检测抗FARP1自身抗体的试剂在制备检测神经系统自身免疫疾病的产品中的应用技术方案

本发明专利技术属于生物医药技术领域。本发明专利技术提供了检测抗FARP1自身抗体的试剂在制备检测神经系统自身免疫疾病的产品中的应用。本发明专利技术以患有神经系统疾病患者血清和健康人血清为实验材料，分别孵育大鼠脑组织切片，通过荧光二抗放大信号，并与神经元特异性Marker抗体共染的方式，发现相比健康人血清，患有本发明专利技术描述的神经系统自身免疫疾病的患者血清中存在自身抗体FARP1；并且验证目标抗原的真实性和特异性，表明FARP1蛋白在鼠脑组织、大鼠神经元中均表达且出现明显的染色信号，FARP1可作为神经系统自身免疫疾病相关自身抗体的识别抗原之一，可以实现神经系统自身免疫疾病的辅助诊断。断。断。

【技术实现步骤摘要】
检测抗FARP1自身抗体的试剂在制备检测神经系统自身免疫疾病的产品中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及检测抗FARP1自身抗体的试剂在制备检测神经系统自身免疫疾病的产品中的应用。

技术介绍

[0002]神经系统自身免疫疾病是人体免疫系统错误地攻击自身神经系统而造成神经系统组织结构和功能损伤的一类疾病。该类疾病损伤范围广泛，临床表现复杂多样，可以累及中枢神经系统、周围神经系统以及神经
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肌肉接头处，导致神经元或轴索损伤、髓鞘脱失、神经
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肌肉接头破坏等病理改变。常见的神经系统自身免疫性疾病包括：自身免疫性脑炎、中枢神经系统脱髓鞘疾病、僵人综合征、免疫介导性周围神经病、自身免疫性小脑共济失调、肌无力综合征等。
[0003]自身免疫性脑炎(autoimmune encephalitis，AE)泛指一类由自身免疫机制介导的脑炎，是机体免疫系统对神经元抗原成分产生异常免疫反应所致的中枢神经系统自身免疫疾病，包括抗细胞表面抗原抗体或抗突触蛋白抗体相关脑炎、副肿瘤边缘性脑炎、狼疮脑病、桥本脑病等其他系统性自身免疫疾病相关脑炎。自身免疫性脑炎一般为急性或亚急性起病(通常为3个月以内)的记忆减退、精神症状、人格变化、癫痫发作、意识障碍等，有时还会出现昏迷。炎症可能会持续很长时间，并且可能会出现慢性癫痫、认知功能障碍和心理症状。如患者出现以上症状，且不伴有发热等感染症状时，则应怀疑罹患自身免疫性脑炎。部分情况下，自身免疫性脑炎会伴有自主神经症状(循环系统症状、呼吸系统症状、腹部症状、感觉症状等)、肌张力障碍、脑部症状和肌强直。另外，研究人员已经指出了自身免疫性脑炎的发病与其他未知的抗神经元抗体的参与和副肿瘤有关。目前，虽然在自身免疫性脑炎患者中识别自身抗体介导的免疫机制方面取得了进展，但仍有一部分表现出脑炎症状的患者血清学检测结果为阴性，因此，寻找并鉴定新的脑炎自身抗体，提高现有的诊断和治疗水平，仍是一项艰巨的任务。
[0004]FARP1(FERM,ARH/RhoGEF andpleckstrindomainprotein 1)，又名：CDEP、GLCC1、PLEKHC2、PPP1R75或FARP1
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IT1，是一种多结构域蛋白，这些结构域存在于鸟嘌呤核苷酸交换因子和连接细胞骨架和细胞膜的蛋白质中。FARP1蛋白与Plexins和SynCAM 1等细胞表面蛋白相互作用，参与调节神经元发育，并与细胞内GTPase Rac1相互作用促进肌动蛋白组装、介导突触和树突发育，以及在树突丝状足的组装和拆卸、树突棘的形成、树突长度的调节和最终突触的形成中也起到重要作用。FARP1蛋白亚细胞定位于细胞膜(通过与CADM1相互作用被招募到细胞膜上)，胞质，突触，树突等部位，在发育过程中的大脑表达最多，在成人的睾丸、肾脏和肺等器官也有表达。研究发现，FARP1可通过整合素αvβ5信号通路增强CDC42的活性，并与进展期胃癌的不良预后相关；FARP1蛋白的缺失与早期丹佛模式的自闭症治疗缺乏反应相关。神经元是构成神经系统结构和功能的基本单位，由胞体和突起两部分组成，细胞体位于脑、脊髓和神经节中，突起分为树突和轴突，细胞突起可延伸至全身各
器官和组织中。突触是两个神经元之间或神经元与效应器细胞之间相互接触、并借以传递信息的部位。FARP1是一种突触支架蛋白，参与神经元可塑性，可能在促进神经系统疾病的临床治疗中发挥关键作用，目前，未曾有关于FARP1自身抗体在神经系统自身免疫疾病自身免疫系统疾病的相关报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的在于提供检测抗FARP1自身抗体的试剂在制备检测神经系统自身免疫疾病的产品中的应用，实现FARP1自身抗体的检测，用于神经系统自身免疫性疾病的诊断。
