IL-7融合蛋白及相关方法技术

本公开提供了IL

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】IL
‑
7融合蛋白及相关方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年11月25日提交的序列号为63/118,285的美国临时专利申请和2020年12月23日提交的序列号为63/129,817的美国临时专利申请的优先权，这两个申请的全部内容通过引用以其整体并入本文。
[0003]引用并入
[0004]本申请通过引用并入随本申请一起提交的的序列表，该序列表是计算机可读形式(CRF)的题为“64647WO01_SeqList”的文本文件。

技术介绍

[0005]白介素
‑
7(IL
‑
7)是一种由淋巴组织中的基质细胞产生的免疫调节剂。IL
‑
7参与淋巴细胞体内平衡，特别是T细胞的发育及其通过与其受体，即由淋巴系细胞表达的白介素
‑
7受体(IL
‑
7R)相互作用在外周的维持和保存。在胸腺中，IL
‑
7直接刺激T细胞受体γ链(TCRγ)基因座的重组以增加T细胞的抗原多样性。在循环T细胞中，IL
‑
7诱导抗凋亡因子和增殖信号的表达或活性，以及减少凋亡因子，导致T细胞增殖。
[0006]尽管其免疫刺激作用使IL
‑
7成为免疫缺陷治疗和预防的有吸引力的候选治疗剂，然而，需要延长IL
‑
7的血清半衰期的策略。
[0007]在其他方面中，本文描述了延长IL
‑
7蛋白半衰期的新型IL
‑r/>7融合蛋白，并且可用于治疗和预防免疫缺陷的方法中。

