IL27Rα结合分子及使用方法技术

本发明专利技术涉及生物活性分子和组合物及其使用方法，所述生物活性分子包括特异性结合至人IL27Rα的胞外结构域的单域抗体(sdAb)，组合物包括这种抗体。物包括这种抗体。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】IL27R
α
结合分子及使用方法
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2020年8月5日提交的美国临时申请号63/061,562、2020年9月15日提交的美国临时申请号63/078,745和2021年1月11日提交的美国临时申请号63/135,884的优先权权益，其公开通过引用全文纳入本文以用于所有目的。


[0003]本专利技术涉及生物活性分子、组合物及其使用方法，所述生物活性分子包括特异性结合至IL27受体α(IL27Rα)的胞外结构域的单域抗体，所述组合物包括这种单域抗体。

技术介绍

[0004]细胞因子IL
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27是一种异二聚体细胞因子，由两个非共价连接的亚基p28和EBI3组成。p28亚基属于4
‑
螺旋束细胞因子家族，而EBI3是可溶性细胞因子受体的可能的最短形式，具有两个典型的细胞因子结合结构域(Pflanz S,等,Immunity.2002年6月；16(6):779
‑
90)。
[0005]白细胞介素
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27受体(IL27R)是白细胞介素
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27(IL27)的一种I型细胞因子受体。IL27R是一种异二聚体，由IL27Rα亚基和糖蛋白130(IL6Rb)构成。IL27由抗原呈递细胞表达，并诱导免疫系统中不同群体的T细胞分化。IL27对IL27R的结合起始了几种Jak家族激酶的胞内信号转导，这些激酶诱导STAT1和STAT3的磷酸化。在激活的T细胞中，IL27主要通过STAT3[23]发出信号，而在记忆B细胞中，它主要通过STAT3发出信号。IL27已显示出促炎和抗炎特性，促炎或抗炎反应受表达IL27R的细胞的环境影响。
[0006]IL27Rα亚基(也称为TCCR
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或WSX
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1受体)是IL27受体的专有亚基。成熟的(去除信号肽的)IL27Rα是604个氨基酸的多肽，具有484个氨基酸的胞外结构域。IL27Rα的胞外结构域有5个结构域：D1
‑
D5。D1和D2是主要的细胞因子结合结构域，而III型纤连蛋白(Fn3)结构域D3、D4和D5在较小程度上参与配体识别。基于结构分析，当IL27配体结合时，Fn3结构域对复合物中的结合没有贡献。虽然结构域D1和D2是高度保守的，但Fn3结构域的序列更可变。
[0007]IL27表现出对IL27Ra亚基的高(纳摩尔)亲和力。[IL27/IL27Rα]复合物与IL27Ra缔合，以完成IL27受体信号转导复合物。gp130对[IL27/IL27Rα]复合物的结合比IL
‑
27和IL
‑
27R之间的相互作用弱得多。(Pflanz S,等,J Immunol.2004年2月15日；172(4):2225
‑
31)，这在共享细胞因子受体亚基方面某种程度上是经典的。由于各个受体的
‘
C
’
形，IL
‑
27R的D5结构域和gp130的D6结构域在膜处紧密接近。这是受体复合物能够在两种受体的胞内结构域引发JAK结合所需要的。
[0008]尽管单克隆抗体是用于检测和定量蛋白质的最广泛的试剂，但单克隆抗体是约150kDa的大分子，其大小可能潜在地限制了其在与多个试剂竞争近表位识别的试验中的使用。一类独特的免疫球蛋白，含有重链结构域，但缺乏轻链结构域(通常称为重链”抗体(HCAb))存在于骆驼科动物中，包括单峰骆驼、双峰驼、野生双峰驼，美洲驼、羊驼、骆马和原驼，以及软骨鱼类，如鲨鱼。HCAb的分离的可变结构域区域被称为VHH(反映其
“
可变
‑
重
‑
重”结构的缩写)或(Ablynx)。单域VHH抗体具有体积小(～12
‑
14kD)、分子量约为常规哺乳动物IgG类抗体的十分之一的优点，这有助于这些VHH分子与靶标的抗原决定簇的结合，而常规单克隆IgG形式可能无法接近这些决定簇(Ingram等.,2018)。此外，VHH单域抗体通常具有高热稳定性特征，有助于将药剂分布到难以或不可能维持冷链的地理区域。这些性质，特别是结合不需要重/轻链配对(如IgG抗体的情况)和简单制造(如在细菌表达系统中)的简单噬菌体展示发现方法，使得VHH单域抗体在多种应用中有用，包括成像剂和治疗剂的开发。

