PD-1轴结合拮抗剂和LRRK2抑制剂的组合疗法制造技术

本发明专利技术涉及采用PD

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】PD
‑
1轴结合拮抗剂和LRRK2抑制剂的组合疗法


[0001]本专利技术涉及采用PD
‑
1轴结合拮抗剂和LRRK2抑制剂的组合疗法，以及这些组合疗法用于治疗癌症的用途。

技术介绍

[0002]临床数据表明，对癌症免疫疗法的治疗应答与肿瘤突变负荷密切相关。据推测，高突变负荷与新抗原的产生有关。主要组织相容性复合体上呈递的新抗原可以被宿主免疫系统识别为外来物并引发免疫应答。
[0003]树突状细胞能够吸收肿瘤抗原/新抗原(L
é
a Berland等人，2019)、在主要组织相容性复合体I和II(以下简称MHC
‑
I和MHC
‑
II)上呈递抗原，并且随后通过T细胞的致敏活化适应性免疫应答(Thomas F Gajewski等人，2014)。特别地，树突状细胞在MHC
‑
I上的抗原呈递(交叉呈递)以及随后细胞毒性CD8+T细胞的致敏是癌症免疫疗法的重点。
[0004]由于树突状细胞在抗肿瘤免疫应答中的这种协调作用，对抗原加工和交叉呈递(有潜力增强T细胞介导的针对肿瘤的细胞毒性免疫应答)关键的基因的鉴定，将为治疗癌症提供新的和迄今为止未知的药物靶点。
[0005]申请人开发了一种新的基于CRISPR/Cas9的筛选方法，用于鉴定树突状细胞中癌症免疫疗法的新靶点。筛选读出是基于FACS的，并通过H2Kb
‑
SIINFEKL单克隆抗体检测H2Kb上交叉呈递的SIINFEKL肽。申请人出人意料地鉴定并验证了富亮氨酸重复激酶2(LRRK2)作为最有前景的药物靶点候选物。申请人可以证明LRRK2的敲除以及LRRK2激酶活性的抑制(特别是在树突状细胞中)，导致交叉呈递增加、随后的T细胞致敏和T细胞介导的细胞毒性。此外，申请人证明了对荷瘤动物的药理学干预导致显著的肿瘤生长抑制并且与检查点抑制具有协同作用。
[0006]LRRK2在多种外周器官(例如肾脏、肺、肝脏、心脏和脾)和大脑中表达。LRRK2是一种大型蛋白质(286kDa)，具有几个不同的结构域，其中两个具有不同的酶活性：GTP酶和激酶功能(Cookson,2015；Wallings等人，2015)。LRRK2是一种丝氨酸
‑
苏氨酸激酶，能够自动磷酸化LRRK2本身，以及磷酸化异源底物(Gloeckner,Schumacher,Boldt,&Ueffing,2009)。GTP酶活性由ROC(复合蛋白质的Ras)结构域介导，但是，GTP酶活性对LRRK2功能的贡献尚未完全了解(An Phu Tran Nguyen和Darren J.Moore，2018)。此外，据报道，LRRK2在复合体中充当蛋白质
‑
蛋白质相互作用的结构支架，该复合体被描述为经活化的T细胞核因子(NFAT)转录因子的阻遏物(Zhihua Liu等人，2011)。
[0007]亚细胞定位研究表明，LRRK2与膜和囊泡结构(包括线粒体、溶酶体、核内体、脂筏和囊泡)相关，并且多项证据将LRRK2与多种细胞功能(包括自噬、细胞骨架动力学、细胞内膜运输、突触囊泡循环和炎症反应)相关联(Cookson，2015；Wallings等人，2015)。有趣的是，LRRK2在免疫细胞(主要是单核细胞、巨噬细胞、B淋巴细胞和树突状细胞)中高度表达(Gardet等人，2010；Th
é
venet,Pescini Gobert,Hooft van Huijsduijnen,Wiessner,&Sagot,2011)。LRRK2与人类疾病(诸如帕金森病(PD)和许多慢性炎症性病况，如克罗恩病
(CD)、炎症性肠病和麻风病)有关(Rebecca L.Wallings和Mal
ú
G.Tansey,2019)。
[0008]抗原呈递细胞(APC)对静息T淋巴细胞或T细胞的活化似乎需要两个信号输入。Lafferty等人，Aust.J.Exp.Biol.Med.ScL 53:27
‑
42(1975)。在识别主要组织相容性复合体(MHC)背景下呈递的外来抗原肽后，通过T细胞受体(TCR)转导主要或抗原特异性信号。第二或共刺激信号通过在抗原呈递细胞(APC)上表达的共刺激分子传递至T细胞，并促进T细胞克隆扩增、细胞因子分泌和效应子功能。Lenschow等人，Ann.Rev.Immunol.14:233(1996)。
[0009]近来，已发现T细胞功能障碍或无反应性与抑制性受体(程序性死亡1多肽(PD
‑
1))的诱导性和持续表达同时发生。其配体中的一种，PD
‑
L1在许多癌症中过度表达并且通常与不良预后相关(Okazaki T等人，Intern.Immun.2007 19(7):813)(Thompson RH等人，Cancer Res 2006,66(7):3381)。有趣的是，与正常组织中的T淋巴细胞和外周血T淋巴细胞相反，大多数肿瘤浸润性T淋巴细胞主要表达PD
‑
1，这表明肿瘤反应性T细胞上PD
‑
1的上调可导致抗肿瘤免疫应答受损(Blood 2009 1 14(8):1537)。
[0010]目前治疗癌症的疗法策略主要集中在靶向已知致癌基因、肿瘤抑制基因和参与癌症形成的成熟通路的免疫疗法。虽然这些疗法无疑为患有癌症的患者带来了巨大的好处，但在许多情况下，此类疗法的效果是有时间限制的。因此，迫切需要鉴定和开发具有增强和补充当前疗法的潜力的新策略。
[0011]因此，仍然需要用于治疗、稳定、预防和/或延迟各种癌症发展的最佳疗法。

