一种含麦角硫因的菌种保藏保护剂及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种含麦角硫因的菌种保藏保护剂及其制备方法和应用，涉及生物发酵技术领域。本发明专利技术中首次将麦角硫因应用于菌种保藏中，并提供了一种用于菌种保藏的包含麦角硫因的保护剂。本发明专利技术中采用麦角硫因对菌种进行保藏，证明了麦角硫因可以作为菌种保藏保护剂的新的有效成分。并且，本发明专利技术中还证明了麦角硫因能够与甘油共同作为菌种保藏保护剂使用，且二者具有一定的协同效果。上述保护剂能够在长时间菌种保藏后再重新进行活化时，保持较高的菌种存活量，且同时能够维持较好的细胞活力，使得重新活化后的菌体保持有较快的生长速度以及较好的代谢水平。以及较好的代谢水平。以及较好的代谢水平。

【技术实现步骤摘要】
一种含麦角硫因的菌种保藏保护剂及其制备方法和应用


[0001]本申请涉及生物发酵
，尤其涉及一种含麦角硫因的菌种保藏保护剂及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]菌种保藏是指保持微生物菌株的生活力和遗传性状的技术。目的在于使菌种保持不生长、不死亡的半永久性的休眠状态，使其存活、不丢失、不污染杂菌、不发生或少发生变异，保持菌种原有的各种特征和生理活性。菌种保藏有多种方法，但其原理大同小异，通常是根据低温、缺氧、干燥这三个因素来设计的。甘油冷冻管保藏法具有适用范围广，操作简便，效果好等优点，是目前应用最为广泛的一种的菌种保藏方法，其原理是以甘油为保护剂，低温冷冻条件下，使微生物的新陈代谢趋于停止，从而达到长期有效的保藏。
[0003]麦角硫因(ergothioneine)是1909年在真菌Claviceps purpurea中被发现的一种稀有天然氨基酸。麦角硫因存在于很多动植物体内，具有重要的生理活性，研究表明其具有清除自由基、抗炎、维持DNA的生物合成、细胞的正常生长及细胞免疫等多种生理功能。现有技术中，麦角硫因的研究多集中于医药食品保健品和化妆品领域，如专利CN114621916A公开了麦角硫因作为抗氧化剂在提高脐带间充质干细胞活力中的应用。但是目前还未有报道麦角硫因作为菌种保护剂的应用。
[0004]本申请专利技术人在实验过程中发现，菌种在低温保藏一段时间后再活化菌种，菌种的生长活力减弱。因此，为了进一步提高菌种低温保藏的时间以及使菌种复苏后维持较好的活力，仍需要不断开发新的菌种保护剂。<br/>
技术实现思路

