本发明专利技术提供了一种诊断受试者中的卵巢癌的方法，包括：检测来自受试者的样本中的ＡＮＧＰＴＬ３含量，对所述ＡＮＧＰＴＬ３含量进行分析，和根据分析结果确定所述受试者是否患有卵巢癌。本发明专利技术还提供了用于卵巢癌诊断的试剂盒。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于生物医学
具体地说，本专利技术涉及一种提高样本分类准确性 的方法、以及一种用于检测样本中ANGPTL3蛋白的试剂盒。
技术介绍
上皮性卵巢癌(印ithelial ovarian cancer，E0C)在所有女性癌症死亡原因 中排名第五位。在我国卵巢恶性肿瘤的发病率在女性常见恶性肿瘤中所占的百分率为 2.4-5.6%。其发病在妇科恶性肿瘤中仅次于宫颈癌，居第二位。近年来其发病呈上升趋 势。在妇女生殖道癌瘤中，卵巢癌是造成死亡原因最高的一种肿瘤。美国癌症学会预计美 国2008年将会新增21650个卵巢癌病例，同时大约有15520例病患将死于该疾病(ymi cancer, org)。E0C的高死亡率都是发生在起始阶段，因为大部分妇女在诊断时已是晚期 (stage III/IV)，其中15-20%的病人有5年的存活率(1)。相比较而言，被准确诊断为 stage I的小部分病人，超过90%有5年的存活率(2)。当前E0C检测的候选策略是建立 在生物化学肿瘤标志物的基础之上，例如CA125和通过超声或者卵巢的多普勒显像得到的 生物物理标记物。不幸的是，利用这些策略进行早期E0C检测的阳性预测值(PPV) —致性 小于 10% (3，4)。通过利用 CA125 复杂算法(complex longitudinal algorithms) (5-7)、 串联测试(sequential testing) (8,9)和全新生物标记物(10)的应用，在对上皮性卵巢癌 (E0C)早期诊断中得到了一定的提高。所以，现在仍非常需要继续发展新的血液循环系统中 的生物标志物对卵巢癌进行早期诊断。
技术实现思路
本专利技术部分地基于以下发现卵巢癌患者血清中的ANGPTL3含量明显低于健康受 试者血清中的ANGPTL3含量，并且具有统计学显著性，可用作卵巢癌的诊断标志物。因此，本专利技术提供了以下实施方案。一种诊断受试者中的卵巢癌的方法，包括检测来自受试者的样本中的ANGPTL3含量，对所述ANGPTL3含量进行分析，和根据分析结果确定所述受试者是否患有卵巢癌。—种提高样本分类准确性的方法，包括检测所述样本中的ANGPTL3含量， 对所述ANGPTL3含量进行分析，和根据所述分析结果，对样本进行分类。—种对受试者的卵巢癌进行诊断、预后评估、治疗效果监测或病程 监测的方法，包括检测受试者血液样本中ANGPTL3的表达。实施方案1-3之任一项的方法，其中所述样本选自由尿液、脑脊液、 唾液和眼泪所构成的组。实施方案1-3之任一项的方法，其中所述样本为血液样本。实施方案1-3之任一项的方法，其中所述样本为血清样本。实施方案1-6之任一项的方法，其中所述检测采用ELISA或定量 Western blot 进行。实施方案1-7之任一项的方法，其中所述检测采用ANGPTL3的特异 结合剂进行。实施方案8的方法，其中所述ANGPTL3的特异结合剂为ANGPTL3的 抗体或其ANGPTL3结合片段。实施方案8的方法，其中所述ANGPTL3的抗体为单克隆抗体。实施方案8的方法，其中所述ANGPTL3的抗体为多克隆抗体。实施方案1-11之任一项的方法，其中所述分析包括绘制R0C曲线， 其中以ANGPTL3为变量，根据不同的阈值绘制出R0C曲线，并计算曲线下面积AUC，并且按照 期望的灵敏度和特异性进行判断。实施方案1-11之任一项的方法，其中所述分析包括将所述 ANGPTL3含量与来自健康受试者的参比值进行比较，如果明显低于所述参比值则确定所述 受试者患有卵巢癌。用于实施实施方案1-13之任一项的方法的试剂盒，其包含 ANGPTL3的特异结合剂。实施方案14的试剂盒，还包含能够结合ANGPTL3的标记抗体。