靶向RNA结合蛋白STAU2的寡核苷酸及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种靶向RNA结合蛋白STAU2的寡核苷酸及其应用，所述寡核苷酸包括反义寡核苷酸与shRNA中的至少一种。该寡核苷酸能够通过靶向沉默胰腺癌细胞及胰腺癌细胞异种移植瘤动物模型中STAU2基因或者下调STAU2基因的表达来调控胰腺癌细胞的增殖、转移和侵袭能力，最终改善或治疗胰腺癌，具有广泛的应用前景。景。景。

【技术实现步骤摘要】
靶向RNA结合蛋白STAU2的寡核苷酸及其应用


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，尤其涉及一种靶向RNA结合蛋白STAU2的寡核苷酸及其应用。

技术介绍

[0002]胰腺癌（Pancreatic Adenocarcinoma, PAAD）是所有常见的实体恶性肿瘤中最致命的，具有“三高三低”的特点，即“发病率逐年升高、术后复发率高、死亡率高”和“早期诊断率低、手术切除率低、药物有效率低”，严重威胁人民的健康。生存率较低，5年生存率为9.2%。手术是唯一可以根治胰腺癌的手段，但患者早期诊断率低，就诊时多为局部晚期或伴远处转移，失去手术机会，手术比例不足20%。化疗作为胰腺癌的主要治疗手段，其疗效已达到瓶颈且易发生耐药。
[0003]近年的研究主要集中在新药物的开发如纳米脂质体伊立替康联合5FU/LV二线治疗非亚裔及亚裔PAAD患者，总生存时间分别为6.1个月和8.9个月；靶向联合化疗如马赛替尼联合吉西他滨治疗伴神经性疼痛的局部晚期或转移性PAAD较单药吉西他滨降低死亡风险54%；部分罕见突变位点的靶向治疗如拉罗替尼、恩曲替尼治疗NTRK融合的患者，BRAC1/2突变患者应用奥拉帕利作为含铂化疗后的维持治疗等，但适用人群极其有限。不断上升的发病率和持续的低生存率凸显了探索有效生物标志物、寻找特异性治疗靶点、开发干预药物的重要性。
[0004]STAU2（Staufen doubLe
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stranded RNA
‑
binding protein 2）是一种RNA结合蛋白，与RNA二级结构结合，参与调控核糖核蛋白复合物中部分mRNA转运、剪接、翻译和mRNA稳定性，是在细胞内调节RNA的代谢和功能的重要蛋白之一。有报道证明STAU2能促进癌症的发生与发展。STAU2基因定位于8号染色体p21.11上，ensembL数据库显示STAU2基因有29条转录本。
[0005]我们先前的研究中发现STAU2在胰腺癌中高表达且造成预后不良，并验证STAU2是胰腺癌中的一个关键致癌蛋白，其高表达促进胰腺癌的生长、迁移和侵袭，有望成为潜在的诊断生物标志物和治疗的靶点。但目前尚未有相关能够靶向STAU2且能够治疗胰腺癌的相关的抑制剂的报道。

