用于在治疗NLRC4-GOF炎性体病变中使用的双特异性抗体制造技术

本发明专利技术涉及二价双特异性单克隆抗体(bbmAb)或其变体，用于在有需要的受试者中治疗或减轻NLRC4炎性体病变，如NLRC4

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于在治疗NLRC4
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GOF炎性体病变中使用的双特异性抗体


[0001]本专利技术涉及二价双特异性单克隆抗体(bbmAb)或其变体的治疗，用于在有需要的患者的NLRC4
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GOF炎性体病变的治疗中使用。在一些情况下，bbmAb(或变体)用于在具有NLRC4
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GOF炎性体病变和/或NLRC4
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GOF突变的患者中治疗婴儿小肠结肠炎。本披露还涉及通过采用同时靶向IL
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1β和IL
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18两者的双特异性抗体治疗NLRC4
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GOF炎性体病变的方法和治疗方案。

技术介绍

[0002]炎性体是通常对病原体或危险相关分子模式(PAMP/DAMP)产生应答而形成和激活的细胞内多蛋白复合物。炎性体病变是由单个炎性体过度激活导致分化的临床表型(取决于产生的效应细胞因子和组织特异性表达)而产生的一组机制相关的疾病。目前描述最多的炎性体病变是与NLRP3功能获得(GOF)相关的炎症综合征，也命名为隐热蛋白相关周期性综合征(CAPS)，其通过增加IL
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1β的产生导致全身性(通常包括反复发热和疲劳、皮疹)以及局部性炎症反应(涉及眼、内耳、骨、关节、和脑膜)。对于CAPS，中和IL
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1β(例如卡那吉努单抗(canakinumab))是已确立并获批用于成人和儿童患者的临床疗法(Booshehri和Hoffman 2019)。核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族含CARD结构域蛋白4(NLRC4)是NLRC4炎性体的主要组分。NLRC4炎性体对于激活革兰氏阴性胞内细菌(包括铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)和肠炎沙门氏菌(Salmonella enterica))的炎症性应答至关重要，这些细菌均表达鞭毛蛋白(Miao等人2010，Kofoed和Vance 2011，Zhao等人2011)。
[0003]在NLRC4炎性体病变的患者中，编码这种蛋白的NLRC4基因中的GOF突变可能促进NLRC4炎性体的自发形成。临床上，这导致了以促炎性炎性体效应细胞因子IL
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1β和IL
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18升高为特征的多系统自身炎症性疾病，尽管临床表型和表现不同(取决于效应细胞因子的基因型和特征)。参见图1。
[0004]已经描述了三种NLRC4炎性体病变临床表型。NLRC4
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GOF炎性体病变的特征可能在于极早发型婴儿小肠结肠炎伴重度腹泻、短暂性斑丘疹和荨麻疹性皮疹、发热、血细胞减少、肝功能障碍和凝血病，并且典型地在具有种系新发或遗传性NLRC4
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GOF突变的患者中发现。新生儿发病的多系统炎症性疾病(NOMID)的特征可能在于发热、皮疹、炎症性骨病变、感觉神经听力丧失和脑结构缺陷，并且典型地在呈现NLRC4突变的体细胞嵌合的患者中发现。家族性冷性自身炎症综合征4(FACS4)的特征可能在于发热、突出的寒冷引起的荨麻疹、关节痛、和轻度肠道炎症，并且在具有种系NLRC4突变的单个家族中有报道。NLRC4
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GOF炎性体病变患者典型地具有过度升高的IL
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1β和IL
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18，并且研究性治疗包括IL
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1受体阻断疗法(例如，施用阿那白滞素(anakinra))和IL
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1受体阻断疗法组合抗IL
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18疗法(例如，施用IL
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18BP)(Romberg等人2017；Canna等人,2014)。NOMID患者典型地具有升高的IL
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1β，并且研究性治疗包括抗IL
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1疗法。FCAS4患者典型地具有升高的IL
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18，并且研究性治疗包括施用一种或多种非甾体抗炎药(NSAID)。
[0005]如上所解释，受NLRC4
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GOF相关自身炎症性疾病影响的患者通常具有明显升高的IL
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1β和IL
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18水平。这些升高的效应细胞因子驱动MAS特征(发热、皮疹、心动过速、血细胞减少、肝功能障碍和凝血病)和以重度难治性新生儿腹泻为特征的小肠结肠炎的快速早期发展，该新生儿腹泻将NLRC4
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GOF与其他NLRC4临床表型区分开来。本专利技术人认为，在数量有限的婴儿病例中，只有抗IL
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1受体(例如，阿那白滞素)和重组IL
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18结合蛋白(例如，IL
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18BP)的组合被报告为临床有效。
[0006]因此，除了支持性医疗护理和在这种群体中获益有限的免疫抑制外，尚无获批的治疗剂直接并特异性靶向潜在的IL
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1β和IL
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18驱动的自身炎症性过程以改善NLRC4
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GOF炎性体病变儿童患者的总体临床结果。因此，对于NLRC4
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GOF炎性体病变治疗的改善，本领域存在长期未满足的需求。

