针对CD112R的抗体及其用途制造技术

本发明专利技术提供了以高亲和力和特异性识别人类CD112R并抑制其与连接蛋白

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】针对CD112R的抗体及其用途
专利

[0001]本专利技术属于免疫治疗领域，并且涉及与人类蛋白CD112R(PVRIG)结合的抗体及其片段、编码这些抗体的多核苷酸序列以及产生它们的细胞。还包括了包含这些抗体的药物组合物及其用途。
[0002]专利技术背景
[0003]癌症免疫治疗用于产生和增强抗肿瘤免疫应答，例如通过用对肿瘤细胞上的抗原特异的抗体治疗，通过嵌合抗原受体T细胞(CAR
‑
T)，或通过抗肿瘤细胞的特异性激活。在患者中针对肿瘤细胞募集免疫细胞(例如，T细胞或NK细胞)的能力提供了对抗本来被认为是不可治愈的肿瘤及其转移的治疗模式。
[0004]T细胞介导的免疫应答包括由共刺激和共抑制信号调节的多于一个连续步骤，产生控制免疫应答的幅度及其结果的净效应。被称为免疫检查点的抑制信号对于维持自身耐受性和限制免疫介导的侧副组织损伤至关重要。
[0005]免疫检查点蛋白的表达被肿瘤改变。例如，癌细胞表面上程序性死亡配体1(PD
‑
L1)的上调允许它们与T细胞上表达的检查点分子PD
‑
1结合。这导致T细胞的抑制(否则T细胞可能攻击肿瘤细胞)，并且从而允许癌细胞逃避宿主免疫系统。因此，免疫检查点代表了抗癌功能性细胞免疫激活的重要障碍。因此，对T细胞上的抑制性配体(例如，PD
‑
1)特异的拮抗性抗体是正在用于癌症治疗的针对免疫检查点抑制剂(ICI)的靶向剂的实例(例如，纳武单抗(Nivolumab)、派姆单抗(Pembrolizumab))。免疫检查点分子的另一个实例是具有Ig和ITIM结构域的T细胞免疫受体(TIGIT)。TIGIT是一种在各种免疫细胞，包括T细胞和自然杀伤细胞(NK细胞)上表达的共抑制性分子。TIGIT以高亲和力与脊髓灰质炎病毒受体(PVR、CD155)结合，并且以低亲和力与连接蛋白
‑
2(CD112)结合，两者都由各种癌细胞表达。
[0006]CD112R，也称为PVRIG，以高亲和力与连接蛋白
‑
2结合。在与CD112R和/或TIGIT相互作用后，连接蛋白
‑
2抑制T细胞增殖。重要的是，在与CD226(DNAM
‑
1)结合后，连接蛋白
‑
2也可以用作T细胞功能的共刺激物。这种相互作用刺激T细胞增殖和细胞因子的产生，诸如IL
‑
2和IFNγ。这些矛盾的相互作用是竞争性的，并且它们的净效应影响由此产生的抗癌免疫应答。
[0007]WO2019232484公开了抗PVRIG、抗TIGIT和抗PVRIG/抗TIGIT双特异性抗体，以及组合物和使用这些抗体治疗癌症的方法。
[0008]WO2018017864公开了特异性结合PVRIG的剂和双特异性剂，包括抗体。WO2018017864还公开了使用这些剂增强免疫应答和/或治疗疾病诸如癌症的方法。
[0009]WO2016134333公开了抗PVRIG抗体及使用其的方法。
[0010]对单独或与其他剂组合可以增强免疫系统的细胞以攻击肿瘤或病毒感染的细胞的另外的和更有效的、特异性的、安全的和稳定的剂存在未满足的需求。抑制CD112R与连接蛋白
‑
2结合的单克隆抗体(mAb)可以是这样的剂。
[0011]专利技术概述
[0012]本专利技术提供了识别CD112R(PVRIG)、结合它、阻止它与连接蛋白
‑
2(CD112)结合并