技术实现思路

[0012]本专利技术涉及PD
‑
1轴结合拮抗剂，特别是抗体，以及它们与LRRK2抑制剂组合，例如，用于治疗癌症的用途。本专利技术的方法和组合能够改进免疫疗法，特别是用于治疗晚期和/或转移性实体瘤或延迟其进展。已经发现本文所述的组合疗法在抑制肿瘤生长和消除肿瘤细胞方面比单独使用PD
‑
1轴拮抗剂抗体治疗更有效。
[0013]提供了一种在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，该方法用于治疗癌症或延迟其进展，其中该PD
‑
1轴结合拮抗剂与LRRK2抑制剂组合使用。
[0014]在一个实施例中，PD
‑
1轴结合拮抗剂选自由PD
‑
1结合拮抗剂、PD
‑
Ll结合拮抗剂和PD
‑
L2结合拮抗剂组成的组。在一个实施例中，PD
‑
1轴结合拮抗剂抑制PD
‑
1与其配体结合配偶体结合。在一个实施例中，PD
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1结合拮抗剂为抗体。在一个实施例中，PD
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1轴结合拮抗剂为选自由以下项组成的组的抗体片段：Fab、Fab'
‑
SH、F本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，所述方法用于治疗癌症或延迟其进展，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂与LRRK2抑制剂组合使用。2.根据权利要求1所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂选自由PD
‑
1结合拮抗剂、PD
‑
Ll结合拮抗剂和PD
‑
L2结合拮抗剂组成的组。3.根据权利要求1或2所述的在方法中使用的PD
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1轴结合拮抗剂，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂抑制PD
‑
1与其配体结合配偶体的结合。4.根据权利要求1至3中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述PD
‑
1结合拮抗剂为抗体。5.根据权利要求1至4所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂为选自由以下项组成的组的抗体片段：Fab、Fab'
‑
SH、Fv、scFv和(Fab')2片段。6.根据权利要求1至5中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂为单克隆抗体。7.根据权利要求1至6中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂为人源化抗体或人抗体。8.根据权利要求1至7中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴拮抗剂，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂为抗体，所述抗体包含：重链，其包含SEQ ID NO:10的HVR
‑
H1序列、SEQ ID NO:11的HVR
‑
H2序列和SEQ ID NO:12的HVR
‑
H3序列；以及轻链，其包含SEQ ID NO:13的HVR
‑
L1序列、SEQ ID NO:14的HVR
‑
L2序列和SEQ ID NO:15的HVR
‑
L3序列。9.根据权利要求1至8中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂为抗体，所述抗体包含：重链可变区，其包含SEQ ID NO:7或SEQ ID NO:8的氨基酸序列；以及轻链可变区，其包含SEQ ID NO:9的氨基酸序列。10.根据权利要求1至9中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂为抗体，所述抗体包含：重链，其包含SEQ ID NO:5的氨基酸序列；以及轻链，其包含SEQ ID NO:6的氨基酸序列。11.根据权利要求1至8中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂选自由纳武单抗、派姆单抗和匹利珠单抗组成的组。12.根据权利要求1至8所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂为AMP
‑
224。13.根据权利要求1至8中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述PD
‑
