一种由谷胱甘肽与氨基酸形成的非共价复合物制造技术

本发明专利技术属于非共价复合物技术领域，具体为一种谷胱甘肽与氨基酸形成非共价复合物，其中氨基酸包括常见氨基酸和非常见氨基酸。本发明专利技术中谷胱甘肽与氨基酸、混合氨基酸形成的非共价复合物的鉴定采用电喷雾质谱技术。非共价复合物的合成是将氨基酸或混合氨基酸和谷胱甘肽按１∶１～１∶２摩尔比混合，然后在室温和ｐＨ６～８条件下，将混合物在培养箱内孵育，使反应完全，即得到谷胱甘肽与它们形成的非共价复合物。用曲线拟合法将电喷雾质谱测得的数据处理后，得到该非共价复合物的生成常数为１０↑［２］～１０↑［３］。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于非共价复合物
，具体涉及一种由谷胱甘肽(GSH)与氨基酸形成的 非共价复合物，这种非共价复合物是一种潜在的保健品和治疗药物。
技术介绍
主体和客体之间的非共价相互作用包括蛋白质受体与药物配体、酶与底物以及抗原和 抗体等之间相互作用，是导致分子特异性识别及多种生物现象的化学基础。疾病通常是由 于与共价键复合物相关的正常的生物过程异常而引起的，因此，深入研究这些非共价复合 物的形成机理、键合位点等可以在分子水平上了解在健康和疾病状态下各种生物大分子的 功能和性质，以便设计出特殊疗效的药物去恢复正常的生理功能，这已经成药物开发的重 要路径。本专利技术同时也为了研究与谷胱甘肽结合的氨基酸、混合氨基酸形成的非共价复合物的 生理功能。谷胱甘肽是细胞内广泛存在的小分子硫醇类化合物。还原型谷胱甘肽是细胞内非蛋白 硫氢基团的主要组成部分，具有许多重要的生理功能。谷胱甘肽能对细胞提供抗氧化、抗 毒性和辅酶等三重保护，并对一些巯基酶有激活作用。谷胱甘肽可通过共价键结合，参与 Meister循环中氨基酸的跨膜转运。谷胱甘肽在细胞对外界异物的解毒，以及对羟基过氧化 物、自由基和亲电试剂的清除中起着重要作用。谷胱甘肽是谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘 肽-S-转移酶(GST)的特有底物，通过这两种酶的作用来保护细胞，抵御活性氧及其衍生物 的氧化损害。因此，GSH是细胞抗损伤及代谢调节的关键物质之一。氧化型谷胱甘肽(GSSG)/还原型谷胱甘肽(GSH)的比值是细胞氧化还原状况的一个重 要指标，蛋白质与谷胱甘肽结合的程度也会随之作出相应的变化，该比值偏高，要促进蛋 白质与谷胱甘肽共价键结合；比值偏低，则会导致释放谷胱甘肽.近年来，谷胱甘肽新的作用正在不断的被发现。例如，蛋白质的谷胱甘肽化是细胞内 信息传导的重要因素，谷胱甘肽和有机砷酸可以通过共价键或非共价键结合。此外，谷胱 甘肽还是许多金属离子的鳌合剂，以维持体内平衡。迄今为止，从各种生物体中发现的氨基酸近300种，然而，能够参与蛋白质组成的常 见氨基酸(或称基本氨基酸)大约有20种，如天冬氨酸、精氨酸和苏氨酸等，它们又可 称为蛋白质氨基酸。大部分的氨基酸为非常见氨基酸，它们都是在已合成的肽链上由常 见氨基酸在专一酶催化下，经过化学修饰转化而来。在生命现象中起重要作用蛋白质和多肽都是由氨基酸通过肽键连接而成的。而单纯氨 基酸在生命现象中也能直接起重要作用。例如氨基酸治疗已经成功地应用于抗衰老、提高 记忆力、减少抑郁症、减轻关节炎、减少疱疹和促进头发生长等。在体内，谷氨酸在谷丙 转氨酶的作用下，可以将分子中的氨基转移给丙酮酸，生成丙氨酸。精氨酸能提高人体免 疫力，促进释放人体生长激素(HGH)，快速疗伤，以及减轻动脉粥样硬化等。非常见氨基酸的应用较为广泛，可以作为合成其它含氮物质的前体，如激素和抗生素 等，作为组成细菌细胞壁的成分，还可参与充当神经递质，同时非常见氨基酸还参与跨膜 离子通道的形成。氨基酸的构型通常采用D、 L标记法。常见氨基酸和大部分非常见氨基酸 为L-型氨基酸。少量非常见氨基酸为D-型氨基酸，它们一般以各种形式分布于植物、细 菌和动物体内。D-型氨基酸在医药、食品、农药、科学研究等领域有重要的应用。例如在 医药方面，用于合成多肽药物，如多肽抗生素(阿扑西林Aspoxicillin)。此外，通过研究生 物体内氨基酸D， L型异构体含量的变化，可作为年带记时器进行气候、水文研究，还有， D-型氨基酸可用于酶的结构和功能分析方面的研究。在临床上，混合氨基酸门冬氨酸鸟氨酸可以治疗因急、慢性肝病如肝硬化、脂肪肝、 肝炎所致的高血氨症，特别适用于因肝脏疾患引起的中枢神经系统症状的解除及肝性脑病 的抢救。