【技术实现步骤摘要】
一种利用源于患者的肿瘤样细胞簇(patient
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derived tumor
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like cell cluster，PTC)构建妇科恶性肿瘤细胞系的原代细胞培养方法
[0001]本专利技术涉及生物
，具体涉及一种妇科恶性肿瘤细胞系的原代细胞培养。
技术介绍
[0002]原代细胞培养是构建妇科恶性肿瘤细胞系的常用方法。原代细胞培养方法包括组织块培养法、消化培养法以及细胞培养法。组织块培养法，旨在将肿瘤组织分散成团块或碎片后置于涂有胶原薄层的培养皿中，直接处于恒温培养箱中培养，细胞从组织块爬出进行贴壁生长。然而，组织块培养法耗时较长，并且成纤维细胞由于较强的适应能力会早于肿瘤细胞游离出组织块，在组织周围环绕导致肿瘤细胞无法爬出，从而造成培养失败。消化培养法主要依赖于胶原酶(I/II)、透明质酸酶或胰蛋白酶等酶液对组织块进行消化培养。此外，通过酶解法获得的细胞粘连较少并且细胞膜完整，有利于传代培养的进行。然而，消化培养法不易去除悬浮液中除肿瘤细胞以外的杂质细胞，且由于酶消时间难以控制而导致...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种利用源于患者的肿瘤样细胞簇(patient
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derived tumor
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like cell cluster，PTC)构建妇科恶性肿瘤细胞系的原代细胞培养方法，其中，所述妇科恶性肿瘤细胞系培养方法仅包括利用PTC进行构建，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、收集源于妇科恶性肿瘤患者的可供实验标本，构建PTC模型；步骤二、基于PTC模型构建妇科恶性肿瘤细胞系；步骤三、鉴定所培养细胞系为上皮来源妇科恶性肿瘤细胞系。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤一中的妇科恶性肿瘤，包括但不限于卵巢癌、宫颈癌、子宫内膜癌、绒毛膜癌和其他恶性罕见妇科肿瘤；在所述步骤一中的可供实验标本，其特征在于，包括但不限于手术组织、穿刺组织或者胸腹水。3.根据权利要求1所述的PTC构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、利用物理剪切或酶消法，将源于妇科恶性肿瘤患者的实验标本分散形成单个细胞；步骤二、在妇科恶性肿瘤培养基中，上皮细胞、间质细胞、成纤维细胞、免疫细胞和肿瘤细胞自组装形成微球，获得PTC模型。4.根据权利要求1所述的鉴定培养的妇科恶性肿瘤细胞系，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、利用多聚甲醛固定妇科恶性肿瘤细胞；步骤二、利用苏木素对细胞核进行染色；步骤三、利用伊红对细胞质...
【专利技术属性】
技术研发人员：路威，张鑫鑫，孙志学，
申请(专利权)人：浙江基石精准医学有限公司，
类型：发明
国别省市：
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