本申请提供了一种高效液相色谱串联质谱法检测5种药物的方法，所述药物为格列美脲、五氟利多、帕罗西汀、丙咪嗪和氯吡格雷，方法包括以下步骤：标准曲线的建立、样本的处理、高效液相色谱串联质谱法对待测样本的检测；本申请依次通过：采用内标法和至少5种浓度的标准工作液建立标准曲线，对样本进行处理分离可能的干扰物质，优化高效液相的流动相和梯度洗脱条件，质谱的设定参数等技术内容，使本申请的方法具有优异的灵敏性、准确性和可靠性，且分析所需时间短，可为临床治疗提供依据。可为临床治疗提供依据。
【技术实现步骤摘要】
一种高效液相色谱串联质谱法检测5种药物的方法及应用
[0001]本专利技术涉及药物检测
，G01N 30/02，尤其涉及一种高效液相色谱串联质谱法检测5种药物的方法及应用。
技术介绍
[0002]药物检测一直是临床诊断和治疗的重要环节，通过测定病人治疗用药后的血药浓度或其他体液的浓度，根据药动学原理和计算方法，拟定最佳的个体化给药方案，具体到药物剂量，给药时间和给药途径，以提高疗效和降低不良反应，从而达到有效并安全治疗的目的。随着年龄增长和生活环境、方式的变化，人体同时存在多种疾病(如糖尿病、精神分裂症、抑郁、心脑血管疾病等等)的现象愈发增加，同时服用多种药物的情况也更加普遍，为了更加准确地检测人体内的药物种类和含量，给医生提供病理学依据从而调整用药，以实现更快速、有效的治疗具有非常重要的意义。
[0003]格列美脲是第三代磺酰脲类长效抗糖尿病药，具有强效抗血糖作用，且对心血管产生的不良反应非常少；五氟利多为口服的长效抗精神病药，对心血管功能的影响也较轻；帕罗西汀和丙咪嗪具有较强的抗抑郁作用，但是服用后者可能会对心肌造成一定损伤；氯吡格雷是一种血小板聚集抑制剂，可降低心肌梗死等的风险。研究出一种能够同时、快速、灵敏、准确地检测以上5种药物的检测方法，具有很高的临床价值。
[0004]中国专利CN114414707B公开了一种液相色谱串联质谱检测血液中19种药物及其代谢产物的方法，其方法包括：标定标准溶液、处理待测样本、液相色谱串联质谱检测的步骤，其通过优化前处理方法、液相色谱和质谱的设定条件实现了多种药物的定性和定量分析，但是该检测方法的灵敏度和准确度仍然不高，且分析检测时间也比较长。
技术实现思路
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术首先提供了一种高效液相色谱串联质谱法检测5种药物的方法，所述药物为格列美脲(缩写：GLMN)、五氟利多(缩写：PFRD)、帕罗西汀(缩写：PLXT)、丙咪嗪(缩写：IPM)和氯吡格雷(缩写：CLP)。
[0006]进一步地，所述方法用于同时检测格列美脲、五氟利多、帕罗西汀、丙咪嗪、去甲丙咪嗪(缩写：DPM)、氯吡格雷和氯吡格雷代谢物(缩写：CAMD)。其中，DPM和IPM归属于同一种药物，CAMD和CLP归属于同一种药物。
[0007]进一步地，所述方法包括以下步骤：
[0008]S1、标准曲线的建立：采用甲醇
‑
水溶液配制5种药物及其内标物的标准溶液，设定高效液相色谱和质谱的参数，利用高效液相色谱串联质谱法对标准溶液进行检测，根据结果分别建立每种药物和其内标物的色谱峰面积比—药物和其内标物浓度比间的标准曲线方程；
[0009]S2、样本的处理：将原样本和内标物工作液混合后萃取、干燥、复溶即可得到待测样品；
[0010]S3、高效液相色谱串联质谱法对待测样本的检测：对待测样品检测，根据所获得的峰面积和标准曲线方程计算得到药物含量。
[0011]进一步地，所述甲醇
‑
水溶液中甲醇和水的体积比为(5
‑
7)：(1
‑
3)；优选为7：3。
[0012]进一步地，所述步骤S1和步骤S3的高效液相色谱和质谱的参数一致。
[0013]进一步地，所述步骤S1中，每种药物均至少配制5种浓度的标准溶液进行检测。
[0014]优选地，所述步骤S1中，每种药物均配制8种浓度的标准溶液进行检测；所述8种浓度的标准溶液浓度由低到高依次标记为L1、L2、L3、L4、L5、L6、L7、L8。
[0015]进一步地，所述8种浓度的标准溶液中，PLXT的浓度为20
‑
4000ng/mL，PFRD的浓度为16
‑
3200ng/mL，GLMN的浓度为5
‑
1000ng/mL，CLP的浓度为1
‑
200ng/mL，所述CAMD的浓度为5
‑
1000ng/mL，所述IPM和DMP的浓度为100
‑
20000ng/mL。
[0016]在一种实施方式中，对于所述PLXT的标准溶液，其L1
‑
L8分别为20ng/mL、40ng/mL、80ng/mL、200ng/mL、400ng/mL、800ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL；对于所述PFRD的标准溶液，其L1
