水痘-带状疱疹人免疫球蛋白及其制备方法以及其在制药物中的应用技术

本发明专利技术公开了一种水痘－带状疱疹人免疫球蛋白，其中，水痘－带状疱疹病毒中和抗体效价大于等于５０ＩＵ／ｍＬ，其免疫球蛋白纯度大于等于总蛋白的９０％，蛋白质含量小于等于１８０ｇ／Ｌ。其制造方法为：在符合国家采血标准的供血浆者中，取其中水痘－带状疱疹病毒中和抗体ＩｇＧ效价大于等于２ＩＵ／ｍＬ，蛋白质含量大于等于５５ｇ／Ｌ者的血浆为水痘－带状疱疹人免疫球蛋白的制备原料血浆，并将所得血浆混合；再将所得的原料血浆按低温乙醇或层析法蛋白分离工艺，分离提取免疫球蛋白组分，经加压过滤、层析、离心、超滤、病毒灭活、调配、除菌、分装等工序制成。其可用于制备预防水痘和治疗带状疱疹后遗神经痛药物的制备。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，涉及一种生物免疫制品，特别是涉及一种水痘和治疗带状疱 疹的特异免疫球蛋白及其制备方法，以及其在制药物中的应用。
技术介绍
水痘-带状疱疹病毒(英文縮写VZV)属于人类单纯疱疹病毒3型，其原发感染为水痘。水痘是儿童常见的一种急性、高传染性，可经呼吸道和接触传播的感染性疾病， 一般预后良好，但某些人群(长期应用放、化疗病人，外科手术病人，器官移植病人等)及成人感染VZV 后症状甚为严重， 一旦在易感人群中出现水痘病人，就很难预防水痘在该群体中爆发。VZV 潜伏后再激活则引起带状疱疹。近年来，带状疱疹(英文缩写HZ)的发病率明显增高，且引起的后遗神经痛(英文縮写P丽)用抗病毒药物治疗无明显疗效。水痘-带状疱疹及相关性后遗症逐渐成为重要的公共卫生问题而日益受到国家重视。目前我国水痘的预防主要是应用水痘疫苗进行主动免疫，但个体水痘的预防接种不能改 变水痘的爆发及流行病学特征。目前治疗带状疱疹常用的抗病毒药物一般为化学合成药、中 草药以及干扰素等生物制剂，但其特异性差，疗效也不能充分肯定。特异性免疫球蛋白是由病毒等病原体感染机体或主动接种疫苗后，在机体内产生的具有 特异性、高活性及中和作用的球蛋白。使用特异性免疫球蛋白可针对性的预防病毒等病原体 的感染及其感染后所发生疾病的治疗，这种方法称为被动免疫。被动免疫是控制感染性疾病 暴发及治疗的有效途径。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是针对目前人免疫球蛋白对水痘-带状疱疹病毒无特异性的缺 点，提供一种疗效好的高效价水痘-带状疱疹病毒人免疫球蛋白，并提供一种简单方便成本低 的制备方法，以及其在制备用于预防水痘的发生和治疗带状疱疹后遗神经痛药治疗的药物中 的应用。为解决上述技术问题，本专利技术采用如下技术方案3，其中，水痘-带状疱疹病毒中和抗体效价大于等于 50IU/mL，其免疫球蛋白纯度大于等于总蛋白的90%，蛋白质含量小于等于180g/L。 本专利技术所述的水痘-带状疱疹人免疫球蛋白，其中，仅与抗人血清产生沉淀线。 本专利技术所述的水痘-带状疱疹人免疫球蛋白，其中，与正常人血清比较，主要沉淀线为IgG。本专利技术所述的水痘-带状疱疹人免疫球蛋白，其中IgG单体与二聚体含量之和大于等于90%。本专利技术所述的水痘-带状疱疹人免疫球蛋白，其中剂型为液体针剂型或冻干剂型，规格 为125 IU/2. 5 mL/瓶、250 IU/5. 0 mL/瓶。本专利技术所述水痘-带状疱疹人免疫球蛋白的制造方法，其中，按以下步骤制备a. 检测符合国家采血标准的供血浆者的血桨或血清，取其中水痘-带状疱疹病毒中和抗 体IgG，选择中和抗体效价大于等于2IU/mL者的血桨为水痘-带状疱疹人免疫球蛋白的制备 原料血浆，并将所得血浆混合；b. 将a步骤所得的混合原料血浆按低温乙醇或层析法蛋白分离工艺，分离提取免疫球蛋 白组分，经超滤、层析、病毒灭活、配制、除菌、分装等工序制成。本专利技术所述水痘-带状疱疹人免疫球蛋白的制造方法，其中，步骤a的方法为选择符合国家采血标准的供血浆者，接种国家批准的水痘疫苗，接种15天-20日时，以 固相酶联免疫法(ELISA)定量检测供血浆者血浆或血清的水痘-带状疱疹病毒中和抗体IgG， 中和抗体效价大于等于2IU/mL的血浆为水痘-带状疱疹人免疫球蛋白的合格原料血浆，所述 符合国家采血标准包括以下项目以双縮脲法检测蛋白质含量大于等于55g/L，丙氨酸氨基转 移酶(赖氏法)不高于25单位，乙型肝炎表面抗原阴性，梅毒阴性，HIV-1/HIV-2抗体阴性， HCV抗体阴性者。