HDGF作为酪氨酸激酶抑制剂耐药靶点及相关应用制造技术

本发明专利技术提供了肝癌衍生生长因子HDGF作为酪氨酸激酶抑制剂耐药靶点及相关应用。本发明专利技术提供了肝癌衍生生长因子HDGF作为靶点在筛选和/或制备具有改善患者对酪氨酸激酶抑制剂耐药作用的药物中的应用。本发明专利技术发现HDGF高表达是分子靶向药吉非替尼等酪氨酸激酶抑制剂耐药的机制之一。以HDGF为靶点可有效改善NSCLC对吉非替尼的耐药，提高疗效。提高疗效。

【技术实现步骤摘要】
HDGF作为酪氨酸激酶抑制剂耐药靶点及相关应用


[0001]本专利技术是关于与酪氨酸激酶抑制剂(TKI)耐药相关的靶点，特别是关于肝癌衍生生长因子(HDGF)作为非小细胞肺癌吉非替尼等TKI耐药靶点及相关应用。

技术介绍

[0002]酪氨酸激酶(tyrosine kinase，TKs)是细胞信号转导途径中的重要因子，参与调节细胞生长、分化和凋亡等一系列生理生化过程。研究表明，在肿瘤组织中，酪氨酸激酶常被激活，继而激活下游的信号传导通路，促进细胞增殖，抑制细胞凋亡，促使肿瘤发展，由于酪氨酸激酶在肿瘤发生中的关键作用，因此酪氨酸激酶抑制剂(TKI)通过特异性阻断细胞增殖信号，成为了肿瘤治疗的重要靶向药物。
[0003]肺癌是目前世界上发病率和死亡率最高的恶性肿瘤，全球肺癌的发病率和死亡率均呈上升趋势。肺癌主要分为非小细胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)，其中非小细胞肺癌约占所有肺癌病例的80％。目前，肺癌的治疗仍是世界上最具挑战的难题之一。针对肺腺癌驱动基因的靶向药物已成为晚期非小细胞肺癌治疗的一线药物。表皮生长因子受体
‑
酪氨酸激酶抑制剂(EGFR
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TKI)能显著延长患者中位生存期，吉非替尼(gefitinib)是我国临床广泛应用的第一代TKI。虽然TKI对具有EGFR敏感突变的晚期非小细胞肺癌疗效较好，但终会发生耐药出现疾病进展。被寄予厚望的第二代TKI阿法替尼和第三代TKI AZD9291也同样存在耐药的问题。因此，耐药仍然是限制TKI临床疗效的重要原因，如何克服TKI耐药使非小细胞肺癌患者获益是关键科学问题。
[0004]目前已经明确的TKI耐药机制包括：EGFR的二次突变(T790M)(50
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60％)；旁路的异常活化(c
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MET,HGF,AXL)(1
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25％)；下游信号通路异常(BRAF、PIK3CA或K
‑
RAS突变、PTEN缺失等)，非小细胞转变为小细胞或出现上皮
‑
间质转化(EMT)组织病理转化(5
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10％)、肿瘤的异质性等。此外，尚有20
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30％的耐药原因尚未阐明。目前耐药后的主要挽救措施包括：化疗、第二代或第三代TKI、旁路抑制剂联合TKI，PD
‑
1/PD
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L1免疫疗法联合TKI。第二代或第三代TKI虽然对T790M突变的耐药具有一定的疗效，但会发生再次耐药，后面两种方案的疗效正在临床试验中。总体来讲，大部分临床研究用的单药或药物联合对第一代TKI耐药患者来说效果并不尽如人意。因此，耐药仍然是困扰TKI临床疗效的问题。如何克服TKI耐药仍需进行新的探索。

