一种重组蛋白及其在鉴别诊断LSDV中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种重组蛋白，其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明专利技术还公开了该重组蛋白的制备方法及其在制备牛结节性皮肤病病毒(LSDV)鉴别诊断试剂盒中的应用，属于分子生物学领域。本发明专利技术用5个柔性肽串联6个LSDV的特异性片段，克隆融合基因并表达得到该重组蛋白，分子量为18kDa。经验证，该蛋白与LSDV自然感染的阳性血清抗体有很强的反应原性，能用于鉴别诊断山羊痘弱毒疫苗免疫和自然感染LSDV的血清，并且还具有敏感性强、特异性好等优点。本发明专利技术为LSDV的血清学检测和防控提供了高价值工具，弥补了国内外鉴别诊断LSDV的空白。空白。空白。

【技术实现步骤摘要】
一种重组蛋白及其在鉴别诊断LSDV中的应用


[0001]本专利技术属于分子生物学领域，具体涉及一种用于鉴别牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus，LSDV)的重组蛋白，本专利技术还涉及该重组蛋白的制备方法，以及含有该重组蛋白的试剂盒。

技术介绍

[0002]牛结节性皮肤病(LSD)是由牛结节性皮肤病病毒(LSDV)引起的一种牛传染病，LSD以全身皮肤表面产生广泛性结节为主要特征，结节直径为5
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50mm，坚硬，呈平顶丘疹状，可深入至皮下层直至肌肉。病牛感染初期体温可升至41℃左右，呈稽留热，体表淋巴结肿大，口、鼻和眼部结节可破溃并伴有分泌物，腿部水肿并跛行，奶牛泌乳量下降，肉牛生长速度变缓，妊娠母牛可发生流产，公牛可短时或长期不育。LSD的发病率在5％
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45％，死亡率约为5％，严重时可高达20％。自2019年以来已先后在我国17个省份暴发LSD，给养牛业造成重大的经济损失。LSDV属于痘病毒科(Poxviridae)山羊痘病毒属(Capripox virus，CaPV)，是一种本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种重组蛋白，其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.一种制备权利要求1所述重组蛋白的方法，其特征在于：经全基因组序列比对，分析牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus，LSDV)与山羊痘病毒(goat pox virus，GTPV)弱毒株的差异序列，得出LSDV编码蛋白区特有的DNA序列并将其连续存在24个碱基以上的6个特有序列通过5个柔性肽串联，然后进行密码子优化合成，得到如SEQ ID NO.1所示的融合基因DNA序列，基因合成后克隆到表达载体得到重组质粒，并将重组质粒转化至感受态细胞诱导表达获得重组蛋白。3.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述表达载体为pET28a。4.如权利要求2所述的制备方法，其特征在于：所述感受态细胞为大肠杆菌BL21(DE3)。5.权利要求1所述的...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭爱珍，袁歆玮，张淏云，姬婉枫，杨莉，胡长敏，陈颖钰，陈建国，陈曦，张磊，
申请(专利权)人：华中农业大学，
类型：发明
国别省市：