一种窖泥己酸菌液的培养方法技术

本发明专利技术涉及窖泥己酸菌液技术领域，提出了一种窖泥己酸菌液的培养方法，包括以下步骤：S1、选取窖泥水浴处理后进行富集培养，得到富集培养液；S2、己酸菌菌种分离后接种至RCM培养基进行培养，得到待扩大培养的己酸菌菌种；S3、将己酸菌种混合甲烷杆菌菌液进行扩大培养，得到窖泥己酸菌液；所述扩大培养为己酸菌种在扩大培养基中进培养，所述S3中扩大培养基，包括以下重量份组分：2

【技术实现步骤摘要】
一种窖泥己酸菌液的培养方法


[0001]本专利技术涉及窖泥己酸菌液
，具体的，涉及一种窖泥己酸菌液的培养方法。

技术介绍

[0002]浓香型白酒有芳香浓郁、绵柔甘洌、香味协调、入口甜、落口绵、尾净余长等特点。己酸菌是浓香型白酒生产中非常重要的产酸微生物，由它代谢产生的己酸与大曲发酵产生的酒精生成己酸乙酯，是浓香型大曲酒的主体香成分。己酸菌培养液可广泛应用于浓香型大曲酒的灌窖、窖池保养、人工窖泥培养、酯化液的制作等，以改善和提高浓香型大曲酒的质量。
[0003]但是，在人工制备窖泥己酸菌液时，存在窖泥己酸菌液中己酸菌菌体数量少、产己酸量低的问题。

