一种石胆酸生产工艺制造技术

本发明专利技术公开了一种石胆酸生产工艺，生产工艺包括如下步骤：步骤1：鹅去氧胆酸的制备；步骤2：催化转化；步骤3：以鹅去氧胆酸为原料，加入适宜溶剂；步骤4：在上述溶液中加入试剂与催化剂；步骤5：在上述溶液系统中加入手性诱导剂、不对称合成催化剂、叔丁醇或辛戊醇，将鹅去氧胆酸的7α

【技术实现步骤摘要】
一种石胆酸生产工艺


[0001]本专利技术涉及石胆酸生产
，更具体为一种石胆酸生产工艺。

技术介绍

[0002]鹅去氧胆酸(chenodeoxycholicacid，简称CDCA)化学名为3α，7α
‑
二羟基
‑
5β
‑
胆烷酸，分子式C24H40O4，分子量392.58。是1848年首次从鹅胆汁中提取得到的。鹅去氧胆酸具有溶解胆结石的能力和其它药学功能，自上世纪七十年代以来，在临床上被用作治疗胆结石和其它肝胆疾病的药物。近年的研究发现，在溶解胆结石方面，鹅去氧胆酸的同分异构体熊去氧胆酸的临床应用效果更好，且没有副作用。因此，在溶解胆结石药物的临床应用方面，熊去氧胆酸逐渐取代了鹅去氧胆酸。
[0003]通过化学合成方法获得熊去氧胆酸变得越来越重要。近年，以鹅去氧胆酸为原料，合成熊去氧胆酸工艺过程大大简化，成为合成熊去氧胆酸的主要途径。因此，需要提供一种新的技术方案给予解决。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一种石胆酸生产工艺，解决了通过化学合成方法获得熊去氧胆酸变得越来越重要。近年，以鹅去氧胆酸为原料，合成熊去氧胆酸工艺过程大大简化，成为合成熊去氧胆酸的主要途径的问题。
[0005]为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种石胆酸生产工艺，所述石胆酸生产工艺包括如下步骤：
[0006]步骤1：鹅去氧胆酸的制备
[0007]S1：收集鹅盲肠部分，木片刮取肠黏膜，将得到的鹅盲肠黏膜液体置于离心管中，加少量蒸馏水稀释震荡摇匀后，离心，汲取上清液；
[0008]S2：无菌环境下，将上述得到上清液接种在含0.1％石胆酸的液态LB培养基上；避光，控制温度15～25℃，接种3～4天后将培养基上长出的菌落重新接种在含1％石胆酸的液态LB培养基上，避光，控制温度15～25℃，培养3～4天，得所需菌种，0～4℃保存在试管斜面培养基上，待用；
[0009]S3：上述得到菌种，转到三角瓶内含1％石胆酸的液态LB培养基内，避光，控制温度15～25℃，密闭培养3～4天，取出，加入占三角瓶内含1％石胆酸的液态LB培养基的体积的1～2倍量蒸馏水稀释后，将稀释液调pH值至7.0～7.2后置入高速组织捣碎机进行捣碎2～4小时，离心，汲取上清液；
[0010]S4：收集上述上清液，即为7α
‑
羟化酶液，置于
‑
20℃以下保存，待用；
[0011]步骤2：催化转化
[0012]S1：将石胆酸投入反应瓶中，加入0.1mol/L的三乙胺
‑
盐酸1：1缓冲溶液，三乙胺
‑
盐酸缓冲溶液用量与石胆酸用量比为15：1至25：1mL/g，搅拌下滴加1mol/L氢氧化钠溶液调pH值至7.0～7.2，反应30分钟至完全溶解；
[0013]S2：加入7α
‑
羟化酶液至上述溶液，继续加入还原型辅酶II；7α
‑
羟化酶液用量与石胆酸用量比为1：1至3：1mL/g，还原型辅酶II与石胆酸用量比为1：600至1：400g/g；常温下，鼓入空气，滴加稀盐酸维持pH值7.0～7.2搅拌反应8小时，高效液相色谱法分析显示石胆酸峰值消失，确认反应完全
[0014]S3：加入10mol/L氢氧化钠溶液调pH值至10～11，升温至50℃，搅拌30分钟；加入乙酸乙酯，用50％硫酸调pH值至3～4，进行萃取，静置分去下层水层；将乙酸乙酯通过硅藻土层进行过滤；
[0015]S4：60℃下浓缩滤液至滤液体积为加入的乙酸乙酯体积的一半时，加入与滤液体积相同体积的正庚烷，缓慢搅拌，降温至0～5℃，结晶4小时，过滤得到鹅去氧胆酸精品。
[0016]步骤3：以鹅去氧胆酸为原料，加入适宜溶剂；
[0017]步骤4：在上述溶液中加入试剂与催化剂；
[0018]步骤5：在上述溶液系统中加入手性诱导剂、不对称合成催化剂、叔丁醇或辛戊醇，充氢气加压至0.2
‑
3MPa，在温度25～80℃、微波频率300～1000MHz、功率50～1500W的条件下辐射1～6h，将鹅去氧胆酸的7α
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羟基一步转换成为7β
‑
羟基，生成熊去氧胆酸；
[0019]步骤6：将生成的熊去氧胆酸粗品洗涤、过滤去杂；选择相应的溶剂萃取掉没有反应的鹅去氧胆酸及其他杂质；在真空度10
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20KPa、温度30
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80℃的条件下烘干熊去氧胆酸，收集并包装成品。
[0020]作为本专利技术的一种优选实施方式，所述步骤1中的适宜溶剂为二元醇、三元醇或带有β支链的醇。