在体内，门冬氨酸鸟氨酸通过产生两种氨基酸即鸟氨酸和门冬氨酸，作用于两个 主要的氨解毒途径——尿素合成和谷酰胺合成。而鸟氨酸是尿素循环的关键性物质。门冬 氨酸可以参与肝细胞内核酸的合成，以利于修复被损伤的肝细胞。另外，门冬氨酸对肝细 胞内三羧循环代谢过程有间接促进作用。但是，有关谷胱甘肽与氨基酸和混合氨基酸形成 的非共价复合物至今未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种由谷胱甘肽与氨基酸形成的非共价复合物。 本专利技术提出的谷胱甘肽与氨基酸形成的非共价复合物，是在体外将常见氨基酸、非常 见氨基酸或混合氨基酸和谷胱甘肽按1:1 1:2摩尔比混合，然后在室温和pH6~8条件下， 将混合物在培养箱内孵育45-60分钟，使反应完全，即得到谷胱甘肽与它们形成的非共价 复合物；对该非共价复合物采用电喷雾质谱进行表征。用曲线拟合法将电喷雾质谱测得的 数据处理后，得到该非共价复合物的生成常数为102~103。本专利技术中谷胱甘肽与氨基酸和混合氨基酸非共价复合物的形成对谷胱甘肽的Meister 循环，以及各种单个及其混合氨基酸的生理功能可能有促进作用，因此可以为制备新的具 有各种生理功能的药物提供依据。本专利技术中，电喷雾质谱仪为装有Sciex离子喷雾界面的三级四极杆串级质谱(PE-Sciex,Concord, ON,加拿大，m/z 2400)。质谱仪的质量由聚丙二醇(PPG)校正。溶液的pH值 由PHS-3C精密pH计(上海林达仪器厂)测试。喷雾器上加上4800V电压，检测采用正 离子模式，检测器电压为-4000V。进样板电压(Interface plate voltage)为650 V，进样小孔 电压(orifice plate voltage)为65 V， Q。为射频模式，为质量分辨模式。雾化气为普氮 (98%)，帘气为高纯氮(99.99%)。具体实施方式 实施例1本专利技术中，将常见氨基酸包括酸性氨基酸天冬氨酸(Asp),碱性氨基酸赖氨酸(Lys)、精 氨酸(Arg)，极性氨基酸苏氨酸(Thr),以及非极性氨基酸丙氨酸(Ala)和谷胱甘肽按1:1 1:2摩 尔比混合，然后在室温和pH6 8条件下，将混合物在培养箱内孵育60分钟，使反应完全， 即得到Asp、 Lys、 Arg、 Thr， Ala等与谷胱甘肽形成的非共价复合物。非共价复合物的鉴定采用电喷雾质谱。电喷雾质谱仪为装有Sciex离子喷雾界面的三 级四极杆串级质谱(PE-Sciex， Concord, ON,加拿大，m/z 2400)。Asp、 Lys、 Arg、 Thr、 Ala等与谷胱甘肽形成的非共价复合物一般为单电荷离子， +、 +、 +、 +、 +的 m/z分别为441.1, 454.19, 482.2， 427.12和397.1。用曲线拟合法将电喷雾质谱测得的数据处理后，得到该非共价复合物的生成常数为io2 ~ 103. 实施例2本专利技术中，将非常见氨基酸N-a-苯甲酰L-精氨酸C6HsCO(Arg)、鸟氨酸(Orn)和谷胱甘 肽按l:l- l:2摩尔比混合，然后在室温和pH 6~8条件下，将混合物在培养箱内孵育60分 钟，使反应完全，即得到N-a-苯甲酰L-精氨酸C6H5CO(Arg)、和鸟氨酸(Orn)与谷胱甘肽形 成的非共价复合物。非共价复合物的鉴定采用电喷雾质谱。电喷雾质谱仪为装有Sciex离子喷雾界面的三 级四极杆串级质谱(PE-Sciex, Concord, ON,加拿大，m/z 2400)。N-本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种由谷胱甘肽与氨基酸形成的非共价复合物，其特征在于由下述步骤制备获得：在体外将常见氨基酸、非常见氨基酸或混合氨基酸和谷胱甘肽按１∶１～１∶２摩尔比混合，然后在室温和ｐＨ６～８条件下，将混合物在培养箱内孵育４５－６０分钟，使反应完全，即得到谷胱甘肽与它们形成的非共价复合物；对该非共价复合物采用电喷雾质谱进行表征，该非共价复合物的生成常数为１０↑［２］～１０↑［３］。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：储艳秋，戴兆云，潘婷婷，丁传凡，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：31[中国|上海]