一种用于吨桶生物破乳菌剂及其筛选方法技术

本发明专利技术公开了一种用于吨桶生物破乳菌剂及其筛选方法，属于生物工程领域，方法步骤包括：采集金属加工厂底层废液加入到筛选培养基中，培养后干燥并粉碎加入到富集培养基中，培养得到兼性厌氧菌液，用排油圈法挑选出有效的用于吨桶生物破乳菌剂；筛选培养基含有糠醛二线和乳化剂；富集培养基pH=8.0，表面覆盖有甘油。该方法筛选出的菌剂中含有兼性厌氧菌群，可对全合成切削液废水进行生物破乳，筛选出的菌剂可低成本地处理全合成切削液废水，无需配合额外的设备，无需专门场地进行分级处理，可在吨桶中直接破乳，且兼性厌氧菌的生物破乳率更好，在保证降解效果的基础上进一步降低废液处理的时间，提高生物降解工艺的时间效率。提高生物降解工艺的时间效率。提高生物降解工艺的时间效率。

【技术实现步骤摘要】
一种用于吨桶生物破乳菌剂及其筛选方法


[0001]本专利技术涉及一种用于吨桶生物破乳菌剂及其筛选方法，属于生物工程领域。

技术介绍

[0002]全合成切削液的用量大，难处理。金属加工液废液中的全合成切削液通常含有矿物油、动植物油、表面活性剂、防锈剂等，多数COD值高达几十万，直接外排对生态环境和人类健康造成巨大的危害。金属加工液在行业内被称之为“癌症水”，主要的原因是其废液体系稳定，极难处理；成分复杂，处理难度大；处理成本高。
[0003]处理金属加工废液，目前市面上多选择化学处理，但化学试剂会二次污染环境。如果采用膜过滤处理，针对含油废水，换膜频率高、成本大。相比较于化学表面活性剂，生物破乳剂在高效性和环保性方面具有更加显著的优势，选择生物破乳，可充分利用其优越性，达到环保无毒害，成本低等优点。现有技术中生物破乳的缺点在于，操作工艺复杂，通常需要较多的设备配合或者需要专门的场地进行分级处理。

