本发明专利技术涉及人工模拟生物液体技术领域，尤其涉及一种人工模拟羊膜液生物液体及其制备方法，人工模拟羊膜液生物液体，含有质量百分数为1～2％的溶质，溶质包括重组人体粒细胞集落刺激因子、重组人体促血红细胞生成素、表皮生长因子、有机物和无机盐，重组人体粒细胞集落刺激因子的浓度为220～225μg/L，重组人体促血红细胞生成素的浓度为4000～4400U/L，表皮生长因子的浓度为4.0～5.0μg/L。本发明专利技术的人工模拟羊膜液的主要成分及含量与妊娠期羊水中主要成分及含量基本相吻合，可以通过调整不同成分的占比，以模拟妊娠早、中或晚期的羊水，该人工模拟羊膜液生物液体为应用于开展羊膜相关试验和生物材料活性评价的科学研究奠定了良好的基础。定了良好的基础。
【技术实现步骤摘要】
一种人工模拟羊膜液生物液体及其制备方法
[0001]本专利技术涉及人工模拟生物液体
，尤其涉及一种人工模拟羊膜液生物液体及其制备方法。
技术介绍
[0002]羊水(amniotic fluid，AF)，亦称羊膜液。羊水是脊椎动物受孕期间充满其羊膜腔的液体，为羊膜上皮的分泌物，且还含有来自母子两体的血管渗出液，是维持胎儿正常生长发育不可缺少的重要部分。羊水的来源、含量(正常值通常在300～2000mL之间)和成分随孕期不同而有所变化。在妊娠初期，羊水通常呈清澈状态，水分含量占98％左右，其余为无机盐、蛋白质、葡萄糖、酶、脂肪和激素等。在此阶段，羊水主要是母体血清通过胎盘进入羊膜腔的透析液，少量从胎盘表面和脐带表面渗出。当胎儿血循环形成后，胎儿体内水分和小分子可经尚未角化的胎儿皮肤渗出，构成羊水的一部分。在妊娠后期，羊水略有混浊，胎儿的排泄物(矿物质、尿素、尿酸、肌酐、皮脂质、激素)和上皮的脱落细胞、毛、皮脂腺的分泌物等也能进入羊水中。羊水的pH值通常在7.0～8.0之间，偏中性或弱碱性。羊水具有保护胚胎避免震荡及敲击，保护胎儿免受损伤，缓冲外界压力，提供胚胎发育所需的恒定温度，维持胎儿体液平衡等功能。
[0003]临床上羊水检查也是诊断产科疾病的重要方法之一。羊水中甲胎蛋白(AFP)的量可作为监测胎儿有无畸形的指标，将溶于羊水中的胎儿上皮细胞取下，检查其染色体，可在某种程度上对胎儿进行性别、遗传性疾病的筛查。通过检测孕期中羊水pH值的高低，可判断母体是否存在妊娠期糖尿病、泌尿系统感染或胎盘发育异常、胎儿发育不良等。
[0004]近年来，随着临床产科学发展的日益迅速和深入，鉴于各种临床技术研究和相关辅助类医用器械和生物材料的开发，人工模拟羊膜液生物液体对于妊娠期的研究越来越重要，目前鲜有相关报道。
技术实现思路
[0005]有鉴于此，本专利技术的目的是提供一种人工模拟羊膜液生物液体及其制备方法，该人工模拟羊膜液生物液体含与胎儿在子宫获得的羊水浓度相当的重要细胞因子，具有安全的耐受性。
[0006]本专利技术通过以下技术手段解决上述技术问题：
[0007]本专利技术的第一方面在于提供了一种人工模拟羊膜液生物液体，含有质量百分数为1～2％的溶质，所述溶质包括重组人体粒细胞集落刺激因子、重组人体促血红细胞生成素、表皮生长因子、有机物和无机盐，所述重组人体粒细胞集落刺激因子的浓度为220～225μg/L，所述重组人体促血红细胞生成素的浓度为4000～4400U/L，所述表皮生长因子的浓度为4.0～5.0μg/L。
[0008]结合第一方面，在一些可选的实施方式中，所述有机物包括以下成分：0.2～0.7mg/L胆红素、50～55mg/L人血白蛋白、20～50mg/L甲胎蛋白、2.02～2.79mmol/L葡萄糖、
3.0～5.01mmol/L尿素、20～60μmol/L甘油三酯、130～175μmol/L肌酐、0.45～0.7mmol/L尿酸、0.52～2.5μmol/L胆固醇、0.39～0.59mmol/L卵磷脂和鞘磷脂。
[0009]结合第一方面，在一些可选的实施方式中，所述卵磷脂：鞘磷脂＝1:1～2:5。
[0010]结合第一方面，在一些可选的实施方式中，所述无机盐包括以下成分：110～154mmol/L氯化钠、15～17mmol/L乙酸钠、3～4mmol/L氯化钾、0.323～0.435mmol/L氯化镁、0.171～0.251mmol/L氯化钙。
[0011]结合第一方面，在一些可选的实施方式中，所述生物液体的pH值稳定在7.0～8.0，渗透压保持在260～280mmol/L。
[0012]本专利技术的第二方面在于提供了上述一种人工模拟羊膜液生物液体的制备方法，包括以下步骤：
[0013]制备磷脂固体，将卵磷脂和鞘磷脂及胆固醇加入纯化水中，利用功率为180～220W的超声波清洗器超声20～30min，得到磷脂分散液，将磷脂分散液进行冷冻干燥，得到磷脂固体；
[0014]制备脂质分散原液，将磷脂固体加入纯化水中，利用功率为180～220W的超声波清洗器，超声分散10～20min，再将220～225μg/L的重组人体粒细胞集落刺激因子，4000～4400U的重组人体促血红细胞生成素和4.0～5.0μg/L的表皮生长因子加入，继续超声5
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10min，得到含有细胞因子的脂质分散原液；