技术实现思路

[0005]本专利技术的一个目的在于寻找酪氨酸激酶抑制剂(TKI)耐药机制，以筛选能够减轻患者特别是非小细胞肺癌患者对于TKI耐药性的相关药物或方法，克服或延缓耐药，提高TKI对患者的疗效。
[0006]本案专利技术人在研究中发现，肝癌衍生生长因子(HDGF)的表达水平与分子靶向药吉非替尼(gefitinib)等酪氨酸激酶抑制剂耐药性相关。以HDGF为靶点可有效改善NSCLC对吉非替尼等酪氨酸激酶抑制剂的耐药，提高疗效。
[0007]在本专利技术的一些具体实施方案中，本专利技术发现，HDGF高表达是分子靶向药吉非替尼等酪氨酸激酶抑制剂耐药的机制之一。吉非替尼耐药非小细胞肺癌细胞中HDGF表达水平显著高于敏感细胞。高水平的HDGF不仅与NSCLC的恶性表型相关，而且可以诱导吉非替尼耐药。与TKI耐药相关的信号通路，如PI3K/Akt和MEK/ERK通路，可以被HDGF以非EGFR依赖的方式旁路激活。抑制HDGF可增强吉非替尼对耐药NSCLC细胞的作用。敲低HDGF在耐药细胞的表达能显著降低吉非替尼的半数有效浓度(IC
50
)、减弱细胞克隆形成能力，促进肿瘤细胞凋亡，抑制耐药相关蛋白p
‑
Akt和p
‑
ERK的表达。将吉非替尼敏感细胞过表达HDGF则能显著提高吉非替尼的IC
50
，促进细胞克隆形成能力和划痕愈合能力，诱导耐药相关蛋白p
‑
Akt和p
‑
ERK的表达。体内研究则表明：过表达HDGF能促进NSCLC肿瘤的生长，促进耐药相关蛋白的表达。体内外研究结果表明：HDGF高表达是吉非替尼耐药机制之一，敲低HDGF表达可提高耐药NSCLC对吉非替尼的响应。HDGF是克服吉非替尼耐药的潜在靶点。
[0008]从而，一方面，本专利技术提供了肝癌衍生生长因子HDGF作为靶点在筛选和/或制备具有改善患者对酪氨酸激酶抑制剂耐药作用的药物中的应用。
[0009]另一方面，本专利技术还提供了检测肝癌衍生生长因子HDGF的表达水平的试剂在制备评估患者对酪氨酸激酶抑制剂耐药性的检测系统中的应用。
[0010]另一方面，本专利技术还提供了针对肝癌衍生生长因子HDGF的拮抗剂在制备用于治疗肿瘤和/或降低患者酪氨酸激酶抑制剂耐药性的药物中的应用。
[0011]本专利技术中，所述检测包括辅助检测，所述治疗包括辅助治疗。
[0012]本专利技术中所述针对肝癌衍生生长因子HDGF的拮抗剂为降低HDGF的表达水平和/或拮抗HDGF的作用的试剂。具有这样功能的试剂例如可包括但不限于sgRNA、小分子抑制剂、天然产物、抗体或其组合等。这样的试剂对于本领域技术人员而言可根据现有技术获得，可以是现有技术中已知的任何可降低HDGF的表达水平和/或拮抗HDGF的作用的拮抗剂本身，也可是基于该分子式进行修饰、改构后仍具有降低HDGF的表达水平和/或拮抗HDGF作用的功能的试剂。在本专利技术的一些具体实施方案中，利用基因技术敲低了HDGF的表达，可以有效地抑制肿瘤细胞的增殖、迁移扩散和/或侵袭能力，同时，也能够恢复对吉非替尼等酪氨酸激酶抑制剂的敏感性。
[0013]在本专利技术的一些具体实施方案中，降低酪氨酸激酶抑制剂耐药性包括降低酪氨酸激酶抑制剂的半数有效浓度(IC
50
)。
[0014]在本专利技术的一些具体实施方案中，降低酪氨酸激酶抑制剂耐药性包括减弱肿瘤细胞克隆形成能力，和/或抑制肿瘤细胞的增殖、迁移扩散和/或侵袭能力。
[0015]在本专利技术的一些具体实施方案中，降低酪氨酸激酶抑制剂耐药性包括促进肿瘤细胞凋亡，和/或抑制体内肿瘤生长。
[0016]在本专利技术的一些具体实施方案中，降低酪氨酸激酶抑制剂耐药性包括抑制耐药相关蛋白p
‑
Akt和p
‑
ERK的表达。
[0017]根据本专利技术的另一方面，本专利技术提供了使酪氨酸激酶抑制剂敏感细胞过表达HDGF的试剂在制备具有以下至少一种功效的研究制剂中的应用：提高酪氨酸激酶抑制剂的IC
50
；促进细胞克隆形成能力和/或划痕愈合能力；增强细胞的增殖、克隆形成以及迁移和侵袭能力；和/或诱导耐药相关蛋白p
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.肝癌衍生生长因子HDGF作为靶点在筛选和/或制备具有改善患者对酪氨酸激酶抑制剂耐药作用的药物中的应用。2.检测肝癌衍生生长因子HDGF的表达水平的试剂在制备评估患者对酪氨酸激酶抑制剂耐药性的检测系统中的应用。3.针对肝癌衍生生长因子HDGF的拮抗剂在制备用于治疗肿瘤和/或降低患者酪氨酸激酶抑制剂耐药性的药物中的应用，其中所述针对肝癌衍生生长因子HDGF的拮抗剂为降低HDGF的表达水平和/或拮抗HDGF的作用的试剂。4.根据权利要求3所述的应用，其中，降低酪氨酸激酶抑制剂耐药性包括降低酪氨酸激酶抑制剂的半数有效浓度(IC
50
)。5.根据权利要求3所述的应用，其中，降低酪氨酸激酶抑制剂耐药性包括减弱肿瘤细胞克隆形成能力，和/或抑制肿瘤细胞的增殖、迁移扩散和/或侵袭能力。6.根据权利要求3所述的应用，其中，降低酪氨酸激酶抑制剂耐药性包括促进肿瘤细胞凋亡，和/或抑制体内肿瘤生长。7.根据权利要求3所述的应用，...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩淑燕，李萍萍，孙红，薛冬，郝会峰，赵军，焦延娜，
申请(专利权)人：北京市肿瘤防治研究所，
类型：发明
国别省市：