一种提高苜蓿体细胞胚胎发生率的方法技术

一种提高苜蓿体细胞胚胎发生率的方法，涉及植物组织培养方法技术领域，选取苜蓿种子，萌发无菌苗；切断植株上部扦插于ＭＳ↓［０］培养基上培养，得到２株遗传背景完全一致的植株，连续繁殖成为一个无性系；取叶片诱导体细胞胚胎发生，将体细胞胚胎发生率高的无性系植株连同培养瓶开瓶盖炼苗，移到营养土中培育后移栽到田间；取田间成活植株叶片诱导体细胞胚胎发生，按常规程序萌发，获得完整的再生植株。本发明专利技术通过对苜蓿品种的个体种子体细胞胚胎发生能力的筛选，大幅度提高了苜蓿体细胞胚胎发生率，并且具有可重复性。

【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物组织培养方法
，是一种培养苜蓿体细胞胚胎的方法。
技术介绍
苜蓿为多年生宿根性草本植物，是著名的优良牧草，具有营养价值高、适口性好、消化率高、抗寒、抗旱、耐瘠薄、抗风沙等特点。在生产上常常因为病虫草害的发生严重影响苜蓿草的产量和品质。随着分子生物学和分子遗传学的发展，利用转基因技术将外源基因转入植物中改良某些不良性状已经成为现代分子育种的重要方法之一，组织培养技术是转基因工作的基础。苜蓿组织培养的现状是利用子叶和叶片等外植体可以直接形成体细胞胚，也可以通过愈伤组织或悬浮细胞培养形成。其常规程序如下1、种子灭菌随机选取饱满种子在流水下冲洗30min，70％酒精振荡30～60s，然后放入0.1％升汞振荡灭菌8～15min，无菌水冲洗5遍，灭菌滤纸吸水，然后接种到1/2MS培养基上，萌发无菌苗。培养条件光周期为16h，光照强度1000～2000lx，昼夜温度为25/18℃。2、无菌苗子叶或叶片接种于附加2.0mg/L的2，4_D，并且补加适宜浓度的NAA、KT和BA等激素的MS培养基上，诱导体细胞胚胎发生。添加一些有机物有利于提高体细胞胚胎发生率，但提高幅度极其有限，并本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种提高苜蓿体细胞胚胎发生率的方法，其特征由以下步骤完成，选取苜蓿种子，萌发无菌苗；切断植株上部扦插于ＭＳ↓［０］培养基上培养，得到２株遗传背景完全一致的植株，连续繁殖，成为一个无性系；取各无性系植株叶片，诱导体细胞胚胎发生，统计体细胞胚胎发生率；将体细胞胚胎发生率为７０％～１００％的无性系植株连同培养瓶开瓶盖炼苗，移到营养土中培育后移栽到田间；取田间成活植株叶片诱导体细胞胚胎发生，产生的体细胞胚按常规程序萌发，获得完整的再生植株。

【技术特征摘要】
1.一种提高苜蓿体细胞胚胎发生率的方法，其特征由以下步骤完成，选取苜蓿种子，萌发无菌苗；切断植株上部扦插于MS0培养基上培养，得到2株遗传背景完全一致的植株，连续繁殖，成为一个无性系；取各无性系植株叶片，诱导体细胞胚胎发生，统计体细胞胚胎发生率；将体细胞胚胎发生率为70％～100％的无性系植株连同培养瓶开瓶盖炼苗，移到营养土中培育后移栽到田间；取田间成活植株叶片诱导体细胞胚胎发生，产生的体细胞胚按常规程序萌发，获得完整的再生植株。2.根据权利要求1所述的提高苜蓿体细胞胚胎发生率的方法，由以下步骤完成(1)、随机选取饱满的苜蓿种子，按照常规程序获得无菌苗；(2)、每一粒种子的无菌苗萌发5～15天，苗高7～12cm时，都在3～8cm处切断，植株的上部扦插于MS0培养基上，5～15天即可...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘艳芝，王中伟，王玉民，董英山，吕德扬，
申请(专利权)人：吉林省农业科学院，
类型：发明
国别省市：22[中国|吉林]