本发明专利技术属于试剂盒技术领域，本发明专利技术具体公开了一种癌胚抗原CEA检测试剂盒及其制备方法，所述的癌胚抗原CEA检测试剂盒，其特征在于，包括R1试剂和R2试剂；所述R2试剂包括：0.01~0.1M缓冲液、0.5~2 wt%促凝剂、0.5~5 wt%表面活性剂、0.1~2wt%牛血清白蛋白、0.5~5 wt%偶联抗体的改性胶体金。本申请创造性的采用改性胶体金标记抗体，有效的提高了检测的灵敏度，且试剂盒特异性强，具有广泛的应用前景。通过采用银溶胶改性胶体金，采用金与银相结合的改性胶体金，进一步提高了稳定性以及改性胶体金的分散性能，使其不易发生团聚现象，具有更多的接触位点，有利于提高检测的灵敏度。有利于提高检测的灵敏度。
【技术实现步骤摘要】
癌胚抗原CEA检测试剂盒及其制备方法
[0001] 本专利技术涉及试剂盒
，具体涉及一种癌胚抗原CEA 检测试剂盒及其制备方法。
技术介绍
[0002] 癌胚抗原(carcinoembryonic antigen，CEA)是一种由641个氨基酸组成的酸性糖蛋白,分子量为 150~300kD，碳水化合物的含量约在 45%~60%，CEA类似于AFP属于在胚胎时期产生的胎儿癌性抗原组。癌胚抗原是一种比较广谱的肿瘤标志物，临床上多用该指标作为大多数癌症的诊断、鉴别诊断、预后判断、放疗、化疗及手术疗效观察的指标。
[0003]目前针对癌胚抗原的测定多为化学发光检测法和酶联免疫法，化学发光检测成本高且对仪器要求较高，而后者操作繁琐且耗费人工，结果不利于重复，利用胶乳增强免疫比浊法检测血液中癌胚抗原水平，具有成本低、重复性好等优点，具有良好的市场前景。
[0004] CN103995102A公开了一种癌胚抗原检测试剂盒及其制备，其基于胶体金免疫比浊法，包括试剂R2，所述试剂R2为含有标记了癌胚抗原抗体的金纳米颗粒的溶液，所述金纳米颗粒的粒径为62.2nm
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79.1nm，所述金纳米颗粒和抗体质量比为50：20
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60。该专利技术还提供该试剂盒的制备方法。该专利技术试剂盒具有灵敏度高，特异性强，反应迅速，稳定性好的特点，反应后不产生沉淀，便于生化仪的清洗，延长了生化仪的使用寿命；但其灵敏度仍然较低，仍待提高。
[0005] CN 112698034 A公开了一种癌胚抗原CEA的检测试剂盒。该专利技术试剂盒包括试剂R1和试剂R2；所述试剂R2为包被癌胚抗体的胶乳试剂，所述包被癌胚抗体的胶乳试剂由包括三乙醇胺和干酪素的封闭剂封闭制得。实验表明，该专利技术利用三乙醇胺和干酪素封闭制备包被癌胚抗体的胶乳试剂，有效地提高了检测灵敏度和试剂盒的稳定性，但其灵敏度仍然较低，仍待提高。
[0006] 因此，如何提高癌胚抗原CEA 检测试剂盒的灵敏度成为了本领域技术人员亟待解决的技术问题。
技术实现思路
[0007] 本专利技术提供一种癌胚抗原CEA 检测试剂盒及其制备方法，本专利技术所述的试剂盒灵敏度高。
[0008]本专利技术解决其技术问题采用以下技术方案：一种癌胚抗原CEA 检测试剂盒，包括R1试剂和R2试剂；所述R2试剂包括：0.01~0.1M缓冲液、0.5~2 wt %促凝剂、0.5~5 wt %表面活性剂、0.1~2wt%牛血清白蛋白、0.5~5 wt %偶联抗体的改性胶体金。
[0009]作为本专利技术的优选实施方案，所述偶联抗体的改性胶体金的制备方法，包括以下步骤：（1）将柠檬酸钠溶液A加热至65~90℃，加入硝酸银溶液，搅拌均匀，再加入氯化铁
溶液、聚乙烯吡咯烷酮，搅拌均匀，得到银溶胶；（2）将4
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巯基苯甲酸的甲醇溶液加入到银溶胶中，再加入抗坏血酸、胶体金，搅拌均匀，得到改性胶体金；（3）将改性胶体金与碳酸钾溶液混合均匀，再加入CEA抗体，搅拌均匀，得到偶联抗体的改性胶体金。
[0010]作为本专利技术的优选实施方案，所述柠檬酸钠溶液A的质量分数为1~20%；所述硝酸银溶液的质量分数为0.5~10%;所述氯化铁溶液的质量分数为0.5~20%；所述柠檬酸钠溶液A、硝酸银溶液、氯化铁溶液、聚乙烯吡咯烷酮的质量比为0.5~2：1：0.1~1：0.1~0.6。
[0011]作为本专利技术的优选实施方案，所述4
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巯基苯甲酸的甲醇溶液中4
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巯基苯甲酸的质量分数为2~20%；所述4
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巯基苯甲酸的甲醇溶液、银溶胶、抗坏血酸、胶体金的质量比为0.005~0.05：1 ：0.005~0.02：0.5~2。
[0012]作为本专利技术的优选实施方案，所述碳酸钾溶液的质量分数为2~20%；所述改性胶体金、碳酸钾溶液、CEA抗体的用量比为1：0.005~0.02：0.05~0.2。
[0013]作为本专利技术的优选实施方案，所述胶体金的制备方法，包括以下步骤：将柠檬酸钠溶液B与氯金酸溶液在60~90℃下搅拌至溶液颜色变成红色，再加入Tris溶液，搅拌均匀，得到胶体金。
