大豆肽联合乳酸菌在制备抑制肠道病原菌产品中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种大豆肽联合乳酸菌在制备抑制肠道病原菌产品中的应用，属于肠道调节技术领域。本发明专利技术所述大豆肽通过促进罗伊氏乳杆菌LR08活细胞数和产酸量的提升，与大肠杆菌ESS竞争氮源能力的提升，并协同其抑制大肠杆菌ESS的活性，以解决肠道菌群紊乱相关的潜在问题，达到调节肠道菌群、维护肠道健康的技术效果。效果。效果。

【技术实现步骤摘要】
大豆肽联合乳酸菌在制备抑制肠道病原菌产品中的应用


[0001]本专利技术属于肠道调节
，尤其涉及一种大豆肽联合乳酸菌在制备抑制肠道病原菌产品中的应用。

技术介绍

[0002]肠道疾病是目前国内外频发的疾病，肠道疾病与不良的生活习惯有关，例如熬夜、抽烟酗酒、饮食不规律、长期服用药物等，都会引起肠道紊乱，导致益生菌减少，致病菌增多，严重时导致死亡。2019年欧盟报告了2621例人类李斯特菌病确诊病例。世界卫生组织报道每年约有42万人死于摄入被致病菌感染的食物。因此，维持肠道稳态，调节肠道菌群非常重要。
[0003]目前蛋白质类物质也被证明具有潜在的益生功能，能显著促进双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌等益生菌的生长和代谢，从而起到调节肠道菌群的作用。大豆肽具有降血糖、降血压、调节免疫、缓解焦虑等功能的生物活性物质，具有潜在的益生功能。然而，关于大豆肽在肠道中主要发挥的作用尚不清楚，其是否能协同乳酸菌抑制致病菌目前也未有报道。