技术实现思路

[0006]专利技术目的：本专利技术所要解决的技术问题是提供了一种靶向STAU2且能够治疗胰腺癌的寡核苷酸。
[0007]本专利技术还要解决的技术问题是提供了寡核苷酸在制备靶向沉默癌细胞中STAU2基因或者下调癌细胞中STAU2基因的表达能力的药物中的用途。
[0008]本专利技术还要解决的技术问题是提供了一种靶向RNA结合蛋白STAU2治疗胰腺癌的组合物或药物制剂。
[0009]本专利技术最后要解决的技术问题是提供了所述的组合物或药物制剂在制备靶向沉
默胰腺癌细胞中STAU2基因或者下调胰腺癌细胞中STAU2基因的表达药物的用途。
[0010]技术方案：为实现以上专利技术目的，本专利技术第一方面提供了一种靶向RNA结合蛋白STAU2的寡核苷酸，所述寡核苷酸包括反义寡核苷酸与shRNA寡核苷酸中的至少一种，所述反义寡核苷酸的序列如SEQ ID NO.1所示，所述shRNA寡核苷酸包括shSTAU2_1、shSTAU2_2或shSTAU2_3中的一种，所述shSTAU2_1的序列如SEQ ID NO.4所示，所述shSTAU2_2的序列如SEQ ID NO.5所示，所述shSTAU2_3的序列如SEQ ID NO.6所示。
[0011]其中，所述反义寡核苷酸的序列如SEQ ID NO.1所示，具体为：5
’‑
ATTCATAAGGAGTTCCCTGGC
‑
3'。
[0012]其中，所述shRNA寡核苷酸中shSTAU2_1的序列为5 '
‑
GCCAGGGAACTCCTTATGAAT
‑
3 '，如SEQ ID NO.4所示；shSTAU2_2的序列为5 '
‑
CCAACCTTCAAGCTCTTTCTT
‑ꢀ
3 '，如SEQ ID NO.5所示；shSTAU2_3的序列为5 '
‑
CCCAAAGATATGAACCAACCT
‑
3 '，如SEQ ID NO.6所示。
[0013]其中，所述寡核苷酸还包括2'
‑
甲氧乙氧基修饰或核酸链骨架修饰。
[0014]本
技术实现思路
还包括所述的寡核苷酸在制备靶向沉默癌细胞中STAU2基因或者下调癌细胞中STAU2基因的表达能力药物中的用途。
[0015]本专利技术还包括靶向沉默异种移植瘤动物模型中STAU2基因或者下调癌细胞中STAU2基因的表达。
[0016]其中，所述癌细胞包括但不仅限于胰腺癌细胞。
[0017]其中，所述用途包括抑制癌细胞的增殖、转移与侵袭能力。
[0018]本
技术实现思路
还包括一种靶向RNA结合蛋白STAU2治疗胰腺癌的组合物或药物制剂，包括所述的寡核苷酸与药用载体。
[0019]其中，所述药用载体包括糖、聚胺、氨基酸、肽和脂质中的至少一种。
[0020]本
技术实现思路
还包括所述的组合物或药物制剂在制备靶向沉默胰腺癌细胞中STAU2基因或者下调胰腺癌细胞中STAU2基因的表达药物的用途。
[0021]其中，所述用途包括采用所述的组合物或药物制剂抑制癌细胞的增殖、转移与侵袭能力。
[0022]有益效果：与现有技术相比，本专利技术具备以下优点：本专利技术的反义寡核苷酸和shRNA可以显著抑制STAU2 RNA和蛋白表达，而且可以显著抑制癌细胞的增殖、转移和侵袭，可以抑制Wnt/β
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Catenin和EMT通路中C
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Myc、SNAI1、N
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Cad、E
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Cad、β
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Catenin和VIM等关键因子的表达，最终改善或治疗胰腺癌，本专利技术还证明该反义寡核苷酸能降低体内肿瘤细胞增殖速率，而且在体内依然具有良好的耐受性和安全性。本专利技术对于开发新型抗胰腺癌药物具有重要意义，具有广阔的前景和巨大的经济价值。
附图说明
[0023]图1为本专利技术的实施例1中Control
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ASO和STAU2
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ASO处理对PANC
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1细胞的STAU2（A）RNA表达水平及（B）蛋白表达水平的影响；图2为本专利技术的实施例2中Control
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ASO和STAU2
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ASO处理PANC
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1细胞0、1、2、3、4、5天后，使用CCK8方法检测PANC
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1细胞增殖的变化图；图3为本专利技术的实施例2中Control
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ASO和STAU2
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ASO处理PANC
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1细胞48h的（A）迁移与侵袭的显微镜图及（B）细胞数量本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种靶向RNA结合蛋白STAU2的寡核苷酸，其特征在于，所述寡核苷酸包括反义寡核苷酸与shRNA寡核苷酸中的至少一种，所述反义寡核苷酸的序列如SEQ ID NO .1所示，所述shRNA寡核苷酸包括shSTAU2_1、shSTAU2_2或shSTAU2_3中的一种，所述shSTAU2_1的序列如SEQ ID NO .4所示，所述shSTAU2_2的序列如SEQ ID NO .5所示，所述shSTAU2_3的序列如SEQ ID NO .6所示。2.根据权利要求1所述的寡核苷酸，其特征在于，所述寡核苷酸包括2'
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甲氧乙氧基修饰或核酸链骨架修饰。3.一种靶向RNA结合蛋白STAU2治疗胰腺癌的组合物，其特征在于，包括权利要求1所述的寡核苷...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨鹏，王晓，丁佳雨，邝文彬，王丽萍，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：