一种用于制备L-岩藻糖的工程菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种用于制备L‑岩藻糖的工程菌及其应用，涉及微生物基因工程技术领域。本发明专利技术以改造后的高产2′‑岩藻糖基乳糖的工程菌为出发菌株，对L‑岩藻糖的竞争通路进行敲除，并在此位点整合高效的α‑L‑岩藻糖苷酶，最终得到的重组大肠杆菌在摇瓶发酵时不添加抗生素的条件下实现高产量生产L‑岩藻糖，为L‑岩藻糖提供了一种新的工程菌，有利于L‑岩藻糖的大规模工业生产。

【技术实现步骤摘要】

本申请涉及微生物基因工程，尤其涉及一种用于制备l-岩藻糖的工程菌及其应用。

技术介绍

1、l-岩藻糖(6-脱氧-l-半乳糖)是最常见的天然单糖之一。它很少以游离形式存在，但作为一个重要的成分，广泛存在于多种糖蛋白、糖脂和多糖中。岩藻糖化是一种将l-岩藻糖基团从鸟苷5'-二磷酸l-岩藻糖转移到适当底物上的常见蛋白质、脂质和糖的修饰，对包括细菌、藻类、植物、动物和人类在内的各种生物起着重要作用。近期，对l-岩藻糖单糖本身的健康效应研究和商业开发引起了广泛关注。它通过促进有益微生物形成而塑造肠道菌群，并具有抗炎作用保护肠道健康。它还可以调节脂质代谢，预防缺血/再灌注损伤，治疗先天性糖基化紊乱并显示抗肿瘤活性。它也是一种被许可的商业化妆品成分，可以延缓皮肤衰老。安全评估研究表明l-岩藻糖没有不良效应或遗传毒性，这为其在制药和食品工业的未来商业应用提供了有力支持。

2、除藻类提取、化学合成以及酶促生产以外，通过代谢工程微生物合成l-岩藻糖已受到关注，cn115960812a公开了从用于2′-岩藻基乳糖合成的代谢工程大肠杆菌株的出发，使用外源添加的乳糖作为本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种用于制备L-岩藻糖的工程菌，其特征在于，所述工程菌进行如下A1)-A3)任一及以上改造：

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌过表达α-L-岩藻糖苷酶；优选的，所述过表达由强启动子启动表达。

3.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，编码所述α-L-岩藻糖苷酶的序列包括SEQ ID NO.1或与SEQ ID NO.1具有至少98％统一性的核苷酸序列。

4.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，过表达磷酸甘露糖变位酶-甘露糖-1-磷酸鸟嘌呤基转移酶基因簇，和/或GDP-甘露糖-4,6-脱水酶-GDP-岩藻糖合成酶基因簇；优选...

【技术特征摘要】

1.一种用于制备l-岩藻糖的工程菌，其特征在于，所述工程菌进行如下a1)-a3)任一及以上改造：

2.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，所述工程菌过表达α-l-岩藻糖苷酶；优选的，所述过表达由强启动子启动表达。

3.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，编码所述α-l-岩藻糖苷酶的序列包括seq id no.1或与seq id no.1具有至少98％统一性的核苷酸序列。

4.根据权利要求1所述的工程菌，其特征在于，过表达磷酸甘露糖变位酶-甘露糖-1-磷酸鸟嘌呤基转移酶基因簇，和/或gdp-甘露糖-4,6-脱水酶-gdp-岩藻糖合成酶基因簇；优选地，强启动子表达磷酸甘露糖变位酶-甘露糖-1-磷酸鸟嘌呤基转移酶基因簇，和/或gdp-甘露糖-4,6-脱水酶-gdp-岩藻糖合成酶基因簇；进一步优选地，由组成型强启动子表达磷酸甘露糖变位酶-甘露糖-1-磷酸鸟嘌呤基转移酶基因簇，和/或由组成型强启动子表达gdp-甘露糖-4,6-脱水酶-gdp-岩藻糖合成酶基因簇；再进一步优选地，由pj23119过表达磷酸甘露糖变位酶-甘露糖-1-磷酸鸟嘌呤基转移酶基因簇和ptac70过表达gdp-甘露糖-4,6-脱水酶-gdp-岩藻糖合成酶基因簇，或由pj23119过表达磷酸甘露糖变位酶-甘露糖-1-磷酸鸟嘌呤基转移酶基因簇和pj231...

【专利技术属性】
技术研发人员：沐万孟，陆震，朱莺莺，孟佳炜，孙元军，金艳，王瑞妍，
申请(专利权)人：华熙生物科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：