技术实现思路

[0007]描述了同时靶向IL
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1β和IL
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18两者的双特异性抗体或其功能片段，用于在受试者中预防或治疗NLRC4
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GOF炎性体病变中使用。在一些情况下，该同时靶向IL
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1β和IL
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18两者的双特异性抗体或其功能片段用于在受试者中治疗自身炎症伴婴儿小肠结肠炎(AIFEC)。本文还描述了通过向有需要的受试者施用治疗有效量的同时靶向IL
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1β和IL
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18两者的双特异性抗体来预防或治疗NLRC4
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GOF炎性体病变的方法。在一些情况下，该方法包括通过施用治疗有效量的双特异性抗体来在有需要的受试者中治疗AIFEC。
[0008]本文进一步提供了用于本文所述的同时靶向IL
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1β和IL
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18两者的双特异性抗体(例如，bbmAb1)的方法或用途的特定给药方案。
[0009]本文另外描述了药物组合和药物组合物，这些药物组合和药物组合物包含a)同时靶向IL
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1β和IL
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18两者的双特异性抗体(例如，bbmAb1)，和b)至少一种另外的治疗剂，任选地存在药学上可接受的载剂，用于在治疗或预防NLRC4
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GOF炎性体病变中使用，如用于在治疗AIFEC中使用。所述的方法和用途的另外的特征和优点将从以下详细的描述中变得明显。
[0010]在第一方面，本披露涉及用于治疗或预防NLRC4炎性体病变的症状的方法，该方法包括向所述受试者施用治疗有效量的双特异性抗体，其中该抗体包含
[0011]a.第一部分，所述第一部分是免疫球蛋白，所述免疫球蛋白具有第一可变轻链(VL1)和第一本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于在有需要的受试者中治疗或预防NLRC4炎性体病变的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的双特异性抗体，其中所述抗体包含a.第一部分，所述第一部分是免疫球蛋白，所述免疫球蛋白具有第一可变轻链(VL1)和第一可变重链(VH1)以及带有异二聚化修饰的第一恒定重链(CH1)，所述VH1与IL1β特异性结合，以及b.第二部分，所述第二部分是免疫球蛋白，所述免疫球蛋白具有第二可变轻链(VL2)和第二可变重链(VH2)以及带有与所述第一恒定重链的异二聚化修饰互补的异二聚化修饰的第二恒定重链(CH2)，所述VH2与IL
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18特异性结合。2.一种用于在有需要的受试者中减慢、停滞、或减轻NLRC4炎性体病变的发展的方法，所述方法包括向所述受试者施用治疗有效量的双特异性抗体，其中所述抗体包含a.第一部分，所述第一部分是免疫球蛋白，所述免疫球蛋白具有第一可变轻链(VL1)和第一可变重链(VH1)以及带有异二聚化修饰的第一恒定重链(CH1)，所述VH1与IL1β特异性结合，以及b.第二部分，所述第二部分是免疫球蛋白，所述免疫球蛋白具有第二可变轻链(VL2)和第二可变重链(VH2)以及带有与所述第一恒定重链的异二聚化修饰互补的异二聚化修饰的第二恒定重链(CH2)，所述VH2与IL
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18特异性结合。3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述双特异性抗体的第一和第二恒定重链是人IgA、IgD、IgE、IgG或IgM，优选IgD、IgE或IgG，如人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4，优选IgG1。4.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述双特异性抗体的第一和第二恒定重链是IgG1，并且其中a.所述第一恒定重链具有产生杵结构的点突变，并且所述第二恒定重链具有产生臼结构的点突变，或b.所述第一恒定重链具有产生臼结构的点突变，并且所述第二恒定重链具有产生杵结构的点突变，并且任选地c.所述第一和第二恒定重链具有导致二硫桥的突变。5.根据权利要求1
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4所述的方法，其中：a.所述双特异性抗体的第一免疫球蛋白VH1结构域包含i.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:76，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:77，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:78；或ii.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:79，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:80，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:81；并且b.所述双特异性抗体的第一免疫球蛋白VL1结构域包含i.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:92，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:93，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:94或ii.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:95，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:96，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:97；并且c.所述双特异性抗体的第二免疫球蛋白VH2结构域包含i.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:44，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:45，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:46；或