‑
L8分别为16ng/mL、32ng/mL、64ng/mL、160ng/mL、320ng/mL、640ng/mL、1600ng/mL、3200ng/mL；对于所述GLMN的标准溶液，其L1
‑
L8分别为5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL；对于所述CLP的标准溶液，其L1
‑
L8分别为1ng/mL、2ng/mL、4ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、40ng/mL、100ng/mL、200ng/mL；对于所述CAMD的标准溶液，其L1
‑
L8分别为5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL、500ng/mL、1000ng/mL；对于所述IPM的标准溶液，其L1
‑
L8分别为100ng/mL、200ng/mL、400ng/mL、1000ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL、10000ng/mL、20000ng/mL；对于所述DPM的标准溶液，其L1
‑
L8分别为100ng/mL、200ng/mL、400ng/mL、1000ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL、10000ng/mL、20000ng/mL。
[0017]进一步地，所述格列美脲的内标物为格列美脲
‑
D5，所述五氟利多的内标物为五氟利多
‑
D7，所述帕罗西汀内标为去甲丙咪嗪
‑
D3，丙咪嗪的内标物为丙咪嗪
‑
D3，所述去甲丙咪嗪的内标物为去甲丙咪嗪
‑
D3，所述氯吡格雷和氯吡格雷代谢物的内标物均为氯吡格雷
‑
D3。
[0018]进一步地，所述内标物工作液中含有100ng/mL的格列美脲
‑
D5，3200ng/mL的五氟利多
‑
D7，2000ng/mL的丙咪嗪
‑
D3、2000ng/mL的去甲丙咪嗪
‑
D3，40ng/mL的氯吡格雷
‑
D3。
[0019]进一步地，所述步骤S2的萃取采用的萃取剂为甲基叔丁基醚。
[0020]进一步地，所述萃取剂和原样本的体积比为(8
‑
12)：1，优选为10：1。
[0021]进一步地，所述内标物工作液和原样本的体积比为1：(5
‑...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种高效液相色谱串联质谱法检测5种药物的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：S1、标准曲线的建立：采用甲醇
‑
水溶液配制5种药物及其内标物的标准溶液，设定高效液相色谱和质谱的参数，利用高效液相色谱串联质谱法对标准溶液进行检测，根据结果分别建立每种药物和其内标物的色谱峰面积比—药物和其内标物浓度比间的标准曲线方程；S2、样本的处理：将原样本和内标物工作液混合后萃取、干燥、复溶即可得到待测样品；S3、高效液相色谱串联质谱法对待测样本的检测：对待测样品检测，根据所获得的峰面积和标准曲线方程计算得到药物含量；所述药物为格列美脲、五氟利多、帕罗西汀、丙咪嗪和氯吡格雷。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤S3中，高效液相色谱的色谱柱为C18色谱柱，优选为Kinetex 2.6μm Polar C18100ALC Column 100
×
2.1mm。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述高效液相色谱中，流动相A为含有0.03
‑
0.1v/v％甲酸的水溶液，所述流动相B为含有0.3
‑
5mM铵盐的甲醇。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述铵盐为无机铵盐和/或有机铵盐，所述无机铵盐包括磷酸氢铵、磷酸氢二铵、碳酸氢铵中的至少一种，所述有机铵盐包括乙酸铵、甲酸铵、苯甲酸铵中的至少一种。5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述铵盐为甲酸铵。6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述流动相B为含有0.3
‑
3mM铵盐的甲醇。7.根据权利要求1所述的方法，其特征...
【专利技术属性】
技术研发人员：李红，何妍，陆琦，周瑶，杨容，邸同莲，
申请(专利权)人：苏州和合医学检验有限公司，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。