技术实现思路

[0009]本专利技术提供了特异性结合至IL27Ra的多肽。
[0010]本专利技术提供了特异性结合IL27Ra的胞外结构域的多肽。
[0011]本专利技术提供了一种IL27Ra结合分子，其特异性结合至人IL27Ra(hIL27Ra)的胞外结构域。
[0012]在一些实施方式中，IL27Ra结合分子包括单域抗体(sdAb)，其特异性结合至人IL27Ra的胞外域。
[0013]在一些实施方式中，IL27Ra结合分子是sdAb，sdAb包含一组CDR，对应于CDR1、CDR2和CDR3，如下表1的行所示。
[0014]在一些实施方式中，IL27Ra结合分子包含如下表1的行中所述的CDR1、CDR2和CDR3，其中CDR1、CDR2和CDR3相对于下表1的行中所述的序列可各自独立地包含至少90％(例如，91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％)的序列同一性，或具有0、1、2或3个氨基酸变化，任选保守的氨基酸变化。
[0015]在一些实施方式中，IL27Ra结合分子由下述单域抗体(sdAb)组成、任选地基本由下述单域抗体组成、或任选地包括：与SEQ ID NO:2
‑
25中任一多肽序列具有至少80％、或者至少85％、或者至少90％、或者至少95％、或者至少98％、或者至少99％同一性(或除了1、2、3或4个氨基酸是任选的保守氨基酸取代之外是相同的)或100％的同一性的单域抗体(sdAb)，如下表1所示。
[0016][0017][0018][0019][0020][0021][0022][0023][0024]在一些实施方式中，将前文的CDR组纳入人源化VHH框架中以提供“人源化”sdAb IL27Ra结合分子。
[0025]本专利技术还提供了用于制备本专利技术的IL27Ra结合分子的化学或重组过程的方法。
[0026]本专利技术还提供了编码IL27Ra结合分子的核酸。下表2提供了编码如本文所述的IL27Ra结合分子的DNA序列的示例。
[0027][0028][0029][0030][0031][0032][0033][0034][0035][0036][0037][0038][0039]在一些实施方式中，IL27Ra是鼠IL27Ra。
[0040]在一些实施方式中，IL27Ra结合分子包括单域抗体(sdAb)，其特异性结合至小鼠或鼠IL27Ra(mIL27Ra)的胞外结构域。
[0041]在一些实本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种特异性结合至IL2Rb的胞外结构域的IL27Rα结合分子。2.如权利要求1所述的IL27Rα结合分子，其中所述IL2Rb结合分子包括单域抗体(sdAb)。3.如权利要求2所述的IL27Rα结合分子，其中所述sdAb包含互补决定区1(CDR1)、CDR2和CDR3，如下表的行中所示：
4.如权利要求2或3所述的IL27Rα结合分子，其中所述sdAb与选自SEQ ID NO:2
‑
25中的任一多肽序列具有至少80％、或至少85％、或至少90％、或至少95％、或至少98％、或至少99％同一性或100％同一性。5.如权利要求2所述的IL27Rα结合分子，其中所述sdAb包含互补决定区1(CDR1)、CDR2和CDR3，如下表的行中所示：
6.如权利要求2所述的IL27Rα结合分子，其中所述sdAb与选自SEQ ID NO:122、126、130、134、138、142、146、150、154、15...

【专利技术属性】
技术研发人员：R，
申请(专利权)人：辛德凯因股份有限公司，
类型：发明
国别省市：