ii.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:47，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:48，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:49；并且d.所述双特异性抗体的第二免疫球蛋白VL2结构域包含i.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:60，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:61，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:62或ii.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:63，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:64，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:65。6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中：a.所述双特异性抗体的第一免疫球蛋白VH1结构域包含氨基酸序列SEQ ID NO:85，b.所述双特异性抗体的第一免疫球蛋白VL1结构域包含氨基酸序列SEQ ID NO:101，c.所述双特异性抗体的第二免疫球蛋白VH2结构域包含氨基酸序列SEQ ID NO:53，并且d.所述双特异性抗体的第二免疫球蛋白VL2结构域包含氨基酸序列SEQ ID NO:69。7.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中：a.所述双特异性抗体的第一免疫球蛋白重链包含氨基酸序列SEQ ID NO:87，b.所述双特异性抗体的第一免疫球蛋白轻链包含氨基酸序列SEQ ID NO:103，c.所述双特异性抗体的第二免疫球蛋白重链包含氨基酸序列SEQ ID NO:55，并且d.所述双特异性抗体的第二免疫球蛋白轻链包含氨基酸序列SEQ ID NO:71。8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者具有NLRC4
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GOF炎性体病变。9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者具有在NLRC4基因的核苷酸结合结构域或翼状螺旋结构域中的NLRC4
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GOF突变。10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者患有巨噬细胞活化综合征(MAS)。11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者患有自身炎症伴婴儿小肠结肠炎(AIFEC)。12.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中与不具有NLRC4炎性体病变的对照受试者群体相比，所述受试者具有过度升高的血清IL
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18和血清IL
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1β水平。13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述受试者具有>600ng/mL的血清铁蛋白水平或>20mg/L的血清C反应蛋白(CRP)。14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述NLRC4炎性体病变对用环孢素、抗TNFα治疗、全身性糖皮质激素和抗IL
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1β疗法作为单一疗法或作为其组合的治疗具有抗性。15.一种双特异性抗体，所述双特异性抗体包含a.第一部分，所述第一部分是免疫球蛋白，所述免疫球蛋白具有第一可变轻链(VL1)和第一可变重链(VH1)以及带有异二聚化修饰的第一恒定重链(CH1)，所述VH1与IL1β特异性结合，以及b.第二部分，所述第二部分是免疫球蛋白，所述免疫球蛋白具有第二可变轻链(VL2)和第二可变重链(VH2)以及带有与所述第一恒定重链的异二聚化修饰互补的异二聚化修饰的
第二恒定重链(CH2)，所述VH2与IL
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18特异性结合，用于在有需要的受试者中治疗或预防NLRC4炎性体病变中使用。16.根据权利要求15所述的用于在有需要的受试者中治疗或预防NLRC4炎性体病变中使用的双特异性抗体，其中所述双特异性抗体的第一和第二恒定重链是人IgA、IgD、IgE、IgG或IgM，优选IgD、IgE或IgG，如人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4，优选IgG1。17.根据权利要求15或16所述的用于在有需要的受试者中治疗或预防NLRC4炎性体病变中使用的双特异性抗体，其中所述双特异性抗体的第一和第二恒定重链是IgG1，并且其中a.所述第一恒定重链具有产生杵结构的点突变，并且所述第二恒定重链具有产生臼结构的点突变，或b.所述第一恒定重链具有产生臼结构的点突变，并且所述第二恒定重链具有产生杵结构的点突变，并且任选地c.所述第一和第二恒定重链具有导致二硫桥的突变。18.根据权利要求15
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17中任一项所述的用于在有需要的受试者中治疗或预防NLRC4炎性体病变中使用的双特异性抗体，其中：a.所述双特异性抗体的第一免疫球蛋白VH1结构域包含i.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:76，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:77，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:78；或ii.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:79，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:80，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:81；并且b.所述双特异性抗体的第一免疫球蛋白VL1结构域包含iii.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:92，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:93，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:94或iv.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:95，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:96，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:97；并且c.所述双特异性抗体的第二免疫球蛋白VH2结构域包含v.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:44，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:45，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:46；或vi.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:47，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:48，并且所述CDR3具有氨基酸序列SEQ ID NO:49；并且d.所述双特异性抗体的第二免疫球蛋白VL2结构域包含vii.高变区CDR1、CDR2和CDR3，所述CDR1具有氨基酸序列SEQ ID NO:60，所述CDR2具有氨基酸序列SEQ ID NO:61，并且所述CDR3具有氨基酸序列SE...

【专利技术属性】
技术研发人员：G，
申请(专利权)人：诺华股份有限公司，
类型：发明
国别省市：