[0015]制备模拟营养液，将氯化钠、乙酸钠、氯化钾、氯化镁和氯化钙加入纯水中充分溶解，再加入胆红素人血白蛋白、甲胎蛋白、葡萄糖、尿素、甘油三酯、肌酐、尿酸，利用功率为180～220W的超声波清洗器，超声分散10～20min，得到模拟营养液；
[0016]制备生物液体，在100～130rpm/min搅拌条件下，将脂质分散原液加入到模拟营养液中，搅拌10～20min至完全混合均匀，调节pH值，选用0.45μm的醋酸纤维素膜进行过滤，收集滤液，得到人工模拟羊膜液生物液体。
[0017]结合第二方面，在一些可选的实施方式中，所述制备磷脂固体步骤中，磷脂分散液在冷冻干燥前先加入0.15～0.2mmol的甘露醇，用功率为180～220W的超声波清洗器，超声分散1～3min至完全溶解。
[0018]结合第二方面，在一些可选的实施方式中，所述制备生物液体步骤中，pH值的调节采用1mol/L的氢氧化钠溶液和1mol/L的盐酸溶液调节至pH值稳定在7.0～8.0。
[0019]结合第二方面，在一些可选的实施方式中，所述生物液体各原料的用量如下：0.2～0.7mg/L胆红素、50～55mg/L人血白蛋白、20～50mg/L甲胎蛋白、2.02～2.79mmol/L葡萄糖、3.0～5.01mmol/L尿素、20～60μmol/L甘油三酯、130～175μmol/L肌酐、0.45～0.7mmol/L尿酸、0.52～2.5μmol/L胆固醇、0.39～0.59mmol/L卵磷脂和鞘磷脂，110～154mmol/L氯化钠、15～17mmol/L乙酸钠、3～4mmol/L氯化钾、0.323～0.435mmol/L氯化镁、0.171～0.251mmol/L氯化钙。
[0020]结合第二方面，在一些可选的实施方式中，所述生物液体装罐密封，置于2
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8℃的低温无菌环境中储存。
[0021]本专利技术的人工模拟羊膜液生物液体所含有的成分囊括了羊水的主要成分，包括水、有机物、无机物和少量的重要细胞因子，且pH值和渗透压均在羊水的正常范围内。本专利技术的人工模拟羊膜液生物液体含与胎儿在子宫获得的羊水浓度相当的重要细胞因子，具有
安全的耐受性。本专利技术的人工模拟羊膜液生物液体可应用于妊娠期孕妇羊水补充，以及降低早产婴儿、消化道畸形婴儿、先天性肠梗阻手术恢复新生儿发生坏死性小肠结肠炎的风险等相关模型的研究。
[0022]本专利技术的人工模拟羊膜液生物液体中含有重组人体粒细胞集落刺激因子(rhG
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CSF)和重组人体促血本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种人工模拟羊膜液生物液体，其特征在于，含有质量百分数为1～2％的溶质，所述溶质包括重组人体粒细胞集落刺激因子、重组人体促血红细胞生成素、表皮生长因子、有机物和无机盐，所述重组人体粒细胞集落刺激因子的浓度为220～225μg/L，所述重组人体促血红细胞生成素的浓度为4000～4400U/L，所述表皮生长因子的浓度为4.0～5.0μg/L。2.根据权利要求1所述的一种人工模拟羊膜液生物液体，其特征在于，所述有机物包括以下成分：0.2～0.7mg/L胆红素、50～55mg/L人血白蛋白、20～50mg/L甲胎蛋白、2.02～2.79mmol/L葡萄糖、3.0～5.01mmol/L尿素、20～60μmol/L甘油三酯、130～175μmol/L肌酐、0.45～0.7mmol/L尿酸、0.52～2.5μmol/L胆固醇、0.39～0.59mmol/L卵磷脂和鞘磷脂。3.根据权利要求2所述的一种人工模拟羊膜液生物液体，其特征在于，所述卵磷脂:鞘磷脂＝1:1～2:5。4.根据权利要求1所述的一种人工模拟羊膜液生物液体，其特征在于，所述无机盐包括以下成分：110～154mmol/L氯化钠、15～17mmol/L乙酸钠、3～4mmol/L氯化钾、0.323～0.435mmol/L氯化镁、0.171～0.251mmol/L氯化钙。5.根据权利要求1所述的一种人工模拟羊膜液生物液体，其特征在于，所述生物液体的pH值稳定在7.0～8.0，渗透压保持在260～280mmol/L。6.一种人工模拟羊膜液生物液体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：制备磷脂固体，将卵磷脂和鞘磷脂及胆固醇加入纯化水中，利用功率为180～220W的超声波清洗器超声20～30min，得到磷脂分散液，将磷脂分散液进行冷冻干燥，得到磷脂固体；制备脂质分散原液，将磷脂固体加入纯化水中，利用功率为180～220W的超声波清洗器，超声分散10～20min，再将220～225μg/L的重组人体粒细胞集落刺激因子，4000～4400U的重组人体促血红细胞生成素和4.0～5.0μg/L的...
【专利技术属性】
技术研发人员：万里，吴江，邹旺材，
申请(专利权)人：成都市南丁医用材料有限公司，
类型：发明
国别省市：
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