闭合线性DNA的生产制造技术

本发明专利技术涉及闭合线性DNA的生产，具体而言，本发明专利技术涉及用于生产闭合线性脱氧核糖核酸(DNA)的改良方法，尤其是用于在无细胞下酶促生产闭合线性DNA分子，优选使用闭合线性DNA作为DNA合成的模板。本发明专利技术还涉及新型的闭合线性DNA物质，其适合作为模板用在生产闭合线性DNA的改良方法中。另外，本发明专利技术还涉及所述方法的中间产物，原因是这能够使由模板生产的闭合线性DNA的数量大于现有技术已知的方法。线性DNA的数量大于现有技术已知的方法。线性DNA的数量大于现有技术已知的方法。

【技术实现步骤摘要】
闭合线性DNA的生产
[0001]本申请是申请号为2017800637882，申请日为2017年8月16日，专利技术名称为“闭合线性DNA的生产”的中国专利申请的分案申请。


[0002]本专利技术涉及用于生产闭合线性脱氧核糖核酸(DNA)的改进方法,特别是用于无细胞的酶促生产闭合线性DNA分子，优选使用闭合线性DNA作为DNA合成模板。本专利技术还涉及新型的闭合线性DNA物质，适于作为模板用在生产闭合线性DNA的改进方法中。此外，本专利技术还涉及所述方法的中间产物，原因是这能够使由模板生产的闭合线性DNA的数量大于现有技术已知的方法。

技术介绍

[0003]申请人以前曾在WO201/086626和WO2012/017210中描述过闭合线性DNA的无细胞生产；这些文件在此以引用方式并入。这些申请中描述的方法涉及使用DNA模板生产在每一端共价闭合的线性双链DNA(闭合线性DNA)，其中DNA模板包括至少一个原核端粒酶(protelomerase)识别序列，并且其中模板使用至少一个DNA聚合酶进行扩增且使用一个原核端粒酶进行加工，以产生闭合的本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种无细胞生产闭合线性脱氧核糖核酸(DNA)分子的方法，所述方法包括：(a)在至少一种引物存在下，使模板与链置换聚合酶在促进所述模板扩增的条件下接触，所述模板包含在每一端通过原核端粒酶识别序列的部分共价闭合的线性双链DNA分子，并且还包含至少一个茎环基序，所述引物能够特异性结合在所述茎环基序内的引物结合位点；(b)在促进闭合线性DNA生产的条件下，使(a)中生产的DNA与至少一种原核端粒酶接触。2.如权利要求1所述的方法，其中所述茎环基序的序列包含被两条序列侧接的中心段。3.如权利要求1或权利要求2所述的方法，其中茎环基序的中心段的序列包含引物结合位点，其任选地与相邻序列形成中心段的部分。4.如前述权利要求任一项所述的方法，其中形成茎环基序的所述序列相邻于或者接近于模板...

【专利技术属性】
技术研发人员：T，
申请(专利权)人：塔驰莱特IP有限公司，
类型：发明
国别省市：