技术实现思路

[0004]本专利技术提出一种窖泥己酸菌液的培养方法，解决了相关技术中窖泥己酸菌液中己酸菌菌体数量少、产己酸量低的问题。
[0005]一种窖泥己酸菌液的培养方法，包括以下步骤：S1、选取窖泥水浴处理后进行富集培养，得到富集培养液；S2、己酸菌菌种分离后接种至RCM培养基进行培养，得到待扩大培养的己酸菌菌种；S3、将己酸菌种混合甲烷杆菌菌液进行扩大培养，得到窖泥己酸菌液；所述扩大培养为己酸菌种在扩大培养基中进培养，所述S3中扩大培养基包括以下重量份组分：2
‑
3份醋酸钠、0.01
‑
0.03份磷酸氢二钾、0.1
‑
0.2份硫酸镁、0.2
‑
0.4份硫酸铵、1
‑
1.5份酵母粉、8
‑
10份碳酸钙、0.2
‑/>0.4份脱氢乙酸钠、0.2
‑
0.4份山梨酸钾、1000份水。
[0006]作为进一步技术方案，所述甲烷杆菌菌液为布氏甲烷杆菌菌液。
[0007]作为进一步技术方案，所述布氏甲烷杆菌菌液为将布氏甲烷杆菌粉活化后在所述扩大培养基中培养得到；布氏甲烷杆菌粉，货号为ZKJY
‑
布氏乳杆菌，购自山东中科嘉亿生物工程有限公司。
[0008]作为进一步技术方案，所述窖泥为窖壁上距离窖底15
‑
25cm处的窖泥。
[0009]作为进一步技术方案，所述甲烷杆菌菌液的菌体数量为1
×
104‑5×
104个/mL。
[0010]作为进一步技术方案，所述甲烷杆菌菌液的菌体数量为2.5
×
104个/mL。
[0011]作为进一步技术方案，所述甲烷杆菌菌液的添加量为培养基质量的1
‑
3%。
[0012]作为进一步技术方案，所述甲烷杆菌菌液的添加量为培养基质量的2%。
[0013]作为进一步技术方案，所述扩大培养时己酸菌种的接种量为培养基质量的10%。
[0014]作为进一步技术方案，所述S1中富集培养为将窖泥在富集培养基中进行培养；所述富集培养基包括以下重量份组分：2.5
‑
3.5份葡萄糖、2
‑
3份蛋白胨、2
‑
2.5份牛肉膏、0.05
‑
0.1份磷酸氢二钾、1
‑
2份碳酸钙、0.3
‑
0.8份乙酸铵、0.03
‑
0.06份硫酸锌、1000份蒸馏
水。
[0015]作为进一步技术方案，所述富集培养为将窖泥在85℃水浴处理15min后，加入到五倍质量的富集培养基中，再加入无水乙醇后，封口，在0.08MPa下抽真空，在35℃培养至产气时停止培养，得到富集培养液；作为进一步技术方案，所述窖泥与富集培养基的质量比为1:5。
[0016]作为进一步技术方案，所述培养的温度为33
‑
35℃。
[0017]作为进一步技术方案，所述S2中己酸菌菌种分离为通过分离培养基从富集培养液中分离己酸菌种。
[0018]作为进一步技术方案，所述分离培养基包括以下重量份组分：4.5
‑
5.5份乙酸钠、1.5
‑
1.8份酵母粉、1
‑
1.5份酵母膏、0.3
‑
0.5份磷酸氢二钠、0.3
‑
0.5份硫酸铵、0.15
‑
0.2份硫酸镁、1000份蒸馏水。
[0019]作为进一步技术方案，所述分离培养为将富集培养液离心后，倒掉50%上清液，剩余部分在85℃水浴处理10min后，加入到分离培养基中，再加入无水乙醇后，封口，在0.07MPa下抽真空，在34℃培养5d后，挑选菌体，进行镜检，得到己酸菌菌种，再接种至RCM培养基进行培养，得到待扩大培养己酸菌菌种。
[0020]作为进一步技术方案，所述扩大培养为将己酸菌菌种加入到扩大培养基中，再加入乙醇和布氏甲烷杆菌菌液，密封，培养，得到窖泥己酸菌液。
[0021]作为进一步技术方案，所述培养的温度为33
‑
35℃，培养的时间为5
‑
7d。
[0022]本专利技术的技术方案如下：本专利技术的工作原理及有益效果为：1、本专利技术对己酸菌进行扩大培养时添加了甲烷杆菌菌液，甲烷杆菌可以促进己酸菌的生长，提高窖泥己酸菌液中己酸菌的菌体数量，而且本专利技术通过限定甲烷杆菌菌液的添加量和菌体量，不仅提高了窖泥己酸菌液中的菌体数，还提高了己酸的含量。
[0023]2、本专利技术通过对培养过程中富集培养基、接种培养基和扩大培养基中各组分的优化，提高了各培养基的性能，通过富集培养、接种培养、扩大培养这样连续培养的过程，提高了窖泥己酸菌液中的菌体量和己酸含量。
具体实施方式
[0024]下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都涉及本专利技术保护的范围。
[0025]实施例及对比例中：窖泥均为选取窖壁上距离窖底15
‑
25cm处的窖泥混合后得到；布氏甲烷杆菌菌液的配置方法为：将布氏甲烷杆菌粉活化后，加入到本专利技术实施例1的扩大培养基中，在37℃培养得到。
[0026]实施例1窖泥己酸菌液的培养方法，包括以下步骤：S1、将窖泥在85℃水浴处理15min后，加入到五倍质量的富集培养基中，再加入无
水乙醇后，封口，在0.08MPa下抽真空，在35℃培养至产气时停止培养，得到富集培养液；其中富集培养基的制备：将2.5份葡萄糖、2份蛋白胨、2份牛肉膏、0.05份磷酸氢二钾、1份碳酸钙、0.3份乙酸铵、0.03份硫酸锌、1000份蒸馏水混合后，121℃灭菌30min，得到富集培养基；S2、将富集培养液离心后，倒掉50%上清液，剩余部分在85℃水浴处理10min，加入到分离培养基中，再加入无水乙醇后，封口，在0.07MPa下抽真空，在34℃培养5d后，挑选菌体，进行镜检，得到己酸菌菌种，再接种至RCM培养基进行培养，得到待扩大培养己本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种窖泥己酸菌液的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、选取窖泥水浴处理后进行富集培养，得到富集培养液；S2、己酸菌菌种分离后，接种至RCM培养基进行培养，得到待扩大培养的己酸菌菌种；S3、将己酸菌种混合甲烷杆菌菌液进行扩大培养，得到窖泥己酸菌液；所述扩大培养为己酸菌种在扩大培养基中进培养，所述S3中扩大培养基包括以下重量份组分：2
‑
3份醋酸钠、0.01
‑
0.03份磷酸氢二钾、0.1
‑
0.2份硫酸镁、0.2
‑
0.4份硫酸铵、1
‑
1.5份酵母粉、8
‑
10份碳酸钙、0.2
‑
0.4份脱氢乙酸钠、0.2
‑
0.4份山梨酸钾、1000份水。2.根据权利要求1所述的一种窖泥己酸菌液的培养方法，其特征在于，所述甲烷杆菌菌液的菌体数量为1
×
104‑5×
104个/mL。3.根据权利要求1所述的一种窖泥己酸菌液的培养方法，其特征在于，所述甲烷杆菌菌液的添加量为培养基质量的1
‑
3%。4.根据权利要求1所述的一种窖泥己酸菌液的培养方法，其特征在于，所述扩大培养时己酸菌种的接种量为培养基质量的10%。5.根据权利要求1所述的一种窖泥己酸菌液的培养方法，其特征在于，所述S1中富集培养为将窖泥在富集培养基中进行培养。6.根据权利要求5所述的一种窖...

【专利技术属性】
技术研发人员：李若任，孙一博，苗子健，师雪萍，乔会娟，白松，张宇，孙颖，
申请(专利权)人：保定五合窖酒业有限公司，
类型：发明
国别省市：