实施方案14-15之任一项的试剂盒，其中所述ANGPTL3的特异结合 剂为ANGPTL3的抗体或其ANGPTL3结合片段。实施方案16的试剂盒，其中所述ANGPTL3的抗体为单克隆抗体。实施方案16的试剂盒，其中所述ANGPTL3的抗体为多克隆抗体。实施方案15-18之任一项的试剂盒，其中所述标记抗体被辣根过氧 化物酶或者荧光标记。实施方案14-19之任一项的试剂盒，还包含 包含已知量ANGPTL3溶液的标准样；以及用于检测的抗体标记物，其可以与抗体结合形成偶联物。实施方案20的试剂盒，其中所述抗体标记物为辣根过氧化物酶或 者荧光物质。实施方案14-21之任一项的试剂盒，还包含任选的抗体偶联物(antibodyconjugates)；任选的选自由显色剂、酶抑制剂、缓冲液、稳定剂、稀释剂、洗涤试剂构成的组的辅 助试剂；和任选的说明书。实施方案14-22之任一项的试剂盒，其中所述ANGPTL3的特异结合 剂被固定于固相载体上。ANGPTL3的特异结合剂在制备用于诊断卵巢癌的试剂中的用途。实施方案24的用途，其中所述ANGPTL3的特异结合剂为ANGPTL35的抗体或其ANGPTL3结合片段。实施方案25的用途，其中所述ANGPTL3的抗体为单克隆抗体。实施方案25的用途，其中所述ANGPTL3的抗体为多克隆抗体。ANGPTL3作为卵巢癌诊断标志物的用途。—种提高样本分类准确性的方法，其包括测定样本中ANGPTL3的含量，和ANGPTL3的含量在时间上的变化；以ANGPTL3含量在时间上的变化为变量，根据不同的阈值对癌症诊断的灵敏度和 特异性绘制出R0C曲线，并计算曲线下面积AUC ；按照AUC值、灵敏度和特异性对样本进行分类。—种提高样本分类准确性的方法，其包括测定样本中ANGPTL3和任一在卵巢癌中高表达蛋白的含量，以及它们各自的含量 在时间上的变化；以ANGPTL3和该高表达蛋白含量的比值在时间上的变化为变量，根据不同的阈值 对癌症诊断的灵敏度和特异性绘制出R0C曲线，并计算曲线下面积AUC ；按照AUC值、灵敏度和特异性对样本进行分类。研究表明，采用本专利技术的方法及试剂盒对个体的样本中蛋白ANGPTL3进行联合检 测，可以有效提高癌症诊断的灵敏度、特异性和准确率，并且可以推广至许多疾病的诊断、 预后评估、治疗效果评估及病程监测。附图说明图1是一幅柱状图，显示了在健康志愿者血清(m-N10)和卵巢癌患者血清样品 (C1-C10)中ANGPTL3的表达水平的比较，T-检验具有统计学显著性(T_test，P = 0. 0009， tail l,type 3)。横坐标为样品ID (C =癌症，N =正常)；纵坐标为浓度，单位为纳克每毫 升(柱形图加标准误差的error bar)；标题为人血管生成素样蛋白3 (卵巢癌vs正常血清)。具体实施例方式术语本文所用的术语“ANGPTL3”是指血管生成素样蛋白3 (angiopoietin-like protein 3，简称ANGPTL3)，其含义是本领域公知的。ANGPTL3是分泌蛋白的血管生成素样 家族的成员(11)。它具有血管生成素的特征性结构，包括信号肽、N-末端无规卷曲结构域 以及C-末端纤维蛋白原(FBN)-样结构域。ANGPTL3可能在血管生成的调节中发挥作用 (11)。ANGPTL3是脂类代谢的调节物(12)，但是它在癌症中的作用还没有被研究。本文中使用的术语“受试者”，指任意哺乳动物，例本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种诊断受试者中的卵巢癌的方法，包括：检测来自受试者的样本中的ＡＮＧＰＴＬ３含量，对所述ＡＮＧＰＴＬ３含量进行分析，和根据分析结果确定所述受试者是否患有卵巢癌。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：林标扬，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：86[中国|杭州]
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。