[0014]作为本专利技术的优选实施方案，所述柠檬酸钠溶液B的质量分数为1~20%；所述氯金酸溶液的质量分数为1~20%；所述柠檬酸钠溶液B、氯金酸溶液、Tris溶液的质量比为0.5~2：1：0.2~0.8。
[0015]作为本专利技术的优选实施方案，所述缓冲液为PBS缓冲液；所述促凝胶为聚乙二醇；所述表面活性剂为吐温80。
[0016] 作为本专利技术的优选实施方案，所述R1试剂包括：0.01~0.1M磷酸盐缓冲液、0.1~2wt%牛血清白蛋白、0.005~0.02 wt%乙二胺四乙酸二钠、0.1~2wt%吐温60。
[0017] 本专利技术还提供了一种癌胚抗原CEA 检测试剂盒的制备方法，包括以下步骤：将缓冲液、促凝剂、表面活性剂、牛血清白蛋白、偶联抗体的改性胶体金混合均匀，得到R2试剂；将磷酸盐缓冲液、牛血清白蛋白、乙二胺四乙酸二钠、吐温60混合均匀，得到R1试剂。
[0018]本专利技术的有益效果：（1）本申请创造性的采用改性胶体金标记抗体，有效的提高了检测的灵敏度，且试剂盒特异性强，具有广泛的应用前景。（2）本专利技术采用银溶胶改性胶体金，采用金与银相结合的改性胶体金，进一步提高了稳定性以及改性胶体金的分散性能，使其不易发生团聚现象，具有更多的接触位点，有利于提高检测的灵敏度，通过在制备过程中，加入抗坏血酸和4
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巯基苯甲酸，进一步提高了整体结构的稳定性，提高接触位点，同时使材料的分散性更佳，进一步提高了灵敏度。
实施方式
[0019]为使本申请实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本申请实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本申请一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本申请中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本申请保护的范围。
[0020]本申请中，以开放式描述的技术特征中，包括所列举特征组成的封闭式技术方案，也包括包含所列举特征的开放式技术方案。
[0021]本申请中，涉及到数值区间，如无特别说明，上述数值区间内视为连续，且包括该范围的最小值及最大值，以及这种最小值与最大值之间的每一个值。进一步地，当范围是指整数时，包括该范围的最小值与最大值之间的每一个整数。此外，当提供多个范围描述特征或特性时，可以合并该范围。换言之，除非另有指明，否则本文中所公开之所有范围应理解为包括其中所归入的任何及所有的子范围。
[0022]在本申请中，具体的分散、搅拌处理方式没有特别限制。
[0023]本申请所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
[0024] 本申请实施例提供了一种癌胚抗原CEA 检测试剂盒，包括R1试剂和R2试剂；所述R2试剂包括：0.01~0.1本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种癌胚抗原CEA 检测试剂盒，其特征在于，包括R1试剂和R2试剂；所述R2试剂包括：0.01~0.1M缓冲液、0.5~2 wt %促凝剂、0.5~5 wt %表面活性剂、0.1~2wt%牛血清白蛋白、0.5~5 wt %偶联抗体的改性胶体金；所述偶联抗体的改性胶体金的制备方法，包括以下步骤：（1）将柠檬酸钠溶液A加热至65~90℃，加入硝酸银溶液，搅拌均匀，再加入氯化铁溶液、聚乙烯吡咯烷酮，搅拌均匀，得到银溶胶；（2）将4
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巯基苯甲酸的甲醇溶液加入到银溶胶中，再加入抗坏血酸、胶体金，搅拌均匀，得到改性胶体金；（3）将改性胶体金与碳酸钾溶液混合均匀，再加入CEA抗体，搅拌均匀，得到偶联抗体的改性胶体金。2.根据权利要求1所述的癌胚抗原CEA 检测试剂盒，其特征在于，所述柠檬酸钠溶液A的质量分数为1~20%；所述硝酸银溶液的质量分数为0.5~10%;所述氯化铁溶液的质量分数为0.5~20%；所述柠檬酸钠溶液A、硝酸银溶液、氯化铁溶液、聚乙烯吡咯烷酮的质量比为0.5~2：1：0.1~1：0.1~0.6。3.根据权利要求1所述的癌胚抗原CEA 检测试剂盒，其特征在于，所述4
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巯基苯甲酸的质量分数为2~20%；所述4
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巯基苯甲酸的甲醇溶液、银溶胶、抗坏血酸、胶体金的质量比为0.005~0.05：1：0.005~0.02...
【专利技术属性】
技术研发人员：王泰华，
申请(专利权)人：广东赛尔生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：
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