抗人IL-4RA的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及一种抗人白介素4

【技术实现步骤摘要】
抗人IL
‑
4RA的抗体及其用途
[0001]本申请是中国申请号201911390315.0，申请日是2019年12月27日，专利技术名称为“抗人IL
‑
4RA的抗体及其用途”的分案申请。


[0002]本专利技术属于过敏性疾病治疗和分子免疫学领域，涉及一种抗人白介素4
‑
受体A的抗体、包含其的药物组合物或试剂盒，及其用途。

技术介绍

[0003]白介素
‑
4受体(interleukin
‑
4Recptor，IL
‑
4R)是一种跨膜受体，存在两种不同的形式：一种为I型IL
‑
4R，为高亲和力IL
‑
4Rα亚基(即本专利技术中的IL
‑
4RA)，和中度亲和力γC亚基组成，它结合白介素
‑
4(interleukin
‑
4，IL
‑
4)并介导IL
‑
4诱导的细胞增殖、活化等生物学功能作用；另一种为Ⅱ型IL
‑
4R，由高亲和力IL
‑
4Rα亚基(IL
‑
4RA)和白介素
‑
13受体α亚基(IL
‑
13Rα)组成，II型IL
‑
4R同时也是白介素
‑
13(interleukin
‑
13，IL
‑
13)的同源功能受体，可以结合ILr/>‑
13(Wang及Secombes，Cytokine.2015.75卷，1期，8
‑
13页(2015))。IL
‑
4R在T、B、造血干细胞及内皮细胞、上皮细胞、肌肉、纤维母细胞、肝细胞和脑组织中均有表达，IL
‑
4与受体结合后IL
‑
4RA与γC亚基或IL
‑
13Rα亚基共同作用激活胞质内多种非受体型蛋白质酪氨酸激酶，进一步启动下游信号转导途径(Nelms等人，Annu Rev Immunol，17卷，701
‑
738页(1999)；LaPorte等人，Cell，132卷，2期，259
‑
272页(2008))。
[0004]IL
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4RA可高亲和力的与IL
‑
4及IL
‑
13结合，是以上提及的I型及II型IL4R的主要功能性亚基，抑制IL
‑
4RA可有效阻断IL
‑
4及IL
‑
13所介导的相关生物学功能(Gessner等人，Immunobiology，201卷，285页(2000))。
[0005]IL
‑
4是由CD4+T细胞亚群、B细胞、肥大细胞等免疫细胞分泌的多效性细胞因子；IL
‑
13在人体主要由活化的T细胞(小鼠为Th2)产生，IL
‑
13对单核(巨噬细胞)、B淋巴细胞、NK细胞和血管内皮细胞等具有多种生物学作用。体外研究表明，IL
‑
4和IL
‑
13可在多种细胞类型中发挥相应的效应功能，例如T细胞、B细胞、嗜酸性粒细胞、肥大细胞、嗜碱性粒细胞、气道平滑肌细胞、呼吸道上皮细胞、成纤维细胞和内皮细胞，这些细胞是导致过敏性疾病，如变应性鼻炎、食物过敏等，和哮喘的发生的主要效应细胞(May等人，Cytokine，75卷，1期，89
‑
116页(2015))；此外，气道平滑肌细胞、呼吸道上皮细胞、成纤维细胞和内皮细胞等还参与慢性阻塞性肺疾病的疾病发生、进展和维持(有关综述参见Steinke等人，RespRes，2卷，：66期，66
‑
70页(2001)和Willis
‑
Karp等人，Immunol Rev，202卷，175
–
190页，(2004))；T、B细胞功能异常是自身免疫性疾病的发生主要机制，而IL
‑
4通过与免疫细胞表面IL
‑
4R结合激活下游信号通路参与自身免疫性疾病的发生(May等人，Cytokine，75卷，1期，89
‑
116页(2015))。
[0006]IL
‑
4/IL
‑
13途径在哮喘病理学(Chatila等人，Trendsin Molecular Med，10卷，10期，493
‑
499页，(2004))以及罗列于本文它处的其它病症中起着重要作用。气道高反应性、粘液分泌过多以及气道重塑等为哮喘的关键病理特征，研究证实IL
‑
4和IL
‑
13参与以上病
理过程的发生及维持(May等人，Cytokine，75卷，1期，89
‑
116页(2015))，IL
‑
13被认为是触发气道高反应性(AHR)关键细胞因子，IL
‑
4是Th2免疫细胞极化和IgE产生的主要诱发因素(Wynn等人，AnnuRev Immunol，21卷，425
‑
456页，(2003))。
[0007]特应性皮炎(atopic dermatitis)，尤其是中重度特应性皮炎，是一种严重的慢性炎症性皮肤病，主要表现为剧烈的瘙痒、明显的湿疹样变和皮肤干燥。特应性皮炎常常自婴幼儿发病，部分患者延续终生，可因慢性复发性湿疹样皮疹、严重瘙痒、睡眠缺失、饮食限制以及心理社会影响而严重影响患者的生活质量。IL
‑
4/IL
‑
13被认为是特异性皮炎持续内在炎症的关键驱动因素(Malajian等人，Cytokine，73卷，2期，311
–
318页(2015))。临床研究证实抗人IL
‑
4RA单抗Dupilumab可有效治疗中重度特异性皮炎(Beck等人，N.Engl.J.Med.，371卷，2期，130
–
139页(2014))，目前已被美国食品药品监督管理局FDA批准用于治疗中、重度特应性皮炎。
[0008]此外，基础医学研究及临床研究还证实IL
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4、IL
‑
13和IL
‑
4R通路参与慢性阻塞性肺疾病、鼻窦炎、肿瘤发生和发展，抑制IL
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4RA具有治疗慢性阻塞性肺疾病(金林等人，实用医学杂志，30卷，22期，3543
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3544页(2014年))、鼻窦炎、肺纤维化、肿瘤(May等人，Cytokine，75卷，1期，89
‑
116页(2015)；国畅廓等人，生命的化学，37卷，3期，413
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418页(2017))的潜力。抗人IL
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4RA单克隆抗体Dupilumab在应用于鼻本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.抗体或其抗原结合片段，特别地，所述抗体或其抗原结合片段结合IL4RA，优选人IL4RA，其中：所述抗体包含：HCDR1，其包含SEQ ID NO:130所示的序列，与所述序列具有至少90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成，HCDR2，其包含SEQ ID NO:131所示的序列，与所述序列具有至少90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成，和HCDR3，其包含SEQ ID NO:132所示的序列，与所述序列具有至少90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成，并且，所述抗体还包含：LCDR1，其包含SEQ ID NO:133所示的序列，与所述序列具有至少90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成，LCDR2，其包含SEQ ID NO:134所示的序列，与所述序列具有至少90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成，和LCDR3，其包含SEQ ID NO:135所示的序列，与所述序列具有至少90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与所述序列相比具有一个或多个(优选2个或3个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，或由其组成。2.权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包括：(i)重链可变区，其包含下述序列或由下述序列组成：SEQ ID NO:127所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:127所示的序列具有至少80％、85％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与SEQ ID NO:127所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列，和(ii)轻链可变区，其包含下述序列或由下述序列组成：SEQ ID NO:129所示的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:129所示的序列具有至少80％、85％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或
