EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂在制备糖尿病肾病尿液筛查试剂盒中的用途制造技术

本发明专利技术涉及生物科学领域，具体涉及EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂在制备糖尿病肾病筛查试剂盒中的用途。本发明专利技术首次发现机体EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值与糖尿病肾病具有相关性，将EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂用于制备糖尿病肾病尿液筛查试剂盒，能够实现糖尿病肾病的有效筛查。能够实现糖尿病肾病的有效筛查。能够实现糖尿病肾病的有效筛查。

【技术实现步骤摘要】
EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂在制备糖尿病肾病尿液筛查试剂盒中的用途


[0001]本专利技术属于生物科学领域，具体涉及一种EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂在制备糖尿病肾病尿液筛查试剂盒中的用途。

技术介绍

[0002]糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)作为糖尿病(diabetes mellitus，DM)最常见的微血管并发症，有着20％到40％的几率，随着其病程的进展，大多数DM患者最后都会发展成为终末期肾病(end
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stage renal disease，ESRD)。DN以进行性蛋白尿、肾小球滤过率(glomerular filtration rate，GFR)降低、高血压和更高升高的心血管发病率和死亡率为特征。DN的患病率、住院率和死亡率随着DM的发病率的增长而随着增长，对社会造成了巨大的经济需求。
[0003]目前糖尿病肾病确诊标准通常是根据肾小球滤过率出现下降或者白蛋白/肌酐比值出现增高，并同时排除其他慢性肾脏病的情况下可做出诊断，这些检测均需要通过有创的抽血检测来确定。目前通过尿液检测这种无创的方式直接检测糖尿病肾病相关的生物标记物水平来辅助预测，或评估糖尿病肾病肾脏功能损伤的有效方法还相对不足，需要不断的探索和开发。
[0004]EDA2R基因位于人类染色体Xq12，全长约43kb，有6个外显子(GenBank登录号：NG_013271)，最新研究EDA2R在肌肉萎缩期间被诱导上调。
[0005]但目前尚未见尿液中EDA2R蛋白与糖尿病肾病相关的技术报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂在制备糖尿病肾病尿液筛查试剂盒中的用途。
[0007]本专利技术提供了一种检测EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂在制备糖尿病肾病筛查试剂盒中的用途。
[0008]所述检测EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂是检测EDA2R蛋白表达水平的试剂和检测肌酐水平的试剂。
[0009]所述检测EDA2R蛋白表达水平的试剂、检测肌酐水平的试剂分别为如下试剂中的任意一种：酶联免疫吸附实验用试剂、免疫印迹用试剂、免疫电泳用试剂、组织免疫染色用试剂、免疫沉淀分析法用试剂、放射免疫分析用试剂、放射免疫扩散法用试剂、补体固定分析法用试剂、荧光激活细胞分选用试剂、质量分析用试剂或蛋白质微阵列用试剂。
[0010]所述检测EDA2R蛋白表达水平的试剂、检测肌酐水平的试剂均为酶联免疫吸附实验用试剂。
[0011]所述检测EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂是检测尿液中EDA2R蛋白和尿液中肌酐。
[0012]所述检测EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂包括用于检测尿液中EDA2R蛋白和检测肌酐的试剂。
[0013]所述检测EDA2R蛋白表达水平和检测肌酐水平的试剂包括酶联免疫吸附实验用试剂、免疫印迹用试剂、免疫电泳用试剂、组织免疫染色用试剂、免疫沉淀分析法用试剂、放射免疫分析用试剂、放射免疫扩散法用试剂、补体固定分析法用试剂、荧光激活细胞分选用试剂、质量分析用试剂或蛋白质微阵列用试剂。
[0014]所述检测EDA2R的蛋白表达水平的试剂包括特异性结合EDA2R蛋白的全长或其片段的抗体、抗体片段、高亲和性多聚体、肽、肽模拟物、核酸适配体。
[0015]所述检测EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂的试剂是检测尿液中EDA2R蛋白和尿液中肌酐的试剂。
