安宫牛黄丸中10种成分的含量测定方法技术

本发明专利技术公开了一种安宫牛黄丸中10种成分的含量测定方法，属于中药成分检测技术领域，其包括以下步骤：(1)黄芩苷对照品溶液和供试品溶液的制备；(2)确定色谱条件：柱温为35℃；检测波长为0～20分钟254nm，20～80分钟280nm；流速为1ml/min；以乙腈

【技术实现步骤摘要】
安宫牛黄丸中10种成分的含量测定方法


[0005]本专利技术涉及一种安宫牛黄丸中10种成分的含量测定方法，属于中药成分检测


技术介绍

[0006]安宫牛黄丸是由牛黄、水牛角浓缩粉、人工麝香、珍珠、朱砂、雄黄、黄连、黄芩、栀子、郁金、冰片共11味药材制成的复方制剂，具有清热解毒，镇惊开窍的功效，主要用于热病邪入心包，高热惊厥，神昏谵语，中风昏迷及脑炎，脑膜炎，中毒性脑病，脑出血，败血症见上述症候者。安宫牛黄丸生产时经过制粉、混合、制丸三个步骤制成大蜜丸。现有技术中，对安宫牛黄丸的质量控制研究主要关注了安宫牛黄丸中的某几个成分，难以充分反应制剂的整体质量。而且，安宫牛黄丸中待测定的成分中包括环烯醚萜苷(京尼平龙胆双糖苷、栀子苷)、酚酸(对羟基苯甲酸)、生物碱(盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱)、黄酮苷(黄芩苷、汉黄芩苷)、黄酮苷元(黄芩素、汉黄芩素)等多种结构类型不同的化合物，这些化合物的理化性质如溶解度、酸碱度、紫外吸收等性质均差异较大，实现如此多不同类型化合物含量检测难度很大。
[0007]需要说明的是，上述内容属于专利技术人的技术认知范畴，并不必然构成现有技术。

