用于CNS或肌肉递送的重组腺相关病毒制造技术

本发明专利技术涉及具有衣壳蛋白的重组腺相关病毒(rAAV)，所述衣壳蛋白被工程化为包含赋予和/或增强所需性质，特别是相对于具有参考衣壳的rAAV在CNS或肌肉细胞中增加的转导的氨基酸序列和/或氨基酸取代。酸序列和/或氨基酸取代。酸序列和/或氨基酸取代。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于CNS或肌肉递送的重组腺相关病毒
1.

[0001]本专利技术涉及具有衣壳蛋白的重组腺相关病毒(rAAV)，所述衣壳蛋白具有赋予和/或增强所需性质(包括组织嗜性)的一个或多个氨基酸取代和/或肽插入。特别地，本专利技术提供工程化的衣壳蛋白，所述工程化的衣壳蛋白包含增强AAV血清型对一种或多种组织类型的嗜性的一个或多个氨基酸取代或肽插入，以及未经工程化但被发现对rAAV赋予肌肉或CNS嗜性的衣壳。特别地，AAV衣壳中的一个或多个氨基酸取代和/或插入改善心脏和/或肌肉组织或中枢神经系统中的转导、基因组整合和/或转基因表达，同时降低对肝脏和/或背根神经节和/或周围神经细胞的嗜性。具有本文公开的衣壳蛋白的rAAV可用于递送编码用于治疗CNS或肌肉疾病的治疗性蛋白质的转基因。
2.
技术介绍

[0002]使用腺相关病毒(AAV)作为基因递送载体是用于处理许多未满足的患者需求的有前景的途径。已经报道了数十种天然存在的AAV衣壳，并且挖掘灵长类动物组织中AAV序列的自然多样性已经鉴定了超过一百种分布在进化枝中的变体。AAV属于细小病毒家族并且是单链DNA病毒，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种重组AAV衣壳蛋白，其相对于野生型或未工程化的衣壳蛋白包含一个或多个氨基酸取代，其中所述rAAV衣壳蛋白是具有S263G/S269R/A273T取代、G266A取代、N272A取代、W503R取代、Q474A取代、496
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498取代的AAV9衣壳蛋白(SEQ ID NO：67)，在Q588与A589之间、S268与S269之间或S454与G455之间具有肽TLAAPFK(SEQ ID NO：1)的插入，或者是具有A269S取代或498
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500取代或另一种AAV型衣壳的衣壳蛋白中的相应取代或肽插入的AAV8衣壳(SEQ ID NO：6)。2.如权利要求1所述的重组AAV衣壳蛋白，其还包含AAV8衣壳蛋白(SEQ ID NO：66)的498
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500氨基酸取代或AAV9衣壳蛋白(SEQ ID NO：67)的496
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498氨基酸取代，或另一种AAV型衣壳的衣壳蛋白中的相应取代。3.如权利要求1或2所述的重组AAV衣壳蛋白，其是AAV8.BBB.LD衣壳(SEQ ID NO：27)、AAV9.BBB.LD衣壳(SEQ ID NO：29)、AAV9.496
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498衣壳(SEQ ID NO：31)、AAV9.496
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498衣壳(SEQ ID NO：32)、AAV9.W503R衣壳(SEQ ID NO：33)、AAV9.Q474A衣壳(SEQ ID NO：34)、AAV9.N272A.496
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498衣壳(SEQ ID NO：91)或AAV9.N266A.496
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498衣壳(SEQ ID NO：92)。4.如权利要求1至3所述的重组AAV衣壳蛋白，其中所述氨基酸取代或插入位于AAV9衣壳，包括AABPHP.eB衣壳、蛋白质或AAV8衣壳中。5.如权利要求1或2所述的重组AAV衣壳蛋白，其中所述AAV型衣壳是AAV rh.34、AAV4、AAV5、AAV hu.26、AAV rh.31、AAV hu.13、AAV hu.26、AAV hu.56、AAV hu.53、AAV7、AAV rh.10、AAV rh.64.R1、AAV rh.46或AAV rh.73。6.如权利要求1至5中任一项所述的重组AAV衣壳蛋白，当所述重组AAV衣壳蛋白并入rAAV载体中时，所述rAAV载体相对于并入没有所述氨基酸取代或肽插入的相应野生型衣壳蛋白的rAAV载体具有增加的靶向、转导或基因组整合到CNS细胞中。7.如权利要求6所述的重组衣壳蛋白，当所述重组衣壳蛋白并入rAAV载体中时，所述rAAV载体相对于并入没有所述氨基酸取代或肽插入的相应野生型衣壳蛋白的rAAV载体具有减少的靶向、转导或基因组整合到肝细胞中。8.如权利要求6或7所述的重组衣壳蛋白，当所述重组衣壳蛋白并入rAAV载体中时，所述rAAV载体相对于并入没有所述氨基酸取代或肽插入的相应衣壳蛋白的rAAV载体具有减少的靶向、转导或基因组整合到背根神经节细胞中。9.如权利要求6至8中任一项所述的重组衣壳蛋白，当所述重组衣壳蛋白并入rAAV载体中时，所述rAAV载体相对于并入没有所述氨基酸取代或肽插入的相应衣壳蛋白的rAAV载体具有减少的靶向、转导或基因组整合到周围神经细胞中。10.如权利要求1至5中任一项所述的重组AAV衣壳蛋白，当所述重组衣壳蛋白并入rAAV载体中时，所述rAAV载体相对于并入没有所述氨基酸取代或肽插入的相应衣壳蛋白的rAAV载体具有增加的靶向、转导或基因组整合到骨骼肌和/或心肌细胞中。11.如权利要求10所述的重组衣壳蛋白，当所述重组衣壳蛋白并入rAAV载体中时，所述rAAV载体相对于并入没有所述氨基酸取代或肽插入的相应衣壳蛋白的rAAV载体具有减少的靶向、转导或基因组整合到肝细胞中。12.如权利要求10或11所述的重组衣壳蛋白，当所述重组衣壳蛋白并入rAAV载体中时，所述rAAV载体相对于并入没有所述氨基酸取代或肽插入的相应衣壳蛋白的rAAV载体具有
减少的靶向、转导或基因组整合到CNS细胞中。13.如权利要求1...

【专利技术属性】
技术研发人员：O，
申请(专利权)人：再生生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：