一种与肉鸡抗体滴度相关的分子标记、检测方法及应用技术

本发明专利技术公开了一种与肉鸡抗体滴度相关的分子标记、检测方法及应用，属于家禽遗传育种技术领域。所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述核苷酸序列的第145位碱基为SNP位点，该位点存在A/T突变，基因型为AA和AT。本发明专利技术还提供了检测分子标记的引物对和检测方法，实验结果显示，利用该检测方法能够高效灵敏快捷的检测分子标记的核苷酸序列，以筛选鉴定高抗体滴度肉鸡品种。本发明专利技术的实施能够有效筛选抗体滴度较高的肉鸡，为肉鸡的遗传育种提供了新的技术方案，适合在肉鸡养殖产业上大规模推广应用。模推广应用。模推广应用。

【技术实现步骤摘要】
一种与肉鸡抗体滴度相关的分子标记、检测方法及应用


[0001]本专利技术涉及家禽遗传育种
，特别是涉及一种与肉鸡抗体滴度相关的分子标记、检测方法及应用。

技术介绍

[0002]近年来，养禽业受到多种疫病的严重威胁，禽流感、新城疫、禽白血病等疫病不仅对全球养禽业造成巨大经济损失，甚至有的疫病会影响到人类的健康安全。影响鸡免疫力的因素有遗传、营养、环境等，而高温就是主要因素之一。夏季的持续高温会降低家禽的免疫力和抗病能力，给家禽集约化生产造成严重经济损失。热应激状态下，鸡对某些病原菌易感性增加，导致疾病的发生。近年来，畜禽抗病性能的遗传育种越来越受到重视，培育出抗病力强的品种成为了育种者的目标。因为前期人们为了提高生产性能而对主要的经济性状进行了高强度的选择，可能导致了抗病力的下降。
[0003]分子标记辅助选择(MAS)是一种常用的分子育种技术。MAS可以直接根据遗传物质的多态性进行相应的分析，如单核苷酸多态性(SNP)。分子标记辅助选择技术在其他家畜的育种中已有相当长的历史，与传统育种方法相比，MAS具有存在范围广、遗传稳定、直观准确等优点，目前并未大规模的应用于鸡的育种中。其原因一方面是对于鸡的经济性状的分子标记研究和挖掘较少，可应用于实际育种中选择重要经济性状的分子标记不足；另一方面是分子标记的检测往往成本较高，在世代间隔短、育种群体大的鸡育种中应用分子标记辅助选择技术的成本较常规育种方法更高。但随着更多低成本检测技术的发展以及分子标记的开发，分子标记辅助选择技术在鸡的育种中的应用成本显著降低，因此，进一步挖掘分子水平上与鸡重要经济性状相关的候选基因，通过对其多态性的研究并建立相关分子遗传标记，可以有效推动优质鸡的育种工作。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的是提供一种与肉鸡抗体滴度相关的分子标记、检测方法及应用，以解决上述现有技术存在的问题，利用直接测序DMA基因序列，发现其与肉鸡抗体滴度相关的SNP位点，该位点能够特异性检测具有高抗体滴度的麻黄肉鸡，为鸡的标记辅助选择提供新的分子标记资源。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：
[0006]本专利技术提供一种与肉鸡抗体滴度相关的分子标记，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述核苷酸序列的第145位碱基为SNP位点，该位点存在A/T突变。
[0007]优选的是，所述SNP位点的基因型为AA和AT。
[0008]本专利技术还提供用于检测所述的分子标记的引物对，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.2
‑
3所示。
[0009]本专利技术还提供一种检测肉鸡抗体滴度的试剂盒，所述试剂盒包括检测权利要求1所述的分子标记的试剂。
[0010]优选的是，所述试剂包括检测所述分子标记的引物对，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.2
‑
3所示。
[0011]本专利技术还提供所述的分子标记、所述的引物对或者所述的试剂盒在筛选高抗体滴度肉鸡中的应用。
[0012]本专利技术还提供一种利用所述的分子标记筛选高抗体滴度肉鸡的方法，包括以下步骤：以待检测鸡的基因组DNA为模板，PCR扩增所述分子标记的核苷酸序列，经测序，分析序列SNP位点的基因型，保留具有高抗体滴度基因型的鸡个体。
[0013]优选的是，所述PCR扩增的引物为如SEQ ID NO.2
‑
3所示的引物对。
[0014]优选的是，所述PCR扩增的反应体系为：DNA模板1μg，2
×
M5 HiPer plus Taq HiFi PCR mix 15μL，上下游引物各1μL，ddH2O补足至30μL；
[0015]所述PCR扩增的反应程序为：95℃预变性3min；94℃变性25s，55℃退火25s，72℃延伸15s，34个循环；72℃延伸5min。
[0016]优选的是，根据所述分子标记的SNP位点的基因型，保留具有高抗体滴度的AA型鸡个体。
[0017]本专利技术公开了以下技术效果：
[0018]本专利技术以麻黄肉鸡为研究对象，以H9亚型禽流感、新城疫(ND)抗体滴度为主要目标性状，选取前期筛选的影响鸡抗原递呈的关键基因DMA，进一步分析相关基因的变异对H9、ND抗体滴度性状的影响，经实验鉴定出与麻黄鸡免疫性状关联的SNP，本专利技术所选择的SNP位点是独特的，具有很高的广义遗传力，能准确的筛选出高抗体滴度肉鸡。本专利技术揭示基因变异与免疫性状的相关性，为麻黄鸡免疫应答性状的分子标记辅助选择奠定基础。
[0019]本专利技术筛选方法操作简便，速度快、成本低、准确度高。本专利技术的实施能够有效筛选高抗体滴度肉鸡，为肉鸡的遗传育种提供了新的技术方案，适合在肉鸡养殖产业上大规模推广应用。
附图说明
[0020]为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0021]图1为琼脂糖凝胶电泳结果，其中M为DNAMarker II的Marker(自上而下分别为1200、900、700、500、3000、100bp)；1为PCR产物；
[0022]图2为DMA基因多态位点不同基因型。
具体实施方式
[0023]现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。
[0024]应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值，以及任何其他陈述值或在所述范围内的
中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。
[0025]除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。
[0026]在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本专利技术说明书和实施例仅是示例性的。
[0027]关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。
[0028]实施例1SNP位点筛选
[0029]1、实验对象
[0030]选择SNP分本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种与肉鸡抗体滴度相关的分子标记，其特征在于，所述分子标记的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述核苷酸序列的第145位碱基为SNP位点，该位点存在A/T突变。2.如权利要求1所述的分子标记，其特征在于，所述SNP位点的基因型为AA和AT。3.用于检测权利要求1所述的分子标记的引物对，其特征在于，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.2
‑
3所示。4.一种检测肉鸡抗体滴度的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括检测权利要求1所述的分子标记的试剂。5.如权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂包括检测所述分子标记的引物对，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO.2
‑
3所示。6.如权利要求1
‑
2任一项所述的分子标记、权利要求3所述的引物对或者权利要求4
‑
5任一项所述的试剂盒在筛选高抗体滴度肉鸡中的应用。7.一种利...

【专利技术属性】
技术研发人员：江伟烽，罗庆斌，曾宪军，樊志红，范折霞，张细权，陈杰，何叔年，王炜，杜永飞，陈远居，王济新，
申请(专利权)人：华南农业大学广州市江丰实业股份有限公司广州市江丰种业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：