一种PLK1的干扰RNA及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种PLK1的干扰RNA及其应用，属于生物医药技术领域。本发明专利技术公开了一种敲低PLK1的试剂在制备防治假性变态反应药物中的应用，所述试剂包括干扰PLK1基因表达的siRNA，该siRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：5

【技术实现步骤摘要】
一种PLK1的干扰RNA及其应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，特别是涉及一种PLK1的干扰RNA及其应用。

技术介绍

[0002]随着人们生活环境与生活方式的改变，由各种因素诱导的变态反应已经成为威胁人类健康的重要问题之一，严重影响人们的身心健康，为人们的生活质量和整个社会造成巨大负担。变态反应分为速发型的I型变态反应和延迟型的II、III、IV型变态反应，该类反应均与人体免疫调控相关。除了这些由免疫系统介导的变态反应之外，临床中还存在一种反应症状与I型变态反应相似但非免疫介导的不良反应，目前未发现该种反应机制与免疫途径相关，被称为假性变态反应(pseudoallergic reactions)，也称作非免疫性超敏反应(non
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immune hypersensitivity reaction)。
[0003]假性变态反应与IgE介导的I型变态反应不同，I型变态反应涉及到免疫途径的参与，而假性变态反应并没有涉及到免疫系统，其不会引起抗原抗体反应，而是会直接刺激肥大细胞(mast cells,MCs)脱颗粒，促使其释放组胺等炎症因子，引起过敏样症状的产生。MC是假性变态反应最为关键的效应细胞，在接受到外来刺激时，MC首先释放储存的细胞因子和炎症介质，并随着病情进展进一步分泌新合成的炎症介质，诱导MCs脱颗粒，引起过敏样症状的产生。
[0004]Polo样激酶(PLK)是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，在真核细胞中广泛表达，PLK包括五个家族成员，即PLK1(Polo样激酶1)、PLK2、PLK3、PLK4、PLK5，PLK家族成员的主要区别在于C端Polo
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box结构域(polo
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box domai，PBD)的数量不同，因此表达的功能也不同，其中，PLK1在调节细胞分裂、维持基因组稳定性、纺锤体组装、有丝分裂和DNA损伤反应中起重要作用。目前已有多个研究证实PLK1作为癌基因的作用，其在多种原发性肿瘤组织中高表达，如乳腺癌、胃癌、肝癌、前列腺癌、结直肠癌、食道癌等。但是，目前尚未有关于PLK1调控假性变态反应的研究报道。

技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种PLK1的干扰RNA及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，本专利技术发现敲低PLK1表达水平能够明显改善假性变态反应，为探究假性变态反应的潜在机制和治疗方法提供理论基础和实验依据。
[0006]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0007]本专利技术提供一种敲低PLK1的试剂在制备防治假性变态反应药物中的应用，所述试剂包括干扰PLK1基因表达的siRNA。
[0008]进一步地，所述siRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：5
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6所示。
[0009]进一步地，所述siRNA通过改善肥大细胞脱颗粒的形态变化，减少细胞凋亡，以及降低细胞的组胺和β
‑
氨基己糖苷酶释放量，发挥治疗假性变态反应的作用。
[0010]本专利技术还提供一种防治假性变态反应的药物，包含干扰PLK1基因表达的siRNA。
[0011]进一步地，所述siRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：5
‑
6所示。
[0012]进一步地，所述药物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、注射剂或喷雾剂。
[0013]进一步地，所述药物服用方法为口服或非经肠胃形式服用。
[0014]本专利技术还提供一种PLK1的干扰RNA，所述干扰RNA具有如SEQ ID NO：5
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6所示的核苷酸序列。
[0015]本专利技术公开了以下技术效果：
[0016]本专利技术经体外细胞实验，证实敲低PLK1表达水平能够改善C48/80诱导的RBL
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2H3细胞脱颗粒时的形态变化，减少细胞凋亡，降低HA和β
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HEX释放量，对假性变态反应具有明显的改善作用。本专利技术证实PLK1对假性变态反应具有显著的调控作用，为探究假性变态反应的潜在机制和治疗方法提供理论基础和实验依据。
附图说明
[0017]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0018]图1为150nM RNAOligo siRNA转染荧光图(bar＝100μm)；(A)明场；(B)荧光；
[0019]图2为PLK1定量PCR结果，与正常组比，**p<0.01；
[0020]图3为PLK1蛋白表达结果(n＝3)；(a)Western Blot检测PLK1敲低情况；(b)灰度分析结果，与正常组比，**p<0.01；
[0021]图4为敲低PLK1影响RBL
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2H3细胞脱颗粒的中性红染色结果(bar＝100μm)；
[0022]图5为敲低PLK1对RBL
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2H3细胞释放β
‑
Hex的影响，与正常组比，**p<0.01；与模型组比，##p<0.01；
[0023]图6为敲低PLK1对RBL
‑
2H3细胞释放组胺的影响，与正常组比，**p<0.01；与模型组比，##p<0.01；
[0024]图7为敲低PLK1对RBL
‑
2H3细胞凋亡的影响(bar＝200μm)；
[0025]图8为敲低PLK1对RBL
‑
2H3细胞凋亡情况统计，与正常组比，**p<0.01；与模型组比，##p<0.01。
具体实施方式
[0026]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0027]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0028]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的
实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
[0029]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种敲低PLK1的试剂在制备防治假性变态反应药物中的应用，其特征在于，所述试剂包括干扰PLK1基因表达的siRNA。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述siRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO：5
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6所示。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述siRNA通过改善肥大细胞脱颗粒的形态变化，减少细胞凋亡，以及降低细胞的组胺和β
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氨基己糖苷酶释放量，发挥治疗假性变态反应的作用。4.一种防治假性变态反应的药物，其特征在于...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘中成，赵跃，许峰，温占波，谭之磊，
申请(专利权)人：河北渤腾医药技术有限公司，
类型：发明
国别省市：