抑制由所述结合产生的对淋巴细胞诸如自然杀伤(NK)细胞和T细胞的抑制活性的抗体及其片段。这些抗体及其片段的特征在于具有独特的CDR序列组、高亲和力和对人类CD112R的高特异性，并且可作为独立治疗或与其他抗癌剂组合用于对抗肿瘤免疫逃避的癌症免疫治疗。本文公开的抗体还可用于治疗病毒感染，并可用于检测测定和癌症诊断。
[0013]现在公开了，本文描述的高亲和力抗CD112R单克隆抗体(mAb)阻断CD112R
‑
连接蛋白
‑
2相互作用，并随后恢复T细胞和NK细胞活性。这些特性使得本专利技术的mAb成为用于抗癌免疫治疗的有价值的候选物，能够以较低的剂量施用且副作用较少。
[0014]发现本文描述的抗CD112R mAb诱导T细胞激活，类似于由抗PD
‑
1、抗TIGIT和抗PVR mAb诱导的T细胞激活。此外，一些本文描述的抗CD112R mAb与其他免疫调节剂(包括抗PD
‑
1、抗TIGIT或抗PVR mAb)的组合导致抗癌活性显著增加，超过了由每种单独mAb诱导的活性水平。本文公开的CD112R mAb能够在存在靶癌细胞的情况下诱导NK细胞激活，并与抗TIGIT和抗PVR mAb协同激活NK细胞。还公开了，发现本文描述的抗体对人类和食蟹猴CD112R具有高度特异性，但对啮齿动物CD112R不是。根据一些实施方案，还公开了，抗CD112R mAb阻断CD112R与其配体连接蛋白
‑
2的相互作用，并增加免疫细胞的激活。
[0015]出乎意料的是，发现本专利技术的抗CD112R mAb的人源化形式与亲本鼠mAb相比具有改进的结合和生产率特性。此外，人源化的mAb变体与食蟹猴CD112R具有交叉反应性，这使得能够在猴中进行进一步的研究。本文描述的抗体比已知的抗CD112R抗体具有独特的特性和改进的效力。
[0016]令人惊讶和有利的是，分别被引入以去除脱酰胺和N
‑
糖基化基序的轻链的互补决定区1(CDR1)和重链的CDR1中的特定突变，保留了对人类CD112R的亲和力。
[0017]根据一个方面，本专利技术提供了一种抗体或其抗体片段，所述抗体片段包含至少抗原结合部分，所述抗体或其片段特异性结合人类CD112R，对人类CD112R具有至少0.5x10
‑9M的亲和力。
[0018]根据一些实施方案，抗体特异性结合人类CD112R并抑制其与其配体人类连接蛋白
‑
2(CD112)的结合。
[0019]根据一些实施方案，抗体或抗体片段包含一组六个CDR序列，所述CDR序列选自由以下组成的组：
[0020]i.包含SEQ ID NO:17的重链(HC)可变区的三个CDR和包含SEQ ID NO:19的轻链(LC)可变区的三个CDR，或与所述抗体或片段序列具有至少90％序列同一性的其类似物或衍生物；以及
[0021]ii.包含SEQ ID NO:21的重链可变区的三个CDR和包含SEQ ID NO:23的轻链可变区的三个CDR，或与所述抗体或片段序列具有至少90％序列同一性的其类似物或衍生物。
[0022]现有技术中有几种已知的方法用于确定给定抗体分子的CDR序列，但没有标准的明确方法。从抗体重链和轻链可变区确定CDR序列可以根据本领域已知的任何方法进行，包括但不限于称为KABAT、Chothia和IMGT的方法。选定的CDR组本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种抗体或其抗体片段，所述抗体结合CD112R，所述抗体片段包含至少抗原结合部分，其中所述抗体或抗体片段包含：(i)包含SEQ ID NO:16的重链(HC)可变区的三个互补决定区(CDR)和包含SEQ ID NO:18的轻链(LC)可变区的三个CDR，或与所述抗体或片段序列具有至少90％序列同一性的其类似物或衍生物；或(ii)包含SEQ ID NO:21的重链可变区的三个CDR和包含SEQ ID NO:23的轻链可变区的三个CDR，或与所述抗体或片段序列具有至少90％序列同一性的其类似物或衍生物。