[0006]为了实现上述目的，本专利技术提供了检测抗FARP1自身抗体的试剂在制备检测神经系统自身免疫疾病的产品中的应用。
[0007]优选的，所述神经系统自身免疫疾病的症状包括头痛、记忆减退、精神障碍、人格变化、癫痫发作、意识障碍、运动障碍、睡眠障碍、认知功能障碍和心理障碍中的一种或多种。
[0008]优选的，所述神经系统自身免疫疾病包括自身免疫性脑炎。
[0009]优选的，所述检测抗FARP1自身抗体的试剂包括FARP1蛋白，或所述FARP1蛋白的同系物，或所述FARP1蛋白的衍生物，或能够表达所述FARP1蛋白的载体或细胞，或含所述FARP1蛋白的组织。
[0010]优选的，所述FARP1蛋白的氨基酸序列包括a)～c)中的任意一种：
[0011]a)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；
[0012]b)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的10％～80％，且具有识别FARP1自身抗体功能的氨基酸序列；
[0013]c)a)或b)中的氨基酸序列经修饰或突变后，且具有识别FARP1自身抗体功能的氨基酸序列。
[0014]优选的，编码所述FARP1蛋白的核苷酸序列包括Ⅰ)～Ⅲ)中的任意一种：
[0015]Ⅰ)SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列；
[0016]Ⅱ)SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的10％～80％，并且可编码识别FARP1自身抗体的氨基酸序列；
[0017]Ⅲ)Ⅰ)或Ⅱ)中的核苷酸序列突变后，并且可编码识别FARP1自身抗体的氨基酸序列。
[0018]优选的，所述产品包括试剂盒。
[0019]本专利技术还提供了一种检测抗FARP1自身抗体的试剂盒，包括上述技术方案所述应用中的检测抗FARP1自身抗体的试剂和标记抗体。
[0020]优选的，所述试剂盒还包括反应缓冲液、阳性对照、阴性对照和样品稀释液中的一种或多种。
[0021]有益效果：
[0022]用患有本专利技术描述的神经系统疾病的患者血清和健康人血清孵育大鼠脑组织切片，通过荧光二抗放大信号，并与神经元特异性Marker抗体共染的方式，发现相比健康人血清，患者血清中存在自身抗体FARP1，并且通过将患者血清与过表达目标抗原细胞爬片孵育
并对血清有效抗体成分进行回收的方式，制备含抗体洗脱液和对照洗脱液，孵育过表达细胞爬片、大鼠脑组织切片、大鼠脑组织原代细胞及过表达蛋白免疫印迹验证了目标抗原的真实性和特异性，表明FARP1蛋白在鼠脑组织、大鼠神经元中均表达且出现明显的信号，FARP1可作为神经系统自身免疫疾病相关自身抗体的识别抗原之一，抗FARP1自身抗体的试剂能够实现神经系统自身免疫疾病的辅助诊断。
附图说明
[0023]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍。
[0024]图1为患者1和正常血清在大鼠脑组织切片上的染色结果图；
[0025]图2为患者1血清和Neun抗体在大鼠脑组织切片上的共染结果图；
[0026]图3为患者1和正常血清在过表达细胞爬片上的染色结果图；
[0027本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测抗FARP1自身抗体的试剂在制备检测神经系统自身免疫疾病自的产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述神经系统自身免疫疾病的症状包括头痛、记忆减退、精神障碍、人格变化、癫痫发作、意识障碍、运动障碍、睡眠障碍、认知功能障碍和心理障碍中的一种或多种。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述神经系统自身免疫疾病包括自身免疫性脑炎。4.根据权利要求1～3任一项所述的应用，其特征在于，所述检测抗FARP1自身抗体的试剂包括FARP1蛋白，或所述FARP1蛋白的同系物，或所述FARP1蛋白的衍生物，或能够表达所述FARP1蛋白的载体或细胞，或含所述FARP1蛋白的组织。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述FARP1蛋白的氨基酸序列包括a)～c)中的任意一种：a)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；b)SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列的10％～80％...

【专利技术属性】
技术研发人员：李科，闫亚平，郭俊，王亚兰，柴单单，任妮，席倩，杨梓，王瑜，张哲玮，刘慧，范雪，刘瑞曼，
申请(专利权)人：陕西脉元生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：