一株抗炎阿尔莱特葡萄球菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株抗炎阿尔莱特葡萄球菌及其应用，该菌株为阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305，该菌株分离自健康人源，已于2022年6月1日在中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC No：M 2022778。该菌株对透明质酸酶具有良好的抑制作用，且能降低LPS刺激巨噬细胞产生的IL

【技术实现步骤摘要】
一株抗炎阿尔莱特葡萄球菌及其应用


[0001]本专利技术属于微生物
，尤其是涉及一株抗炎阿尔莱特葡萄球菌及其应用。

技术介绍

[0002]皮肤作为人体表面积最大的器官，能够抵御外源性的病原微生物，其表面的常驻微生物和暂驻菌共同维持着平衡，微生物组成的变化将导致皮肤表面稳态失衡，从而造成皮肤结构的改变及免疫系统的激活，引起皮肤问题。皮肤微生态是由细菌、真菌和病毒等微生物、皮肤细胞及其分泌物与免疫系统共同组成的生态系统。皮肤微生态失调，皮肤生物屏障就会被削弱或者破坏，影响皮肤正常的生理机能，乃至被感染，促进皮肤的老化。在特应性皮炎、痤疮和敏感肌肤等炎症性皮肤问题中都存在皮肤微生态失调问题。研究已表明，通过调整皮肤微生态正在成为治疗各种皮肤问题的新途径。皮肤微生物群、宿主皮肤及环境构成皮肤微生态系统，它们之间相互作用、相互制约，保持协调的、生理的、动态的平衡。
[0003]作为皮肤微生态中重要角色的皮肤菌群，在维护皮肤健康中发挥着重要的作用。在健康皮肤上存在大量潜在的有益菌，大量的研究表明：以表皮葡萄球菌为代表的凝固酶阴性葡萄球菌等分泌抗菌肽、分解皮脂生成短链脂肪酸(SCFAs)、核苷等代谢物，具有抗菌、抗炎、免疫调节、增强皮肤屏障功能、抗癌等多种生理功能，是潜在的皮肤有益菌(Stacy A,Belkaid Y.Microbial guardians of skin health[J].Science,2019,363(6424):227
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228.)。基于皮肤菌在维护皮肤健康中重要的作用，将来皮肤菌以及代谢产物可能用于皮肤健康的护理中。已有研究从自体皮肤中分离出微生物，将其与凝胶混合制成新型化妆品，显著改善了皮肤的保湿性(Yuichi Nodakea,Saki Matsumotoa,b.Pilot study on novel skin care method by augmentation with Staphylococcus epidermidis,an autologous skin microbe
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A blinded randomized clinical trial[J].Journal of Dermatological Science 79,2015,119
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126)。在皮肤中寻找有益菌应用到化妆品中具有广阔的应用前景。
[0004]目前国内缺乏健康人群来源的皮肤菌以及功能菌株的筛选，更未见有关阿尔莱特葡萄球菌筛选的报道。从健康皮肤上分离菌株，进行功效菌株筛选和验证，可以为皮肤有益菌的开发和微生态护肤品的开发奠定基础。

技术实现思路

[0005]针对上述现有技术存在的不足，本专利技术提供了一株凝固酶阴性葡萄球菌——阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305及其应用。该菌株对透明质酸酶具有良好的抑制作用，且能降低LPS刺激巨噬细胞产生的IL
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6水平，在抗炎、舒缓微生态护肤品开发方面具有良好的应用前景。
[0006]本专利技术的第一个目的是提供一株阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305，该菌株分离自健康人源(健康人皮肤上)，已于2022年6月1日在中国典型培养物保藏中心保藏(保藏地址：中国.武汉.武汉大学)，保藏编号为CCTCC No：M 2022778。
[0007]上述菌株的菌落特征为：从图1A可以看出，菌株CCSM0305在TSA固体血平板上菌落小而微偏黄，形成圆形凸起，边缘整齐，菌落直径大约为1～1.2mm，表面光滑，湿润，不透明，挑取能拉丝，无溶血圈。
[0008]上述菌株的菌体特征为：从图1B可以看出，革兰氏染色阳性。菌体特征呈球形，直径0.9～1.0μm左右，排列成葡萄状，也有单个排列，无鞭毛，不能运动，不产芽孢。
[0009]本专利技术的第二个目的是提供阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305的发酵方法，其特征是，将活化好的阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0335接种到TSB液体培养基中，30～40℃摇床振荡培养16～20h，调整菌体OD
600
在0.9～1.1范围，作为种子液；以体积比1～3％接种量将种子液接种到TSB液体培养基中，培养温度30～40℃，震荡培养10～15h，得到阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305的发酵液，离心，获得的离心上清液即为发酵上清液。
[0010]本专利技术的第三个目的是提供阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305和上述的发酵液上清在皮肤抗炎方面的应用。
[0011]本专利技术的第四个目的是提供阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305和上述的发酵液上清在对抗炎症因子对皮肤损伤，制备抗炎、舒缓微生态护肤品方面的应用。
[0012]上述的抗炎包括抑制透明质酸酶和降低LPS引起的巨噬细胞炎症因子IL
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6。
[0013]与现有技术相比，本专利技术提供了一株分离自健康人源的阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305，经过试验证明，该菌株的发酵上清对透明质酸酶抑制率达64％，IL
‑
6表达方面与阳性对照LPS相比，可显著降低LPS引起的巨噬细胞IL
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6表达，下降17.9％。因此，本专利技术的菌株在对抗炎症因子对皮肤损伤，在抗炎、舒缓微生态护肤品开发方面具有良好的应用前景，填充了阿尔莱特葡萄球菌在抗炎功效筛选中的空白。
附图说明
[0014]图1为阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305的菌落形态及显微镜照片；其中A图为菌落形态，B图为显微照片；
[0015]图2为阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305的生长曲线；
[0016]图3为阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305发酵上清对巨噬细胞RAW264.7细胞毒性；
[0017]图4为阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305发酵上清对LPS引起的巨噬细胞RAW264.7表达IL
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6的影响。
具体实施方式
[0018]下面通过实施例的方式进一步说明本专利技术，但并不因此将本专利技术限制在所述的实施例范围之中。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，按照常规方法和条件，或按照商品说明书选择。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本专利技术，而不构成对本专利技术的限制。
[0019]实施例1：菌株CCSM0305的分离、筛选与纯化
[0020](1)招募完美肌肤志愿者<本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305，其保藏编号为CCTCC No：M 2022778。2.权利要求1所述的阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305的发酵方法，其特征是，采用TSB液体培养基发酵，发酵液离心，获得发酵上清液。3.如权利要求2所述的阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0305的发酵方法，其特征是，将活化好的阿尔莱特葡萄球菌(Staphylococcus arlettae)CCSM0335接种到TSB液体培养基中，30～40℃摇床振荡培养16～20h，调整菌体OD600在0.9～1.1范围，作为种子液；以体积比1～3％接种量将种子液接种到TSB液体培养基中，培养温度30～40℃，震荡培养10～15h，得到阿尔莱特葡萄球菌(Staph...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨素珍，袁春颖，李燕，韩婷婷，刘三岭，姜姗姗，陈玉荣，徐佩佩，杨瑞娟，白天明，张辉，
申请(专利权)人：山东福瑞达生物股份有限公司，
类型：发明
国别省市：