[0021]作为本专利技术的一种优选实施方式，所述步骤4中的试剂为(1R，3S)
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(+)
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樟脑酸、S
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(+)扁桃酸或二对甲苯酰D
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酒石酸。
[0022]作为本专利技术的一种优选实施方式，所述步骤4中的催化剂为三氧化二铝或五氧化二钒。
[0023]作为本专利技术的一种优选实施方式，所述步骤5中的手性诱导剂为苯胺甲基吡咯烷。
[0024]作为本专利技术的一种优选实施方式，所述步骤5中的不对称合成催化剂为双(2
‑
甲氧基乙氧基)二氢铝钠。
[0025]作为本专利技术的一种优选实施方式，所述步骤6中的溶剂为甲酸乙酯、乙酸乙酯或乙酸异丙酯。
[0026]与现有技术相比，本专利技术的有益效果如下：
[0027]本专利技术采用鹅去氧胆酸为原料，先选择性将3α
‑
羟基生成衍生物，再利用不对称合成催化剂、手性诱导剂并用微波辐射三者协同作用，进一步将鹅去氧胆酸转变成为熊去氧胆酸，该工艺流程简单，设备投资少，所用化学试剂少，转化率较高，既充分利用了原料，又提高了生产效率，而且生产成本与耗能大幅降低，适宜工业化生产。
具体实施方式
[0028]下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0029]本专利技术提供一种石胆酸生产工艺，所述石胆酸生产工艺包括如下步骤：
[0030]步骤1：鹅去氧胆酸的制备
[0031]S1：收集鹅盲肠部分，木片刮取肠黏膜，将得到的鹅盲肠黏膜液体置于离心管中，加少量蒸馏水稀释震荡摇匀后，离心，汲取上清液；
[0032]S2：无菌环境下，将上述得到上清液接种在含0.1％石胆酸的液态LB培养基上；避光，控制温度15～25℃，接种3～4天后将培养基上长出的菌落重新接种在含1％石胆酸的液态LB培养基上，避光，控制温度15～25℃，培养3～4天，得所需菌种，0～4℃保存在试管斜面培养基上，待用；
[0033]S3：上述得到菌种，转本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种石胆酸生产工艺，其特征在于：所述石胆酸生产工艺包括如下步骤：步骤1：鹅去氧胆酸的制备S1：收集鹅盲肠部分，木片刮取肠黏膜，将得到的鹅盲肠黏膜液体置于离心管中，加少量蒸馏水稀释震荡摇匀后，离心，汲取上清液；S2：无菌环境下，将上述得到上清液接种在含0.1％石胆酸的液态LB培养基上；避光，控制温度15～25℃，接种3～4天后将培养基上长出的菌落重新接种在含1％石胆酸的液态LB培养基上，避光，控制温度15～25℃，培养3～4天，得所需菌种，0～4℃保存在试管斜面培养基上，待用；S3：上述得到菌种，转到三角瓶内含1％石胆酸的液态LB培养基内，避光，控制温度15～25℃，密闭培养3～4天，取出，加入占三角瓶内含1％石胆酸的液态LB培养基的体积的1～2倍量蒸馏水稀释后，将稀释液调pH值至7.0～7.2后置入高速组织捣碎机进行捣碎2～4小时，离心，汲取上清液；S4：收集上述上清液，即为7α
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羟化酶液，置于
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20℃以下保存，待用；步骤2：催化转化S1：将石胆酸投入反应瓶中，加入0.1mol/L的三乙胺
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盐酸1：1缓冲溶液，三乙胺
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盐酸缓冲溶液用量与石胆酸用量比为15：1至25：1mL/g，搅拌下滴加1mol/L氢氧化钠溶液调pH值至7.0～7.2，反应30分钟至完全溶解；S2：加入7α
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羟化酶液至上述溶液，继续加入还原型辅酶II；7α
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羟化酶液用量与石胆酸用量比为1：1至3：1mL/g，还原型辅酶II与石胆酸用量比为1：600至1：400g/g；常温下，鼓入空气，滴加稀盐酸维持pH值7.0～7.2搅拌反应8小时，高效液相色谱法分析显示石胆酸峰值消失，确认反应完全S3：加入10mol/L氢氧化钠溶液调pH值至10～11，升温至50℃，搅拌30分钟；加入乙酸乙酯，用50％硫酸调pH值至3～4，进行萃取，静置分去下层水层；将乙酸乙酯通过硅藻土层进行...

【专利技术属性】
技术研发人员：陆佰魁，潘秀东，郝荣华，孙光远，葛虎，
申请(专利权)人：新沂大江化工有限公司，
类型：发明
国别省市：