2'-脱氧肌苷在治疗自身免疫性脑炎中的应用制造技术

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【技术实现步骤摘要】
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脱氧肌苷在治疗自身免疫性脑炎中的应用


[0001]本专利技术属于生物医药
，具体涉及2
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脱氧肌苷在治疗自身免疫性脑炎中的应用。

技术介绍

[0002]多发性硬化(multiple sclerosis，MS)是一种中枢神经系统(central nervous system，CNS)的慢性炎症性自身免疫病，主要病理特点为CNS内多发的髓鞘脱失，轴突变性和神经元损伤。MS好发于20
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40岁女性，其反复发作、逐渐进展导致神经功能的进行性损害，造成患者躯体残疾，认知功能下降，严重影响患者的生活质量。自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis，EAE)是MS的经典动物模型，与人类MS的临床特点及病理特征相似，被广泛应用于MS的基础研究。MS的病因及发病机制虽然尚未明确，但细胞免疫及体液免疫应答的异常被认为在其中发挥重要作用。目前，MS缓解期的治疗以疾病对症治疗(disease modifying therapies，DMTs)为主，然而现有的DMTs药物仅对部分患者有效，且可能产生严重的副作用。因此，积极探寻MS新的免疫调节方法具有重要科研价值。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的在于提供一种2
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脱氧肌苷在治疗自身免疫性脑脊髓炎中的应用。
[0004]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供的技术方案是：2
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脱氧肌苷在治疗自身免疫性脑脊髓炎中的应用。
[0005]优选的技术方案为：2
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脱氧肌苷的结构式如下：
[0006][0007]为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术提供的技术方案是：一种治疗自身免疫性脑脊髓炎的药物组合物：包括2
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脱氧肌苷和药学可接受的材料。
[0008]由于上述技术方案运用，本专利技术与现有技术相比具有的优点是：
[0009]本专利技术证明了2
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脱氧肌苷(DI)抑制淋巴细胞增殖和炎症相关因子的表达。
附图说明
[0010]图1为EAE小鼠模型的建立流程图。
[0011]图2脊髓、脑单个核细胞的分离方法示意图。
[0012]图3EAE小鼠体重和临床评分图。
[0013]图4小鼠脊髓浸润淋巴细胞比较。
[0014]图5小鼠脊髓中淋巴细胞亚群比较。
[0015]图6小鼠脊髓淋巴细胞活化和增殖比较。
[0016]图7小鼠脊髓Th1/Th17/Treg基因表达变化(Q
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PCR)。
[0017]图8小鼠脑部浸润淋巴细胞比较。
[0018]图9小鼠脑部淋巴细胞活化和增殖比较。
[0019]图10脾脏淋巴细胞细胞亚群比较。
[0020]图11脾脏淋巴细胞活化比较。
[0021]图12小鼠脾脏淋巴细胞基因表达变化(Q
‑
PCR)。
[0022]图13小鼠外周血淋巴细胞和单核细胞比较。
[0023]图14小鼠外周血T淋巴细胞比较。
[0024]图15小鼠外周血CD4+/CD8+/Treg淋巴细胞比较。
[0025]图16DI对小鼠脾细胞体外增殖影响的大体图片。
[0026]图17DI对小鼠脾细胞体外增殖影响的荧光检测图。
[0027]图18DI对小鼠脾细胞细胞因子分泌的影响(QPCR/ck)。
具体实施方式
[0028]以下由特定的具体实施例说明本专利技术的实施方式，熟悉此技术的人士可由本实施例所揭露的内容轻易地了解本专利技术的其他优点及功效。
[0029]请参阅图1
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18。须知，本说明书所附图式所绘示的结构、比例、大小等，均仅用以配合说明书所揭示的内容，以供熟悉此技术的人士了解与阅读，并非用以限定本专利技术可实施的限定条件，故不具技术上的实质意义，任何结构的修饰、比例关系的改变或大小的调整。提供以下实施例以便更好地理解本专利技术，而非限制本专利技术。以下实施例中的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的实验材料如无特殊说明，均为常规生化试剂商店购买所得。
[0030]以下实施例所述试剂或材料若无说明，均为市售。
[0031]实施例1：2
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脱氧肌苷在治疗自身免疫性脑脊髓炎中的应用
[0032]一、EAE模型的建立步骤如下(如图1所示)：
[0033](1)抗原注射：按照为0.1ml：10g的体积比腹腔注射水合氯醛，麻醉小鼠。待小鼠麻醉后，背部剃毛，皮下注射200ul MOG
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混合液，分四个部位注射，每个部位50ul。
[0034](2)PTX注射：腹腔注射200ng PTX，48h后再次腹腔注射200ng PTX。
[0035](3)体重及评分记录：以最后一次注射PTX作为第0天，从第1天开始对小鼠进行密切观察，记录每天体重，并按照下表对小鼠临床症状进行评分。
[0036][0037][0038]造模的小鼠都算模型小鼠(0
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5)。
[0039](4)小鼠分组：动物随机分为三组，每组6只，分别为对照组、模型组、2
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脱氧肌苷(以下简称DI)给药组。对照组为正常小鼠，未诱导EAE；模型组和DI给药组均为EAE模型小鼠，其中DI给药组于造模后第1天开始给予DI灌胃，1mg/kg，每天两次，对照组和模型组给予等量无菌水。第20天左右处死动物。
[0040]如图3所示，EAE模型小鼠经DI治疗后，体重减轻程度低(如图3的A)，临床症状评分低(如图3的B)，组内小鼠累计评分低((如图3的C)。
[0041]二、石蜡切片制作：
[0042](1)固定：新鲜完整脊髓在PBS中迅速清洗，去除血污，放入4％多聚甲醛中固定。
[0043](2)脱水:固定结束后流水冲洗三次，依次由70％乙醇、80％乙醇、95％乙醇I、95％乙醇II、无水乙醇I、无水乙醇II各浸泡1h，进行脱水。
[0044](3)透明：依次由无水乙醇、二甲苯I、二甲苯II各浸泡10min透明。
[0045](4)浸蜡：60℃融化的石蜡中浸泡1h。
[0046](5)包埋：截取脊髓腰部膨大段放在包埋模具上，摆好位置，滴加石蜡，待石蜡表面凝固后放入冷冻台，过夜。蜡块可4℃长期储存。
[0047](6)切片：包埋好的脊髓放入切片机进行切片，厚度为3um。
[0048]三、苏木素
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伊红(HE)染色：
[0049](1)脱蜡和水化：60℃烘箱烘片30min，依次放入一下溶液进行处理：二甲苯I10min；二甲苯II 10min；无水乙醇3min；95％乙醇3min；85％乙醇3min；75％乙醇3min；蒸馏水2min。
[0050](2)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
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脱氧肌苷在治疗自身免疫性脑脊髓炎中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：2'
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【专利技术属性】
技术研发人员：何春燕，汪达青，王卓，朱珈漩，
申请(专利权)人：昆山市中医医院，
类型：发明
国别省市：