本专利技术所述水痘-带状疱疹人免疫球蛋白的制造方法，其中，每批次的混合原料血桨由 不少于IOO名供血浆者的原料血浆混合而成，测定混合原料血浆中的水痘-带状疱疹病毒中和 抗体效价，留中和抗体效价大于等于4IU/mL的混合原料血浆用以制备水痘-带状疱疹人免疫 球蛋白，如所得血浆的水痘-带状疱疹病毒中和抗体效价小于4IU/mL，则该批次血浆不能使用， 只能另作它用。本专利技术所述的水痘-带状疱疹人免疫球蛋白在制造预防易感人群患水痘的药中的应用， 其使用量为10 15IU/kg体重，且最大给药剂量为625IU，最小给药剂量125IU。本专利技术所述的水痘-带状疱疹人免疫球蛋白在制造治疗带状疱疹及其后遗神经痛药物中的应用，其使用剂量为1000 5000IU每天。本专利技术的优点为提供了一种水痘-带状疱疹病毒中和抗体效价大于等于50IU/mL，其免 疫球蛋白纯度大于等于总蛋白的90%，蛋白质含量小于等于180g/L的人免疫球蛋白，因为其 中的水痘-带状疱疹病毒中和抗体效价大于等于50IU/mL，故此其可以用以防治水痘病和治疗 带状疱疹后遗神经痛，并取得良好的效果。为了得到水痘-带状疱疹病毒中和抗体效价大于等 于50IU/mL的人免疫球蛋白，专利技术人在采集血浆的时候，有目的的筛选水痘-带状疱疹病毒中 和抗体效价大于2IU/mL的献血者的血浆，该方法在不提高制造成本的情况下，提升了最终 产品中水痘-带状疱疹病毒抗体的浓度，提高了药效且简单方便。具体实施方式 实施例11、 供血浆者的免疫2008年8月1日至2008年9月7日选择身体健康的符合国家采血标准的供血浆者254 名，同一名供血者在O、 25天分别接种水痘减毒活疫苗(疫苗生产厂家为中国生物技术集团 公司上海生物制品研究所，批号为20080803， 0.5ml/支)各1支。所述符合国家采血标准包括 以下项目以双縮脲法检测蛋白质含量大于等于55g/L,丙氨酸氨基转移酶(赖氏法)不高于25单位，乙型肝炎表面抗原阴性，梅毒阴性，HIV-l/HIV-2抗体阴性，HCV抗体阴性者。2、 供血浆者的血浆筛选采集2008年9月21起选择固相酶联免疫法分别定量检测已接种水痘疫苗供血浆者254人血 浆中水痘-带状疱疹病毒抗体IgG，水痘-带状疱疹病毒酶联免疫试剂盒为中国药品生物制品 检定所生产,批号为20090424，共检出中和抗体效价大于2IU/mL的供血浆者分别为158人， 将该158人的血浆低温冰冻储存。3、 水痘、带状疱疹人免疫球蛋白的制备(1) 将水痘-带状疱疹人免疫球蛋白合格原料血浆158份融化混合，得混合原料血浆90000 毫升，用固相酶联免疫法，水痘-带状疱疹病毒酶联免疫试剂盒为中国药品生物制品检定所生 产，批号为20090424,定量检测混合后混合原料血浆水痘-带状疱疹病毒中和抗体效价为 6.7IU/mL;(2) 将(1)步骤所得的无菌混合原料血浆，在2'C下离心去除冷沉淀7. 6Kg;(3) 将(2)步骤中去除冷沉淀后得到血浆83L，用8. 3L生理盐水稀释，用256mlPH4. 0醋酸 缓冲溶液调节反应液pH值至6.5，加95%乙醇19.2L至反应液中，最终乙醇浓度为20%，反应液终体积为110L,使用冷媒控制反应液温度至-4. 5'C并保持，板框压滤分离得沉淀14kg;(4) 将步骤(3)的沉淀用(TC 0. 01mol/L NaCl溶液126L搅拌溶解，终体积为140L;(5) 在步骤(4)中得到的上清液中加50%乙醇47. 6L至反应液中，最终乙醇浓度为度为17%， 用PH4. 0醋酸缓冲溶液365ml调节反应液pH值至5.1，反应液终体积为188L，使用冷媒本文档来自技高网...

【技术保护点】
水痘－带状疱疹人免疫球蛋白，其特征在于，水痘－带状疱疹病毒中和抗体效价大于等于５０ＩＵ／ｍＬ，其免疫球蛋白纯度大于等于总蛋白的９０％，蛋白质含量小于等于１８０ｇ／Ｌ。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：张振湖，孙思才，胡辉恒，
申请(专利权)人：同路生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：34[中国|安徽]