减毒水痘-带状疱诊病毒在制备用于预防水痘的药物中的应用制造技术

以较高的ＶＺＶ产量制备活的减毒水痘－带状疱疹病毒疫苗。该新方法使活ＶＺＶ疫苗的大量制备更为实用。另外，最佳单层细胞培养条件提供了一种提高单层细胞密度的方法，该方法可用于提高病毒疫苗的产量。根据该方法，在常规培养容器中通常获得接近５００，０００个细胞／ｃｍ↑［２］的细胞密度。（*该技术在2013年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
含有减毒水痘－带状疱疹病毒的疫苗的使用方法，该方法包括施用免疫有效量的疫苗以预防水痘，所述病毒是用如下方法制备的： ａ． 在足以使细胞高度复制的高营养条件下，将选自人二倍体细胞的ＶＺＶ易感染细胞培养至在单层培养物中会合，并供给不能代谢的二糖； ｂ． 在尽可能接近会合点时，用实用范围内尽可能高感染复数的ＶＺＶ感染细胞感染步骤（ａ）培养的细胞； ｃ． 将ＶＺＶ感染培养物在高营养状态下维持２２－９６小时，并在感染性ＶＺＶ产量达到峰值时收集； ｄ． 在收集ＶＺＶ感染细胞前，用任选含有溶酶体营养剂如氯化铵或氯喹的生理溶液洗涤ＶＺＶ感染培养物； ｅ． 将ＶＺＶ感染细胞收集到最小体积的稳定溶液中，并且或者立即破碎细胞，或者冷冻这些细胞供以后破碎； ｆ． 破碎ＶＺＶ感染细胞以最适地释放细胞结合的ＶＺＶ，并除去细胞碎片，以提供无细胞ＶＺＶ制备物； 其中ＶＺＶ易感染细胞是ＭＲＣ－５细胞，减毒ＶＺＶ是水痘－带状疱疹病毒的Ｏｋａ株，培养温度是在３０－３７℃之间，二糖是以２０－６０ｍＭ提供的蔗糖；培养温度是３５℃，感染复数是１∶２５和１∶６２５之间，溶酶体营养剂是以２０－５０ｍＭ提供的氯化铵或以２３０μＭ提供的氯喹。...

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：PJ普罗沃斯特，DL克拉，PA弗里曼，
申请(专利权)人：麦克公司，
类型：发明
国别省市：US[美国]