[0005]本专利技术的目的是提供一种含麦角硫因的菌种保藏保护剂及其制备方法、使用方法和应用，为菌种保藏提供了一种新的保护剂有效成分。
[0006]一方面，本申请提供了麦角硫因在菌种保藏和/或菌种保藏的保护剂中的应用。
[0007]本申请中首次证明了麦角硫因可以在菌种保藏过程中起到保护菌种的作用，为菌种保藏保护剂提供了一种新的有效成分。并且采用麦角硫因作为菌种保藏保护剂的有效成分时，能够提高菌种保藏时间。并采用麦角硫因作为保护剂保藏的菌种能够在复苏后仍维持较好的活力，克服了现有技术中菌种在保藏一段时间后再活化菌种时，菌种生长活力减弱的问题。
[0008]另一方面，本申请还提供了一种用于菌种保藏的保护剂，所述保护剂包括麦角硫因。
[0009]进一步的，以质量百分比计，所述保护剂中麦角硫因的含量为0.01％～5％；优选的，所述保护剂中麦角硫因的含量为0.05％～2％。
[0010]更优选的，所述所述保护剂中麦角硫因的含量为0.1％～1％。
[0011]所述保护剂中麦角硫因的含量可为0.01％、0.02％、0.03％、0.04％、0.05％、
0.06％、0.07％、0.08％、0.09％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％、0.5％、0.6％、0.7％、0.8％、0.9％、1％、1.1％、1.2％、1.3％、1.4％、1.5％、1.6％、1.7％、1.8％、1.9％、2％、3％、4％、5％。
[0012]进一步的，所述保护剂还包括甘油；优选的，以质量百分比计，所述保护剂中甘油的含量为10％～60％；更优选的，10％～30％。
[0013]所述甘油的含量可为10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％。
[0014]本申请中证明了麦角硫因可单独作为菌种保藏保护剂对菌种进行保藏。并且，本申请中还证明了，麦角硫因也可与甘油共同作为菌种保藏保护剂使用，二者具有一定协同效果。
[0015]优选的，所述保护剂中还包括溶剂。
[0016]更优选的，所述溶剂可包括水、葡萄糖水溶液、聚乙二醇溶液等能够溶解麦角硫因和/或甘油的已知成分。
[0017]在一种优选的实施方式中，所述溶剂为水。
[0018]在一种优选的实施方式中，所述保护剂中包括0.05％～2％麦角硫因，10％～30％甘油，余量为水。
[0019]本领域技术人员可知，所述保护剂中还可以包括已知的糖类(乳糖、葡萄糖、海藻糖、木聚糖等)、氨基酸类(丙氨酸、甘氨酸、L
‑
丝氨酸等)和复合物(脱乳脂，明胶等)等成分，以改善所述保护剂的菌种保藏效果。
[0020]进一步的，所述菌种包括细菌和/或真菌；优选的，所述菌种包括细菌；更优选的，所述细菌为乳酸菌和/或双歧杆菌。
[0021]在一种优选的实施方式中，所述乳酸菌包括干酪乳杆菌(L.casei)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)，所述双歧杆菌包括动物双歧杆菌(Bifidobacterium)。
[0022]另一方面，本申请还提供了一种上述的保护剂的制备方法，所述方法包括：将麦角硫因溶于溶剂中混合均匀，即得保护剂；优选的，以质量百分比计，所述保护剂中麦角硫因的含量为0.01％～5％；更优选的，0.05％～2％；
[0023]优选的，所述保护剂中还包括甘油；更优选的，所述甘油的含量为10％～60％；更优选的，10％～30％。
[0024]所述甘油的含量可为10％、15％、20％、21％、22％、23％、24％、25％、26％、27％、28％、29％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％。
[0025]优选的，所述溶剂可包括水、葡萄糖水溶液、聚乙二醇溶液等能够溶解麦角硫因和/或甘油的已知成分。
[0026]在一种优选的实施方式中，所述溶剂为水。
[0027]并且，上述所述溶剂还可包括任何适合用做菌种保藏或者菌种保藏保护剂的物质，所述溶剂选自已知的糖类(乳糖、葡萄糖、海藻糖、木聚糖等)、氨基酸类(丙氨酸、甘氨酸、L
‑
丝氨酸等)和复合物(脱乳脂，明胶等)成分的一种或多种。
[0028]优选的，一种保护剂的制备方法包括如下步骤：
[0029]步骤一、将甘油溶液灭菌，冷却后备用；
[0030]步骤二、将麦角硫因溶液滤膜过滤备用；
[0031]步骤三、将所述甘油溶液和所述麦角硫因溶液混合，以质量百分比计，甘油占总质量的10％～30％，麦角硫因占总质量的0.05％～2％，混合均匀获得低温保护剂。
[0032]在一种优选的实施方式中，一种保护剂的制备方法包括如下步骤：
[0033]步骤一、将甘油水溶液121℃湿热灭菌20min，冷却后备用；
[0034]步骤二、将麦角硫因水溶液0.22μm滤膜过滤备用；
[0035]步骤三、将所述甘油和所述麦角硫因混合，以质量百分比计，甘油占总质量的10％～30％，麦角硫因占总质量的0.05％～2％，余量为水，混合均匀获得低温保护剂。
[0036]另一方面，本申请还提供了一种菌种保藏的方法，所述方法包括：将菌种加入上述的保护剂中进行保藏。
[0037]优选的，所述保藏温度本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.麦角硫因在菌种保藏和/或菌种保藏的保护剂中的应用。2.一种用于菌种保藏的保护剂，其特征在于，所述保护剂包括麦角硫因。3.根据权利要求2所述的保护剂，其特征在于，以质量百分比计，所述保护剂中麦角硫因的含量为0.01％～5％；优选的，所述保护剂中麦角硫因的含量为0.05％～2％。4.根据权利要求2所述的保护剂，其特征在于，所述保护剂还包括甘油；优选的，以质量百分比计，所述保护剂中甘油的含量为10％～60％；更优选的，10％～30％。5.根据权利要求2所述的保护剂，其特征在于，所述菌种包括细菌和/或真菌；优选的，所述菌种包括细菌；更优选的，所述细菌为乳酸菌和/或双歧杆菌。6.一种如权利要求2～5任一所述的保护剂的制备方法，其特征在于，所述方法包括：将麦角硫因溶于溶剂中混合均匀，即得保护剂；优选的，...

【专利技术属性】
技术研发人员：杜冉冉，陆震，魏玉洁，刘金钊，张明辉，赵岩，孟庆营，王晓，王瑞妍，郭学平，
申请(专利权)人：华熙生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：