奇异长喙壳实时荧光定量PCR检测方法及检测试剂盒技术

本发明专利技术提供了一种奇异长喙壳的检测方法及检测试剂盒，经试验筛选的特异性引物（CP

【技术实现步骤摘要】
奇异长喙壳实时荧光定量PCR检测方法及检测试剂盒


[0001]本专利技术属于植物真菌病害检测鉴定
，具体涉及一种奇异长喙壳实时荧光定量PCR检测方法及检测试剂盒。

技术介绍

[0002]椰子泻血病是椰子主要病害之一，其病原是奇异根串珠霉菌的有性世代奇异长喙壳菌。奇异长喙壳属隶属于小囊菌目、长喙壳科，奇异长喙壳对椰子的危害极大，发病初期树干茎部出现细小的病斑，随着病情发展，病斑扩大并结合成大块病斑。在树干上形成大大小小的裂缝，茎干内部组织开始腐烂，流出锈色液体，继而导致树叶凋零，植株死亡。实时荧光定量PCR用于检测鉴定植物真菌病害要符合特定引物探针设计要求，尤其要找到区别于其它近似种的特异引物和探针位点，探针选择不好会有假阳性扩增。目前没有奇异长喙壳的实时荧光定量PCR检测鉴定相关的专利文献和非专利文献公开。本专利技术针对奇异长喙壳进行检测鉴定。
[0003]目前，国内外对植物真菌病害的检测鉴定主要通过分离培养后的菌落特征形态进行观察分析鉴定，探索新的方法弥补形态鉴定的不足显得尤为重要和迫切。本专利技术要解决的技术问题是提供一种奇异本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种奇异长喙壳的实时荧光定量PCR检测方法，其特征在于，提取待检样品DNA，利用引物和探针进行实时荧光定量PCR检测鉴定奇异长喙壳；所述引物包含上游引物CP
‑
F与下游引物CP
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R，其序列为：CP
‑
F:5'
‑
TTACCTTCTGGCTGCTTTGG
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3'；CP
‑
R:5'
‑
GCATTTCGCTGCGTTCTTCA
‑
3'。所述探针的序列为：CP
‑
P:5'
‑
CCTTGGGATTTGCC
‑
3'，荧光基团连接在探针的5'末端，淬灭基团连接在3'末端。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，实时荧光定量PCR检测反应体系为25μL，包括2
×
Premix Ex Taq（Probe qPCR）12.5μL、上游引物CP
‑
F 0.5μL、下游引物CP
‑
R 0.5μL、探针CP
‑
P 0.5μL、50
×
ROX Reference Dye 0.5μL、DNA模板2μL、ddH2O 8....

【专利技术属性】
技术研发人员：潘英文，吴华，朱辉，于少帅，张盛敏，
申请(专利权)人：海口海关热带植物隔离检疫中心，
类型：发明
国别省市：