1轴结合拮抗剂选自由YW243.55.S70、阿特珠单抗、MDX
‑
1105和德瓦鲁单抗组成的组。14.根据权利要求1至13中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述LRRK2抑制剂具有200至900道尔顿的分子量。15.根据权利要求1至14中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述LRRK2抑制剂包含芳香环，所述芳香环通过氮原子与杂环连接，其中所述氮原子可以形成所述杂环的一部分。16.根据权利要求15所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述杂环包含至少两个杂原子。17.根据权利要求1至16中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述LRRK2抑制剂具有低于1μM、低于500nM、低于200nM、低于100nM、低于50nM、低于25nM、低于
10nM、低于5nM、2nM或低于1nM的IC50值。18.根据权利要求1至17中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述LRRK2抑制剂为式(I)化合物，其中，A1为
‑
N
‑
或
‑
CR5‑
；A2为
‑
N
‑
或
‑
CR6‑
；A3为
‑
N
‑
或
‑
CR7‑
；N
a
为
‑
N
‑
；R1为烷基氨基(卤代烷基嘧啶基)，氰基烷基(烷基吡唑基)，烷基氨基(卤代嘧啶基)，氧杂环丁烷基(卤代哌啶基)卤代吡唑基，卤代(N
‑
烷基
‑
3H
‑
吡咯并[2,3
‑
d]嘧啶
‑
胺)，5,11
‑
二烷基嘧啶并[4,5
‑
b][1,4]苯并二氮杂
‑6‑
酮，任选地被一个、两个或三个独立地选自R
a
的取代基取代的苯基，任选地被一个、两个或三个独立地选自R
a
的取代基取代的吡唑基，或任选地被一个、两个或三个独立地选自R
a
的取代基取代的稠合的双环体系；R
a
为(杂环基)羰基、(杂环基)烷基、杂环基、烷氧基、氨基羰基、烷基氨基羰基、氨基(烷基氨基)羰基、氧杂环丁烷基氨基羰基、(四氢吡喃基)氨基羰基、(二烷基氨基)羰基、(环烷基氨基)羰基、羟基、卤代烷氧基、环烷氧基、(羟基烷基)氨基羰基、(烷氧基烷基)氨基羰基、(烷基哌啶基)氨基羰基、(烷氧基烷基)烷基氨基羰基、(羟基烷基)(烷基氨基)羰基、(氰基环烷基)氨基羰基、(环烷基)烷基氨基羰基、(卤代氮杂环丁烷基)氨基羰基、(卤代烷基)氨基羰基、吗啉基羰基烷基、吗啉基烷基、烷基、氟、氯、溴、碘、(全氘代吗啉基)羰基、(卤代环烷基)氨基羰基、氧杂环丁烷基氧基、(环烷基)烷氧基、环烷基、氰基、烯基、炔基、烷氧基烷基、羟基烷基、(环烷基)烷基、烷基磺酰基、苯基、卤代烷基、氰基苯基、环烷基磺酰基、氰基烷基、烷基磺酰基苯基、(二烷基氨基)羰基苯基、卤代苯基、(烷基氧杂环丁烷基)烷基、(二烷基氨基)苯基、(环烷基磺酰基)苯基、烷氧基环烷基、(烷基氨基)羰基烷基、哒嗪基烷基、嘧啶基烷基、(烷基吡唑基)烷基、三唑基烷基、(烷基三唑基)烷基、羟基环烷基、(噁二唑基)烷基、(二烷基氨基)羰基烷基、吡咯烷基羰基烷基、氰基环烷基、烷氧基羰基烷基、(卤代烷基)氨基羰基烷基、(环烷基)烷基氨基羰基烷基、(烷基氨基)羰基环烷基、烷基哌啶基(烷基氨基)羰基、烷基吡唑基(烷基氨基)羰基、(羟基环烷基)烷基氨基羰基、(羟基环烷基)烷基、(二烷基咪唑基)烷基、(烷基噁唑基)烷基、烷氧基烷基磺酰基、羟基羰基、吗啉基磺酰基或烷基(噁二唑基)烷基，R2为烷基或氢；或者R1和R2与N
a
一起形成任选地被一个、两个或三个烷基取代的吗啉代；R3和R4独立地选自烷氧基、环烷基氨基、(环烷基)烷基氨基、(四氢呋喃基)烷基氨基、烷
氧基烷基氨基、(四氢吡喃基)氨基、(四氢吡喃基)氧基、(四氢吡喃基)烷基氨基、卤代烷基氨基、哌啶基、吡咯烷基、(氧杂环丁烷基)氧基、卤代烷氧基、氢、卤素、烷基氨基、吗啉基和烷基(环烷基氧基)吲唑基；或者R3为氢，并且R4与R5一起形成被R8取代的吡咯基，其中所述吡咯基稠合至芳香环，所述芳香环包含A1、A2和A3；R5和R6独立地选自氢和烷基氧基；R7为氢、卤素、烷基、环烷基、烯基、炔基、氰基、卤代烷氧基、(环烷基)烷基、卤代烷基、(烷基哌嗪基)哌啶基羰基或吗啉代羰基；并且R8为被氰基(烷基吡咯基)或氰基苯基取代的吡咯基；或其药用盐。19.根据权利要求1至18中任一项所述的在方法中使用的PD
‑
1轴结合拮抗剂，其中所述LRRK2抑制剂为式(I)化合物，其中，A1为
‑
N
‑
或
‑
CR5‑
；A2为
‑
N
‑
或
‑
CR6‑
；A3为
‑
N
‑
或
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CR7‑
；N
a
为
‑
N
‑
；R1为烷基氨基(卤代烷基...

【专利技术属性】
技术研发人员：D，
申请(专利权)人：豪夫迈，
类型：发明
国别省市：