‑
香豆酰亚精胺；
[0023]更进一步的，所述绿原酸的保留时间t
R
为22.21min、异绿原酸的保留时间t
R
为30.17min、3
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O
‑
对香豆酰基奎宁酸的保留时间t
R
为34.82min、5
‑
O
‑
阿魏酰奎宁酸的保留时间t
R
为40.53min、金丝桃苷(即槲皮素
‑3‑
O
‑
葡萄糖苷)的保留时间t
R
为59.59min、顺,顺,顺
‑
三
‑
对
‑
香豆酰亚精胺的保留时间t
R
为87.06min、顺,顺,反本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种枇杷蜂蜜的检测鉴别方法，其特征在于，采用高效液相色谱结合指纹图谱方法以及高效液相色谱定量分析方法，检测鉴别枇杷蜂蜜，其中，所述高效液相色谱法结合指纹图谱指认出枇杷蜂蜜中含有茴香酸，其具有式(Ⅰ)所示的结构：进一步的，所述茴香酸的保留时间为51.94in。2.根据权利要求1所述枇杷蜂蜜的检测鉴别方法，其特征在于，所述高效液相色谱法中，流动相A为浓度为0.18～0.22v/v％的乙酸水溶液，流动相B为浓度为0.18～0.22v/v％的乙酸甲醇溶液；更进一步优选的，所述高效液相色谱法中，流动相A为浓度为0.2v/v％的乙酸水溶液，流动相B为浓度为0.2v/v％的乙酸甲醇溶液。3.根据权利要求1所述枇杷蜂蜜的检测鉴别方法，其特征在于，所述高效液相色谱法中，梯度洗脱程序为：0～11min，流动相B由5v/v％上升至11v/v％；11～14min，流动相B由11v/v％上升至14v/v％；14～17min，流动相B由14v/v％上升至15v/v％；17～24min，流动相B由15v/v％上升至16v/v％；24～28min，流动相B由16％上升至17％；28～30min，流动相B由17v/v％上升至22v/v％；30～38min，流动相B由22v/v％上升至25v/v％；38～41min，流动相B由25v/v％上升至30v/v％；41～46min，流动相B由30v/v％上升至33v/v％；46～55min，流动相B保持33％不变；55～60min，流动相B由33v/v％上升至34v/v％；60～70min，流动相B由34v/v％上升至36v/v％；70～80min，流动相B由36％上升至40％；80～90min，流动相B由40v/v％上升至45v/v％；90～100min，流动相B由45v/v％上升至52v/v％；100～110min，流动相B由52v/v％上升至57v/v％；110～120min，流动相B由57％上升至65％；120～130min，流动相B由65v/v％上升至70v/v％；130～135min，流动相B由70v/v％上升至80v/v％；流动相A随流动相B的体积变化而变化，两者体积加和为100％；流动相A随流动相B的体积变化而变化，两者体积加和为100％。4.根据权利要求1、3或4所述枇杷蜂蜜的检测鉴别方法，其特征在于，所述高效液相色谱法中，包括以下色谱条件：色谱柱为Phenomenex Gemini C
18
色谱柱，流速为0.6～0.8mL/min，进样量为10～30μL，柱温为34～36℃，检测波长为280nm；进一步优选的，所述进样量为20μL，所述流速为0.7mL/min，所述柱温为35℃。5.根据权利要求1所述枇杷蜂蜜的检测鉴别方法，其特征在于，所述高效液相色谱法中，还包括前处理步骤：S1：将待测蜂蜜与适量水混合后，使蜂蜜充分溶解获得蜂蜜水溶液液，调节所述蜂蜜水混合液pH值为6.5～7，然后以8800
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9200rpm的转速将其离心18～22min后，取上清液备用；优选的，调节pH值为6.8，所述离心转速为9000rpm，所述离心时间为20min；S2：采用Strata
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X
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A固相萃取柱提取S1获得的上清液，以甲醇活化固相萃取柱，然后采
用超纯水平衡萃取柱，然后将所述上清液上样后，再以去离子水淋洗，之后采用含9～11v/v％甲酸的甲醇溶液洗脱，提取所述上清液中的活性成分获得洗脱液，然后将获得的洗脱液吹干，以适量甲醇复溶后，过滤获得，其中，所述甲醇、超纯水、去离子水以及含9～11v/v％甲酸的甲醇溶液的用量均为2～4倍量的柱体积；进一步的，S2中，所述过滤滤膜的孔径为0.22μm；进一步的，S2中，所述洗脱剂含浓度为10v/v％甲酸的甲醇溶液；进一步的，S2中，所述甲醇、超纯水、去离子水以及含9～11v/v％甲酸的甲醇溶液的用量均为3倍量的柱体积。6.根据权利要求1～5任一项所述枇杷蜂蜜的检测鉴别方法，其特征在于，所述高效液相色谱法结合指纹图谱指认出绿原酸、异绿原酸、3
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对香豆酰基奎宁酸、5
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O
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阿魏酰奎宁酸、金丝桃苷(即槲皮素
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O
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葡萄糖苷)、顺,顺,顺
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三
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对
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香豆酰亚精胺、顺,顺,反
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三
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对
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香豆酰亚精胺、顺,反,顺
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三
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对
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香豆酰亚精胺以及反,反,反
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三
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对
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香豆酰亚精胺。7.根据权利要求6所述枇杷蜂蜜的检测鉴别方法，其特征在于，所述绿原酸的保留时间t
R
为22.21min、异绿原酸的保留时间t
R
为30.17min、3
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O
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...

【专利技术属性】
技术研发人员：张红城，张勇，张羽，王海燕，乔江涛，王凯，杜欣悦，
申请(专利权)人：江苏蜂奥生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：