技术实现思路

[0004]有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种大豆肽联合乳酸菌在制备抑制肠道病原菌产品中的应用。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供了以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了大豆肽联合乳酸菌在制备抑制肠道病原菌产品中的应用。
[0007]优选的，所述大豆肽中相对分子质量低于1000Da的占总质量的85％以上。
[0008]优选的，所述大豆肽与乳酸菌协同抑制肠道病原菌。
[0009]优选的，所述乳酸菌为罗伊氏乳杆菌LR08。
[0010]优选的，所述肠道病原菌为大肠杆菌ESS。
[0011]优选的，所述大豆肽能提高乳酸菌的活性和产酸能力。
[0012]优选的，所述大豆肽能提高罗伊氏乳杆菌LR08利用氮源的速率从而提高与大肠杆菌ESS竞争营养的能力。
[0013]优选的，所述产品包括保健品、食品或者药品。
[0014]本专利技术还提供了一种含有大豆肽的培养基，以MRS为基础培养基，以大豆肽替换MRS培养基中的一半氮源；所述大豆肽为经体外模拟胃肠道消化后的大豆肽。
[0015]优选的，所述大豆肽在所述培养基中的浓度为12
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14g/L。
[0016]相对于现有技术，本专利技术具有如下有益效果：
[0017]本专利技术提供了一种大豆肽联合乳酸菌在制备抑制肠道病原菌产品中的应用，所述大豆肽通过促进罗伊氏乳杆菌LR08活细胞数和产酸量的提升，其与大肠杆菌ESS竞争氮源能力的提升，并协同其抑制大肠杆菌ESS的活性，以解决肠道菌群紊乱相关的潜在问题，达
到调节肠道菌群、维护肠道健康的技术效果。
附图说明
[0018]图1为不同处理对罗伊氏乳杆菌LR08和大肠杆菌ESS形态、活菌数和有机酸的影响；
[0019]图2不同处理对罗伊氏乳杆菌LR08抑制大肠杆菌ESS作用的影响；
[0020]图3不同处理对罗伊氏乳杆菌LR08和大肠杆菌ESS利用氮源的影响。
具体实施方式
[0021]本专利技术提供了大豆肽联合乳酸菌在制备抑制肠道病原菌产品中的应用。
[0022]在本专利技术中，所述大豆肽中相对分子质量低于1000Da优选占总质量的85％以上。
[0023]本专利技术对所述大豆肽的制备方法没有特殊限定，采用本领域常用方法即可。作为一种可实施方式，优选包括：1)将大豆清洗、烘干、粉碎、过筛，得到大豆粉；2)采用碱提酸沉法提取所述大豆粉中的大豆蛋白；3)将所述大豆蛋白用复合酶进行酶解，得到大豆蛋白酶解产物；4)采用不同分子量的膜分离所述富硒大豆蛋白酶解产物，得到大豆肽。该优选制备方法为申请号为201610021384.4专利实施例1中的技术方案。本专利技术所述大豆肽中相对分子质量低于1000Da占总质量的85％以上，含3
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5个氨基酸残基的肽占69.3％，且其中73.6％具有亲水性，超过5个氨基酸的肽多为疏水性的，占82.3％。此外，其中一些肽还具有碳末端为精氨酸或碳末端第二位为脯氨酸的特点，分别占14.18％和51.34％。
[0024]本专利技术所述乳酸菌为罗伊氏乳杆菌LR08；所述肠道病原菌为大肠杆菌ESS；本专利技术所述罗伊氏乳杆菌LR08与大肠杆菌ESS均来自于中国普通微生物菌种保藏管理中心；所述罗伊氏乳杆菌LR08的保藏编号为CGMCCNo.1.12733，大肠杆菌ESS的保藏编号为CGMCC No.1.12881。
[0025]本专利技术所述大豆肽与乳酸菌协同抑制肠道病原菌；本专利技术所述大豆肽能提高乳酸菌的活性和产酸能力；所述大豆肽在病原菌存在的环境下仍能够提高乳酸菌活菌数；所述大豆肽能提高乳酸菌利用氮源能力。
[0026]本专利技术根据不同的培养基配方，分为四组：对照组、空白组、大豆肽组和大豆蛋白组，分别将罗伊氏乳杆菌LR08和大肠杆菌ESS接种于不同的培养基中，通过单培养和共培养的菌液检测相应的增殖和产酸情况。实验结果表明：大豆肽对单培养的罗伊氏乳杆菌LR08促进增殖和产酸的效果更为显著；共培养中大肠杆菌活菌数的减少率在大豆肽组和大豆蛋白组中高于空白组和对照组，大豆肽与罗伊氏乳杆菌LR08共同作用大肠杆菌时，其活菌数显著低于大豆肽单独作用，表明消化后的大豆肽协同罗伊氏乳杆菌LR08抑制了大肠杆菌ESS的增殖。
[0027]本专利技术所述大豆肽能提高罗伊氏乳杆菌LR08利用氮源的速率以及与大肠杆菌ESS竞争营养的能力。
[0028]本专利技术将罗伊氏乳杆菌LR08和大肠杆菌ESS接种到不同的处理组中，收集菌液，离心收集上清液，测量蛋白质浓度。实验结果表明：使用含有大豆肽的培养基后，罗伊氏乳杆菌LR084 h的氮源利用率提升了19.58％，而大肠杆菌ESS则下降了3.32％，并且直到16h罗伊氏乳杆菌LR08的氮源利用率仍比大肠杆菌ESS高18.36％，表明大豆肽显著提高了罗伊氏
乳杆菌LR08对氮源的利用能力以及利用速率，从而在罗伊氏乳杆菌LR08与大肠杆菌ESS竞争过程中，仍能促进其活性，且抑制大肠杆菌ESS的增殖。
[0029]本专利技术所述产品优选包括保健品、食品或者药品。
[0030]本专利技术还提供了一种含有大豆肽的培养基，以MRS为基础培养基，添加大豆肽；所述大豆肽为经体外模拟胃肠道消化后的大豆肽。
[0031]本专利技术所述大豆肽在所述培养基中的浓度优选为12
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14g/L，更优选为13.214g/L。
[0032]下面结合实施例对本专利技术提供的技术方案进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。
[0033]实施例1
[0034]大豆肽的制备
[0035]1)将大豆清洗、烘干、粉碎、过筛，得到大豆粉；
[0036]2)采用碱提酸沉法提取所述大豆粉中的大豆蛋白；
[0037]3)将所述大豆蛋白用复合酶进行酶解，得到大豆蛋白酶解产物；
[0038]4)采用膜分离所述富硒大豆蛋白酶解产本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.大豆肽联合乳酸菌在制备抑制肠道病原菌产品中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述大豆肽中相对分子质量低于1000Da的占总质量的85％以上。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述大豆肽与乳酸菌协同抑制肠道病原菌。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述乳酸菌为罗伊氏乳杆菌LR08；所述肠道病原菌为大肠杆菌ESS。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述大豆肽能提高乳酸菌的活性和产酸能力。6.根据权利要求4所述的应用...

【专利技术属性】
技术研发人员：张弛，张银肖，王静怡，温雁超，李赫，刘新旗，
申请(专利权)人：北京工商大学，
类型：发明
国别省市：