技术实现思路

[0008]整体上，本公开提供了白介素7(IL
‑
7)融合蛋白。在一方面，本公开提供了结合IL
‑
7受体的IL
‑
7融合蛋白。
[0009]在一些实施方案中，融合蛋白包含IL
‑
7蛋白、白蛋白和连接IL
‑
7蛋白和白蛋白的铰链区。在一些方面，IL
‑
7蛋白是人IL
‑
7，且白蛋白是人血清白蛋白。在一些实施方案中，人IL
‑
7包含SEQ ID NO:15的氨基酸序列。在一些实施方案中，人血清白蛋白(HSA)包含SEQ ID NO:16的氨基酸序列。在一些实施方案中，铰链区是人IgD。在一些实施方案中，铰链区包含SEQ ID NO:18的氨基酸序列。IL
‑
7蛋白可位于融合蛋白的C
‑
末端，且HSA位于融合蛋白的N
‑
末端。或者，HSA蛋白可位于融合蛋白的C
‑
末端，且IL
‑
7蛋白位于融合蛋白的N
‑
末端。
[0010]在一些实施方案中，融合蛋白还包含信号肽。信号肽可以是小鼠IgG肽。在一些实施方案中，信号肽包含SEQ ID NO:17的氨基酸序列。
[0011]在一些实施方案中，融合蛋白包含SEQ ID NO:19的氨基酸序列。在其他实施方案中，融合蛋白包含SEQ ID NO:20的氨基酸序列。
[0012]当施用于受试者时，相对于重组或外源性人IL
‑
7，本文公开的融合蛋白可延长IL
‑
7蛋白的血清半衰期。可使用各种策略来延长蛋白质血清半衰期。例如，本文所述的融合蛋白人血清白蛋白(HSA)
‑
IL7包含一个、两个或三个或更多个特征。一个特征包括HSA，其作为融合结构域或融合配偶体(partner)。HSA是最丰富的血清蛋白，且其血清半衰期等于或好
于IgG。另一个特征包括IgD铰链区，其作为结构域(IL
‑
7和HSA)之间的接头。IgD铰链是所有免疫球蛋白中最长的铰链区，并赋予灵活性，使IL
‑
7在融合形式中保持其活性。第三个特征是IL
‑
7与HSA的C
‑
末端连接。与融合到IL
‑
7的N
‑
末端位置相比，这种形式提供了更好的生物化学和生物物理学特性。
[0013]在本文所述的任何方面和实施方案中，本文公开的IL
‑
7融合蛋白可用于治疗和/或预防受试者的淋巴细胞减少症。在一些方面，IL
‑
7融合蛋白可刺激受试者的白细胞增殖、淋巴细胞增殖和/或淋巴细胞分化。在其他方面，IL
‑
7融合蛋白可治疗和/或预防受试者的免疫缺陷。可受益于所公开的IL
‑
7融合蛋白的受试者包括但不限于患有癌症、人免疫缺陷病毒、乙型肝炎、丙型肝炎、淋巴细胞减少症、败血症的受试者和已进行干细胞、组织或器官移植的受试者。在某些方面，IL
‑
7融合蛋白可增加受试者的白血细胞计数，增加淋巴细胞计数和/或增加T细胞亚群，如CD3
+
CD4
+
T细胞、CD3
+
CD4
+
T细胞和CD3
+
T细胞。本文公开的方法包括对受试者施用IL
‑
7融合蛋白。
[0014]鉴于以下描述和说明性实例，本公开的其他方面对于本领域的普通技术人员将是明显的。
[0015]附图简述
[0016]图1A示出了IL
‑
7融合蛋白的一个实施方案。
[0017]图1B示出了IL
‑
7融合蛋白的另一个实施方案。
[0018]图2示出了JL18008
‑
1(IL
‑7‑
HSA)和JL18008
‑
2(HSA
‑
IL
‑
7)融合蛋白的药代动力学特性。
[0019]图3A
‑
3E示出了将JL18008
‑
2体内施用于淋巴细胞减少小鼠后免疫细胞群的恢复。
[0020]图4示出了JL18008
‑
2的体外生物活性。
具体实施方式
[0021]在继续更详细地描述本公开内容之前，应当理解本公开内容不限于特定的蛋白质、核酸、组合物或方法步骤，因为这些可以变化，同时仍然落在本文提供的描述的范围内。必须注意，除非上下文明确地另外指明，本说明书和所附权利要求中所用的单数形式“一种”、“一个”和“该”包括复数指代物。
[0022]除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语具有与本专利技术相关领域的普通技术人员通常理解的相同含义。例如，Concise Dictionary of Biomedicine and Molecular Biology,Juo,Pei
‑
Show,2nd ed.,2002,CRC Press；Dictionary of Cell and Molecular Biology,3rd ed.,1999,Aca本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种融合蛋白，其包含：a)IL
‑
7蛋白；b)铰链区；和c)白蛋白，其中所述铰链区共价连接所述IL
‑
7蛋白和所述白蛋白。2.根据权利要求1所述的融合蛋白，其中所述IL
‑
7蛋白是人IL
‑
7。3.根据权利要求1或2所述的融合蛋白，其中所述白蛋白是人血清白蛋白。4.根据权利要求1
‑
3中任一项所述的融合蛋白，其中所述铰链区衍生自包含人IgD铰链区的序列。5.根据权利要求1
‑
4中任一项所述的融合蛋白，其还包含信号肽。6.根据权利要求5所述的融合蛋白，其中所述信号肽衍生自小鼠IgG信号肽序列。7.根据权利要求1
‑
6中任一项所述的融合蛋白，其中所述IL
‑
7包含SEQ ID NO:15。8.根据权利要求1
‑
7中任一项所述的融合蛋白，其中所述白蛋白包含SEQ ID NO:16。9.根据权利要求1
‑
8中任一项所述的融合蛋白，其中所述铰链区包含SEQ ID NO:18。10.根据权利要求5
‑
9中任一项所述的融合蛋白，其中所述信号肽包含SEQ ID NO:17。11.根据权利要求1
‑
9中任一项所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含SEQ ID NO:19。12.根据权利要求1
‑
9中任一项所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白包含SEQ ID NO:20。13.根据权利要求1
‑
10中任一项所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白在N
‑
末端至C
‑
末端的方向上包含所述白蛋白，随后包含所述IL
‑
7蛋白。14.根据权利要求1
‑
10中任一项所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白在N
‑
末端至C
‑
末端的方向上包含所述IL
‑
7蛋白，随后包含所述白蛋白。15.根据权利要求1
‑
14中任一项所述的融合蛋白，其中当施用于受试者时，相对于重组或外源人IL
‑
7，所述融合蛋白中IL
‑
7的血清半衰期被延长。16.根据权利要求15所述的融合蛋白，其中当施用于受试者时，相对于重组或外源人IL
‑
7，所述融合蛋白中IL
‑
7的血清半衰期被延长至少2小时。17.根据权利要求15所述的融合蛋白，其中当施用于受试者时，相对于重组或外源人IL
‑
7，所述融合蛋白中IL
‑
7的血清半衰期被延长至少4小时。18.根据权利要求16或17所述的融合蛋白，其中在将所述融合蛋白以50
‑
150μg/kg的范围施用于所述受试者时，所述人IL
‑
7的血清半衰期为约195
‑
325分钟。19.根据权利要求18所述的融合蛋白，其中所述人IL
‑
7的血清半衰期为约195
‑
225分钟。20.根据前述权利要求中任一项所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白在施用于受试者时增加白血细胞计数。21.根据前述权利要求中任一项所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白在施用于受试者时增加淋巴细胞计数。22.根据前述权利要求中任一项所述的融合蛋白，其中所述融合蛋白在施用于受试者时增加T细胞亚群。
23.根据权利要求22所述的融合蛋白，其中所述T细胞亚群选自CD3
+
CD4
+
T细胞、CD3
+
CD4
+
T细胞和CD3
+
T细胞。24.根据权利要求15
‑
24中任一...

【专利技术属性】
技术研发人员：王澍生，朱建伟，黄海虬，王艾琳，杨开勇，谢跃庆，江华，
申请(专利权)人：杰科生物医药公司，
类型：发明
国别省市：