技术实现思路

[0004]为了克服现有技术的不足，本专利技术提供一种用于吨桶生物破乳菌剂及其筛选方法，筛选得到的菌剂可以直接用于吨桶破乳，无需特殊设备配合，无需专门场地分级处理。
[0005]本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：第一方面，本申请提供一种用于吨桶生物破乳菌剂筛选方法，步骤包括：采集金属加工厂底层废液，将所述底层废液加入到筛选培养基中，培养后干燥并粉碎所述筛选培养基得到菌粉，将所述菌粉加入到富集培养基中，培养得到兼性厌氧菌液，用排油圈法从所述兼性厌氧菌液中挑选出有效的所述用于吨桶生物破乳菌剂；所述筛选培养基的培养液含有糠醛二线和乳化剂，pH=8.0；所述富集培养基的培养液pH=8.0，表面覆盖有甘油。
[0006]本申请提供的用于吨桶生物破乳菌剂筛选方法筛选出的菌剂中含有兼性厌氧菌群，可对全合成切削液废水进行生物破乳，筛选过程较快，筛选出的菌剂可低成本地处理全合成切削液废水，无需配合额外的设备，无需专门场地进行分级处理，兼性厌氧菌适应于在吨桶环境直接破乳，且兼性厌氧菌的生物破乳率更好，在保证降解效果的基础上进一步降低废液处理的时间，提高生物降解工艺的时间效率。
[0007]进一步地，所述乳化剂为sp80和tw80，所述筛选培养基的培养液按质量计包括：100份水、1份含氮无机盐和0.5份~2份乳液，所述乳液包括所述糠醛二线和所述乳化剂，按质量计，所述糠醛二线与所述乳化剂的比例为，所述糠醛二线：所述sp80：所述tw80=100：10~30：20~40。
[0008]采用该乳液配方可模拟金属加工切削液，适应多种金属加工工序的废液作为菌种采集来源，并且用含氮无机盐代替常规的牛肉膏、蛋白胨作为氮源，使糠醛二线作为液态培养基的最主要碳源，更有利于筛选出适宜在吨桶繁殖的菌群。
[0009]更进一步地，所述筛选培养基的培养液中按质量计还含有0.3份~0.5份烷基磺酸
钠和0.3份~0.5份脂肪醇醚硫酸钠，有利于筛选出的菌群适应吨桶中往往存在洗涤水的环境。
[0010]更进一步地，所述筛选培养基的培养液中按质量计还含有0.03份~0.05份杀菌剂。
[0011]具体为广谱杀菌剂，例如舒美针对细菌的WS
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PLUS、针对真菌的SPT
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40、针对细菌的MBX、针对真菌的OK；米林针对细菌的BIT
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20、针对细菌的MBM、针对细菌的BK等。在筛选培养基中加入低浓度的吨桶常用杀菌剂，更有利于使菌群适应直接在吨桶破乳的工作环境。
[0012]进一步地，所述将所述底层废液加入到筛选培养基中，培养后干燥并粉碎所述筛选培养基得到菌粉的步骤包括：按质量将1份所述底层废液加入到具有100份~200份培养液的所述筛选培养基中，36℃培养24小时，干燥并粉碎所述筛选培养基得到多组菌粉。
[0013]进一步地，所述将所述菌粉加入到富集培养基中，培养得到兼性厌氧菌液的步骤包括：按质量在具有50份培养液的所述富集培养基表面覆盖3份~6份甘油，将1份~2份所述菌粉接种到覆盖了甘油的所述富集培养基中，36℃培养24小时，培养得到兼性厌氧菌液。
[0014]进一步地，所述富集培养基的培养液按质量包括牛肉膏3份、蛋白胨10份、NaCl 5份、水1000份。富集培养基用于使菌群快速增殖，滴加甘油前，不排除氧气，覆盖甘油后再接种菌粉，如此能够在非严格厌氧环境中富集，得到的菌群具有兼性厌氧的特性，适应吨桶顶部有桶口接触空气的工作环境。
[0015]进一步地，所述用排油圈法从所述兼性厌氧菌液中挑选出有效的所述用于吨桶生物破乳菌剂的步骤包括：在测试培养皿中，加入20 mL去离子水，再滴加100 uL由苏丹红染色的甘油以形成油膜，取10 uL所述兼性厌氧菌液加入到所述测试培养皿中，根据苏丹红褪色范围大小挑选出有效的所述用于吨桶生物破乳菌剂。
[0016]进一步地，所述测试培养皿的直径为90mm，10秒内苏丹红褪色范围直径在50mm以上的所述兼性厌氧菌液为有效的所述用于吨桶生物破乳菌剂，能够快速得到该菌株对全合成切削液废液的生物破乳性的评定。
[0017]第二方面，本申请提供一种用于吨桶生物破乳菌剂，由第一方面所述方法筛选而得，含有巴氏醋杆菌、布氏乳杆菌。该菌剂的菌群为兼性厌氧菌群，可用吨桶存放金属加工废液，将该菌剂投加到吨桶中，在桶口敞开状态下直接实现吨桶破乳，无需特定设备，无需分级处理的场地。
[0018]本专利技术的有益效果是：本专利技术筛选出的菌剂中含有兼性厌氧菌群，可对全合成切削液废水进行生物破乳，筛选过程较快，筛选出的菌剂可低成本地处理全合成切削液废水，无需配合额外的设备，无需专门场地进行分级处理，兼性厌氧菌适应于在吨桶环境直接破乳，且兼性厌氧菌的生物破乳率更好，在保证降解效果的基础上进一步降低废液处理的时间，提高生物降解工艺的时间效率。
附图说明
[0019]图1是测试三处来源菌株破乳能力的结果。
[0020]图2是3号菌剂的测序结果。
[0021]图3是本申请实施例的菌剂在实验室破乳时造成废液变化的对比。
[0022]图4是吨桶A和吨桶B受本申请实施例的菌剂处理后的结果对比。
具体实施方式
[0023]生物破乳具有高效、环保的优点，但生物破乳剂在使用前往往需要转用生化池对生物破乳剂进行预处理，在使用时需要特定设备提供适应的繁殖环境，例如调节温度，调节氧气、氮气或二氧化碳的浓度，尽管运行后成本低，但前期改造花费较大，较为麻烦。
[0024]针对该问题，本申请提供一种用于吨桶生物破乳菌剂筛选方法，步骤包括：采集金属加工厂底层废液，将底层废液加入到筛选培养基中，培养后干燥并粉碎筛选培养基得到菌粉，将菌粉加入到富集培养基中，培养得到兼性厌氧菌液，用排油圈法从兼性厌氧菌液中挑选出有效的用于吨桶生物破乳菌剂；筛选培养基的培养液含有糠醛二线和乳化剂，pH=8.0；富集培养基的培养液pH=8.0，表面覆盖有甘油。
[0025]本申请适应生物破乳全合成切削液本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种用于吨桶生物破乳菌剂筛选方法，其特征在于，步骤包括：采集金属加工厂底层废液，将所述底层废液加入到筛选培养基中，培养后干燥并粉碎所述筛选培养基得到菌粉，将所述菌粉加入到富集培养基中，培养得到兼性厌氧菌液，用排油圈法从所述兼性厌氧菌液中挑选出有效的所述用于吨桶生物破乳菌剂；所述筛选培养基的培养液含有糠醛二线和乳化剂，pH=8.0；所述富集培养基的培养液pH=8.0，表面覆盖有甘油。2.根据权利要求1所述的用于吨桶生物破乳菌剂筛选方法，其特征在于，所述乳化剂为sp80和tw80，所述筛选培养基的培养液按质量计包括：100份水、1份含氮无机盐和0.5份~2份乳液；所述乳液包括所述糠醛二线和所述乳化剂，按质量计，所述糠醛二线与所述乳化剂的比例为，所述糠醛二线：所述sp80：所述tw80=100：10~30：20~40。3.根据权利要求2所述的用于吨桶生物破乳菌剂筛选方法，其特征在于，所述筛选培养基的培养液中按质量计还含有0.3份~0.5份烷基磺酸钠和0.3份~0.5份脂肪醇醚硫酸钠。4.根据权利要求2所述的用于吨桶生物破乳菌剂筛选方法，其特征在于，所述筛选培养基的培养液中按质量计还含有0.03份~0.05份杀菌剂。5.根据权利要求1所述的用于吨桶生物破乳菌剂筛选方法，其特征在于，所述将所述底层废液加入到筛选培养基中，培养后干燥并粉碎所述筛选培养基得到菌粉的步骤包括：按质量将1份所述底层...

【专利技术属性】
技术研发人员：程慧杰，赵朋飞，黄雯，李小磊，伍德民，
申请(专利权)人：季华实验室，
类型：发明
国别省市：