2.根据权利要求1所述的抗体或抗体片段，包含一组六个CDR，其中：重链CDR1序列包含序列GYX1FX2SY(SEQ ID NO:1)或序列SYWIN(SEQ ID NO:7)，其中X1表示N、D、A、Q、S或T，并且X2是T或A，重链CDR2包含序列YPGSYIP(SEQ ID NO:2)，重链CDR3包含序列GYFDV(SEQ ID NO:3)，轻链CDR1包含序列KSSQSLLXSGNQKNYLA(SEQ ID NO:4)，其中X表示N或S，轻链CDR2包含序列GASTRES(SEQ ID NO:5)，并且轻链CDR3包含序列QNDHSYPYT(SEQ ID NO:6)。3.根据权利要求1或2中任一项所述的抗体或抗体片段，包含选自SEQ ID NO:28和SEQ ID NO:21的重链可变区，或与所述重链可变区序列具有至少95％序列相似性的类似物。4.根据权利要求1至3中任一项所述的抗体或抗体片段，包含选自SEQ ID NO:26和SEQ ID NO:23的轻链可变区序列，或与所述轻链可变区序列具有至少95％序列相似性的类似物。5.根据权利要求1至4中任一项所述的抗体或抗体片段，包含重链和轻链，其中所述重链包含SEQ ID NO:28并且所述轻链包含SEQ ID NO:26。6.根据权利要求1至4中任一项所述的抗体或抗体片段，包含重链和轻链，其中所述重链包含SEQ ID NO:21并且所述轻链包含SEQ ID NO:23。7.根据权利要求5或6中任一项所述的抗体或抗体片段的变体，与所述抗体轻链或重链具有至少95％同一性。8.根据权利要求1至7中任一项所述的抗体片段，其中所述抗体片段是单链Fv(scFv)。9.一种多肽，包含根据权利要求8所述的scFv和人类IgG1 Fc区，其中所述多肽序列包含选自由SEQ ID NO:43至54组成的组的序列，或与所述抗体具有至少90％序列同一性的其类似物或衍生物。10.根据权利要求1至9中任一项所述的抗体或抗体片段，其中所述抗体以0.5x10
‑9M至10
‑
11
M的亲和力与人类CD112R结合。11.根据权利要求1至10中任一项所述的抗体或抗体片段，其中所述抗体包含hIgG1的Fc。12.根据权利要求1至11中任一项所述的抗体或抗体片段，其中所述抗体是人源化抗体。13.根据权利要求12所述的抗体或抗体片段，其中重链CDR1是GYTFTSY(SEQ ID NO:13)或SYWIN(SEQ ID NO:7)。14.根据权利要求12或13中任一项所述的抗体或抗体片段，其中轻链CDR1是KSSQSLLSSGNQKNYLA(SEQ ID NO:15)。15.根据前述权利要求中任一项所述的抗体或抗体片段，包含一组六个CDR，其中：重链CDR1序列包含序列GYTFTSY(SEQ ID NO:13)，重链CDR2包含序列YPGSYIP(SEQ ID NO:2)，重
链CDR3包含序列GYFDV(SEQ ID NO:3)，轻链CDR1包含序列KSSQSLLSSGNQKNYLA(SEQ ID NO:15)，轻链CDR2包含序列GASTRES(SEQ ID NO:5)，并且轻链CDR3包含序列QNDHSYPYT(SEQ ID NO:6)。16.根据权利要求12至15中任一项所述的抗体或抗体...

【专利技术属性】
技术研发人员：皮恩卡斯，
申请(专利权)人：里耶卡大学医学院耶路撒冷希伯来大学伊森姆研究发展有限公司，
类型：发明
国别省市：