技术实现思路

[0008]本专利技术为了解决现有技术所存在的问题，提供了一种安宫牛黄丸中10种成分的含量测定方法，采用一测多评方法以黄岑苷为内参物快速便捷的实现了10种成分的含量测定，提高了检测效率，准确性高，为安宫牛黄丸的质量控制提供了依据。
[0009]本专利技术通过采取以下技术方案实现上述目的：
[0010]安宫牛黄丸中10种成分的含量测定方法，包括以下步骤：
[0011](1)黄芩苷对照品溶液和供试品溶液的制备：
[0012]以甲醇为溶剂，制备黄芩苷对照品溶液；
[0013]取安宫牛黄丸适量，剪碎，加水之后进行超声处理，使蜜丸溶散，然后加入甲醇进行超声处理，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，制得供试品溶液；
[0014](2)确定色谱条件：
[0015]色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温为35℃；检测波长为0～20分钟254nm，20～80分钟280nm；流速为1ml/min；以乙腈
‑
甲醇为流动相A，0.1％三氟乙酸溶液为流动相B进行梯度洗脱，其中乙腈和甲醇的体积比为90：10；
[0016](3)确定相对校正因子：
[0017]取黄芩苷对照品溶液，注入液相色谱仪，测定，以黄芩苷为内参物，分别计算京尼平龙胆双糖苷、对羟基苯甲酸、栀子苷、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的相对校正因子；
[0018](4)供试品溶液成分含量的测定：
[0019]取黄芩苷对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，以黄芩苷对照品的浓度和色谱峰峰面积为参照，根据相对校正因子计算京尼平龙胆双糖苷、对羟基苯甲酸、栀子苷、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量。
[0020]优选的，梯度洗脱条件为：
[0021]0～2分钟：10％A，90％B；
[0022]2～20分钟：10
→
20％A，90
→
80％B；
[0023]20～30分钟：20
→
23％A，80
→
77％B；
[0024]30～55分钟：23
→
35％％A，77
→
65％B；
[0025]55～80分钟：35
→
90％A，65
→
10％B。
[0026]其中，所述相对校正因子的计算公式为：
[0027][0028]其中，s为黄芩苷，k为待测组分，依次取京尼平龙胆双糖苷、对羟基苯甲酸、栀子苷、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素九种成分中的一种；W
s
为黄芩苷的浓度，W
k
为待测组分k的浓度，A
s
为黄芩苷的峰面积，A
k
为待测组分的峰面积；f
s
为黄芩苷的校正因子，f
k
为待测组分的校正因子。
[0029]京尼平龙胆双糖苷、对羟基苯甲酸、栀子苷、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷的色谱峰相对保留时间分别为0.31、0.37、0.40、0.82、1.04、1.08、1.26、1.44、1.63、1.00。
[0030]京尼平龙胆双糖苷、对羟基苯甲酸、栀子苷、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷的相对校正因子分别为3.18、0.98、1.38、0.53、0.44、0.35、1.11、0.73、0.71、1.00。
[0031]可选的，色谱柱的柱长为250mm，内径为4.6mm，粒径为5μm。
[0032]可选的，色谱条件中，按黄芩苷峰计算，理论板数不低于2000。
[0033]可选的，超声处理的功率为250W，频率为40kHz。
[0034]可选的，黄芩苷对照品溶液的浓度为每1ml含0.1mg的黄芩苷对照品。
[0035]优选的，供试品溶液的制备方法具体为：取安宫牛黄丸适量，剪碎，取约0.5g，置具塞锥形瓶中，加入水5ml，超声处理5min，使蜜丸溶散，然后加入甲醇25ml，超声处理30分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，制得供试品溶液。
[0036]本申请的有益效果包括但不限于：
[0037]本专利技术提供的安宫牛黄丸中10种成分的含量测定方法，采用一测多评方法以黄岑苷为内参物快速便捷的实现了10种成分的含量测定，提高了检测效率，准确性高，为安宫牛黄丸的质量控制提供了依据。
[0038]本专利技术采用水溶液超声再用甲醇提取的方式对安宫牛黄丸进行供试品溶液制备，待测成分溶出完全；本专利技术以A(乙腈:甲醇90：10)
‑
B(0.1％三氟乙酸)]为流动相，确定了包含洗脱梯度、柱温、检测波长等在内的稳定色谱条件，使待测成分所有待测成分在不同的仪器、色谱柱上的检测结果稳定，色谱峰相对保留时间稳定，色谱峰峰形好、分离度好。
附图说明
[0039]此处所说明的附图用来提供对本申请的进一步理解，构成本申请的一部分，本申请的示意性实施例及其说明用于解释本申请，并不构成对本申请的不当限定。在附图中：
[0040]图1为专属性考察色谱图，1
‑
10分别为1:京尼平龙胆双糖苷、2:对羟基苯甲酸、3:栀子苷、4:盐酸黄连碱、5:黄芩苷、6:盐酸巴马汀、7:盐酸小檗碱、8:汉黄芩苷、9:黄芩素、10:汉黄芩素；
[0041]图2为柱温为30℃时供试品溶液的色谱图；
[0042]图3为不同采集波长下的供试品溶液色谱图。
具体实施方式
[0043]下面结合具体实施例进一步阐述本专利技术，但本申请的保护范围并不局限于这些实施例。
...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.安宫牛黄丸中10种成分的含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)黄芩苷对照品溶液和供试品溶液的制备：以甲醇为溶剂，制备黄芩苷对照品溶液；取安宫牛黄丸适量，剪碎，加水之后进行超声处理，使蜜丸溶散，然后加入甲醇进行超声处理，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，制得供试品溶液；(2)确定色谱条件：色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；柱温为35℃；检测波长为0～20分钟254nm，20～80分钟280nm；流速为1ml/min；以乙腈
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甲醇为流动相A，0.1％三氟乙酸溶液为流动相B进行梯度洗脱，其中乙腈和甲醇的体积比为90：10；(3)确定相对校正因子：取黄芩苷对照品溶液，注入液相色谱仪，测定，以黄芩苷为内参物，分别计算京尼平龙胆双糖苷、对羟基苯甲酸、栀子苷、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的相对校正因子；(4)供试品溶液成分含量的测定：取黄芩苷对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，测定，以黄芩苷对照品的浓度和色谱峰峰面积为参照，根据相对校正因子计算京尼平龙胆双糖苷、对羟基苯甲酸、栀子苷、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的含量。2.根据权利要求1所述的安宫牛黄丸中10种成分的含量测定方法，其特征在于，梯度洗脱条件为：0～2分钟：10％A，90％B；2～20分钟：10
→
20％A，90
→
80％B；20～30分钟：20
→
23％A，80
→
77％B；30～55分钟：23
→
35％％A，77
→
65％B；55～80分钟：35
→
90％A，65
→
10％B。3.根据权利要求1所述的安宫牛黄丸中10种成分的含量测定方法，其特征在于，所述相对校正因子的计算公式为：其中，s为黄芩苷，k为待测组分，依次取京尼平龙胆双糖苷、对羟基苯甲酸、栀子苷、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱、汉...

【专利技术属性】
技术研发人员：曹桂云，宁波，孟兆青，庄雪松，罗毅，刘羽康，李樱，
申请(专利权)人：山东宏济堂制药集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：