[0016]本专利技术发现尿液中EDA2R蛋白可用于临床糖尿病肾病的辅助诊断。本专利技术并通实验，证实尿液中EDA2R蛋白表达水平和尿液中肌酐水平的比值可以作为糖尿病肾病的标志物，若尿液中EDA2R蛋白表达水平和尿液中肌酐水平比值高，则患有糖尿病肾病的风险高，若尿液中EDA2R蛋白表达水平和尿液中肌酐水平比值低，则患有糖尿病肾病的风险低。本专利技术提供了一种糖尿病肾病尿液筛查试剂盒，能够实现糖尿病肾病尿的有效筛查；以尿液作为检测样品，伤害低。本专利技术具备良好的应用前景。
[0017]显然，根据本专利技术的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本专利技术上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
[0018]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
附图说明
[0019]图1为野生型小鼠STZ造模后以及对照组小鼠血糖浓度随时间的变化。
[0020]图2为高血糖小鼠造模成功后第6周和第4个月的血清中尿素氮(BUN)水平、尿液中白蛋白与尿液中肌酐比值(Alb/Cre)。A：第6周(6W)B：第4个月(4M)；*与对照组(Con)相比p<0.05。
[0021]图3为高血糖小鼠造模成功后第6周和第4个月的尿液中EDA2R与尿液中肌酐(Cr)比值(pg/mg),A：第6周(6W)B：第4个月(4M)；*与对照组(Con)相比p<0.05。
具体实施方式
[0022]本专利技术所用原料与设备均为已知产品，通过购买市售产品所得。
[0023]肌酐：Creatinine，即Cre，即Cr。
[0024]本专利技术实施例采用检测试剂如下：
[0025]利用北京迈瑞达科技有限公司的小鼠外异蛋白A2受体(EDA2R)ELISA试剂盒(货号：M177884
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96T)，按照试剂盒说明书进行检测尿液样本中EDA2R表达水平。该试剂盒的检测范围为15.625
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1000pg/ml。
[0026]利用赛默飞世尔科技公司的尿肌酐检测试剂盒(货号：EIACUNX10)，按照试剂盒说明书进行检测尿液样本中肌酐水平。该试剂盒的检测范围为0.3
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20mg/dL。
[0027]利用赛默飞世尔科技公司的尿素氮(BUN)比色检测试剂盒(货号：EIABUN)，按照试剂盒说明书进行检测血清中尿素氮(BUN)水平。该试剂盒的检测范围为0.156～10mg/dL。
[0028]实施例1、尿液中EDA2R蛋白与糖尿病肾病的关系
[0029]一、实验方法
[0030](一)建立糖尿病肾病小鼠模型
[0031]1、构建糖尿病肾病小鼠模型
[0032]1)构建糖尿病小鼠
[0033]糖尿病肾病是指糖尿病导致的慢性肾脏病，是慢性肾脏病和终末期肾脏病(肾衰竭)的重要原因，所以建立糖尿病肾病模型需要先建立糖尿病小鼠模型。
[0034]糖尿病模型组(WT
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STZ)：本专利技术选用8周龄的C57BL/6N小鼠，其中4只雄性4只雌性，注射链脲佐菌素(STZ)构建糖尿病肾病模型，构建模型方法如下：
[0035]给药前，对小鼠禁食不禁水处本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.检测EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂在制备糖尿病肾病筛查试剂盒中的用途。2.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述检测EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂是检测EDA2R蛋白表达水平的试剂和检测肌酐水平的试剂。3.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述检测EDA2R蛋白表达水平的试剂、检测肌酐水平的试剂分别为如下试剂中的任意一种：酶联免疫吸附实验用试剂、免疫印迹用试剂、免疫电泳用试剂、组织免疫染色用试剂、免疫沉淀分析法用试剂、放射免疫分析用试剂、放射免疫扩散法用试剂、补体固定分析法用试剂、荧光激活细胞分选用试剂、质量分析用试剂或蛋白质微阵列用试剂。4.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述检测EDA2R蛋白表达水平的试剂、检测肌酐水平的试剂均为酶联免疫吸附实验用试剂。5.如权利要求1所述的用途，其特征在于，所述检测EDA2R蛋白表达水平与肌酐水平比值的试剂是检...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈建宁，杨少忠，薛芮，
申请(专利权)人：杭州市第七人民医院，
类型：发明
国别省市：