与SEQ ID NO:129所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列。3.权利要求1
‑
2任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体还包含重链可变区的框架区FR
‑
H1，FR
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H2，FR
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H3和FR
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H4，和轻链可变区的框架区FR
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L1，FR
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L2，FR
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L3和FR
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L4，其中FR
‑
H1包含SEQ ID NO:136的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:136所示的序列具有至少80％、85％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与SEQ ID NO:136所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成；FR
‑
H2包含SEQ ID NO:137的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:137所示的序列具有至少80％、85％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与SEQ ID NO:137所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成；FR
‑
H3包含SEQ ID NO:138的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:138所示的序列具有至少80％、85％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与SEQ ID NO:138所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成；FR
‑
H4包含SEQ ID NO:139的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:139所示的序列具有至少80％、85％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与SEQ ID NO:139所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成，和FR
‑
L1包含SEQ ID NO:140的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:140所示的序列具有至少80％、85％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与SEQ ID NO:140所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成；FR
‑
L2包含SEQ ID NO:141的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:141所示的序列具有至少80％、85％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与SEQ ID NO:141所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成；FR
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L3包含SEQ ID NO:142的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:142所示的序列具有至少80％、85％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与SEQ ID NO:142所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成；FR
‑
L4包含SEQ ID NO:143的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:143所示的序列具有至少80％、85％、90％，优选至少91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％序列同一性的序列，或与SEQ ID NO:143所示的氨基酸序列相比具有一个或多个(优选1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个)保守氨基酸突变(优选置换，插入或缺失)的氨基酸序列或由其组成。4.权利要求1
‑
3任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体以小于大约10
‑5M，例如小于大约10
‑6M、10
‑7M、10
‑8M、10
‑9M或10
‑
10
M或更小的K
D
结合人IL
‑
4RA蛋白。
5.权利要求1
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4任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体以小于大约100nM，例如小于大约10nM、1nM、0.9nM、0.8nM、0.7nM、0.6nM、0.5nM、0.4nM、0.3nM、0.2nM、0.1nM或更小的EC50结合人IL
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4RA蛋白。6.权利要求1
‑
5任一项所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体是人源化抗体、嵌合抗体或多特异性抗体(例如双特异性抗体)。7.权利要求6所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体的恒定区是人源化的，优选来自人IgG，更优选IgG4。8.权利要求7所述的抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体的重链恒定区采用Ig gamma
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4链C区，更优选GenBank登记号为ACCESSION：P01861.1的Ig...

【专利技术属性】
技术研发人员：李百勇，夏瑜，王忠民，张鹏，
申请(专利权)人：中山康方生物医药有限公司，
类型：发明
国别省市：